المختبر البكتريولوجي: أثاث وملابس وأواني خاصة. غرفة المختبر البكتريولوجي غرفة المختبر البكتريولوجي ومعدات مكان العمل

صفحة 5 من 91

توجد المعامل البكتريولوجية في المستشفيات والعيادات الشاملة أو بشكل مستقل عنها لإجراء البحوث الميكروبيولوجية. يتلقون للبحث عن مواد مختلفة حصلوا عليها من مرضى (بلغم ، بول ، صديد ، براز ، دم ، السائل النخاعيإلخ.). بالإضافة إلى ذلك ، توجد أيضًا مختبرات صحية وبكتريولوجية تخضع فيها منتجات المياه والهواء والمواد الغذائية للتحكم البكتيري.
دور المختبرات البكتريولوجية كبير أيضًا في الوقاية أمراض معدية. يستمر بعض الأشخاص بعد إصابتهم بمرض معدي (حمى التيفود ، والدوسنتاريا ، والدفتيريا ، وما إلى ذلك) في إفرازهم في بيئةالميكروبات المسببة للأمراض (الممرضة). هذه هي ما يسمى ناقلات البكتيريا. من بين الأشخاص الأصحاءتم العثور أيضًا على ناقلات بكتيرية. من خلال تحديد ناقلات البكتيريا ، تساعد المختبرات البكتريولوجية السلطات الصحية في تنفيذ عدد من التدابير الوقائية.
يمكن أن تسبب المياه والأغذية الملوثة بالكائنات الحية الدقيقة المسببة للأمراض أوبئة (أمراض جماعية) من حمى التيفود والكوليرا وما إلى ذلك ، وهذا هو سبب أهمية المراقبة الصحية والبكتريولوجية اليومية للجودة الجيدة يشرب الماءوالحليب ومنتجات أخرى.
يجب أن يحتوي المختبر البكتيريولوجي تحت تصرفه على ثلاث غرف على الأقل: 1) غرفة صغيرة - مكتب استقبال لاستلام الاختبارات وإصدارها ؛ 2) متوسطة وغسيل - لتحضير وسائط المغذيات وغسل الأطباق ؛ 3) معمل لإنتاج البحوث البكتريولوجية. من المستحسن أن يكون لديك غرفة لحفظ حيوانات التجارب (vivarium). يجب أن تحتوي كل غرفة على أثاث مناسب (طاولات مطبخ ومختبر ، وخزائن مختلفة ، ومقاعد ، وما إلى ذلك).
فيما يلي قائمة بأهم العناصر المطلوبة لأعمال المختبر اليومية. الغرض من استخدامها وكيفية التعامل معها وكذلك مبدأ الجهاز موصوف في الأقسام ذات الصلة من الدورة.
الأجهزة البصرية. ميكروسكوب بيولوجي مع نظام غمر ، مكبرات ، منظار التراص.
أجهزة التعقيم والتدفئة. الأوتوكلاف ، جهاز بخار السوائل ، فرن ، فلاتر سيتز ، ترموستات ، معقمات للأدوات.
معدات لبيئات الطهي. قمع للترشيح الساخن ، قمع لوسائل السكب ، حمام مائي ، قدور مختلفة الأحجام ، موازين معايرة بالأوزان ، مفرمة لحم ، حوامل معدنية وخشبية للترشيح.
الادوات. مشرط بأشكال وأحجام مختلفة: أقنعة ، مستقيمة ، منحنية ، حادة ، معوية ، تشريحية ، ملاقط جراحية ، محاقن.
العناصر الزجاجية. شرائح زجاجية ، شرائح زجاجية بفتحة ، أغطية ، أنابيب اختبار جرثومية ، أنابيب اختبار قصيرة للتفاعلات المصلية (تراص) ، أجهزة طرد مركزي ، أكواب Heidepreich * ، أنابيب وقضبان زجاجية ، ماصات متدرجة لـ 1 ، 2 ، 5 ، 10 مل ، ماصات باستور ، قوارير زجاجية للدهانات مع ماصات ، أكواب زجاجية ودوارق بأحجام مختلفة ، اسطوانات بأحجام مختلفة ، قمع للتصفية ، إلخ.

* حتى الآن ، بين معظم علماء الأحياء الدقيقة وفي الكتب المدرسية ، تسمى أطباق الحصول على مستعمرات معزولة من الميكروبات أطباق بتري ، وليس أطباق هايدنريتش ، والتي لا تتوافق مع الوضع الحقيقي للأمور. تم إدخال الكؤوس لأول مرة في الممارسة المختبرية بواسطة عالم الأحياء الدقيقة الروسي Heidenreich.

أصناف متنوعة. حلقة بكتيرية ، سلك بلاتينيوم ، أنابيب مطاطية ، موازين قرن محمولة بأوزان ، حوامل (خشبية ، معدنية) لأنابيب الاختبار ، موازين الحرارة ، أقفاص للحيوانات ، أجهزة لتثبيت الحيوانات ، أجهزة طرد مركزي.
مواد كيميائية ، دهانات ، مواد للوسائط ، إلخ. Agar-agar ، جيلاتين ، صفائح بيضاء ، زيت غمر ، ورق ترشيح ، صوف قطني ماص وعادي ، شاش ، الإيثانول، دهانات الأنيلين (أرجواني ، جنطيانا وبنفسجي كريستالي ، فيزوفين ، ميثيلين أزرق ، محايد ، سافرانين ، إلخ) ، دهان جيمسا ، أحماض (نيتريك ، هيدروكلوريك ، كبريت ، كربوليك ، فوسفوريك ، بيكريك ، أكساليك ، إلخ) ، قلويات (كاوية) البوتاس ، الصودا الكاوية ، الأمونيا ، الصودا) ، الأملاح (نترات البوتاسيوم ، برمنجنات البوتاسيوم ، كبريتات الصوديوم ، كلوريد الصوديوم ، إلخ).

طاولة المختبر

لإجراء دراسة ميكروبيولوجية ، يجب أن يكون لدى مساعد المختبر مكان عمل مجهز بشكل مناسب. يجب أن يكون لطاولة المختبر ارتفاع معين حتى يسهل المجهر أثناء الجلوس عليها (شكل 9). إذا أمكن ، يجب أن تكون الطاولة مغطاة بمشمع ، ويجب تغطية كل مكان عمل بصينية مجلفنة أو زجاج مرآة. مكان العمليجب أن تكون مجهزة بمجهر ، ورفوف لأنابيب الاختبار والبقع ، وحلقة بلاتينية وإبرة للمزارع ، وكوب مع جسر للتحضير ، وغسالة ، وساعة رملية ، وشرائح وأغطية ، وماصات ، ومجموعة من البقع ، وورق ترشيح ، موقد كحولي أو غازي ووعاء من محلول مطهر (ليسول ، حمض كاربوليك ، متسامي ، كلورامين أو ليسوفورم) ، حيث يتم غمس الشرائح والأغطية المستخدمة ، والماصات ، والقضبان الزجاجية ، وما إلى ذلك للتطهير. لا يمكن للأطباق التي تنمو فيها الميكروبات يتم تطهيرها بالمواد الكيميائية. آثار المطهرات على هذه الأطباق تجعلها غير مناسبة لنمو وتكاثر الكائنات الحية الدقيقة. بعد الاستخدام ، توضع الأطباق في خزانات معدنية أو دلاء بغطاء ، مختومة ومعقمة في الأوتوكلاف. توضع الأدوات الصغيرة (ملاقط ومشارط ومقص) بعد الاستخدام في معقم وتُغلى لمدة 30-60 دقيقة أو تُغمر في محلول صابون كربوني بنسبة 3-5٪ من الكلورامين لمدة 30-60 دقيقة.

أرز. 9. تقنية الفحص المجهري للأجسام البكتريولوجية.

يجب أن يبقى مكان العمل نظيفًا تمامًا. من غير المقبول أن تكون الطاولة ملوثة بالمواد المعدية التي تم فحصها (بول ، براز ، صديد ، إلخ). في الحالة الأخيرة ، يمكن للمواد المعدية من الجدول أن تصطدم بالأشياء الأخرى المحيطة ، ومن ثم تكون العدوى داخل المختبر ممكنة. بعد الانتهاء من العمل ، يجب على مساعد المختبر ترتيب مكان العمل ليكون مسؤولاً عنه ، ولغرض الوقاية ، يمسح الزجاج في مكان العمل بقطعة من الصوف القطني مبللة بمحلول 5٪ من حمض الكربوليك أو الكلورامين.

قواعد العمل والسلوك في المختبر

عند العمل مع المواد المعدية ، يجب أن يكون عمال المختبر على دراية بإمكانية الإصابة بالعدوى ونقل المرض المعدي إلى أسرة أو شقة أو ما إلى ذلك. لذلك ، يجب أن يكونوا يقظين وحذرين ومرتبين ومتحذقين في عملهم.
عند العمل في المختبرات يجب مراعاة القواعد التالية:

1. لكي تكون في المختبر ، وحتى أكثر من ذلك للعمل فيه ، من الضروري ارتداء عباءة ووشاح أو قبعة.
2. دون داع ، لا تنتقل من غرفة معمل إلى أخرى واستخدم مكان العمل والمعدات المخصصة فقط.
3. لا تأكل أو تدخن في المختبر.
4. عند العمل مع المواد المعدية والثقافات الحية ، استخدم الأدوات المناسبة: ملاقط ، خطافات ، ملاعق وعناصر أخرى معرضة للتدمير أو التحييد بعد استخدامها (الاحتراق على لهب الموقد ، الغليان ، إلخ). شفط المواد السائلة المعدية في الماصات ليس بالفم ، ولكن بمساعدة الأسطوانات ، والكمثرى ، صب السائل مع المواد المعدية من وعاء إلى آخر فقط على أي مستقبل (صينية ، حوض) يُسكب فيه سائل المطهر (محلول كربوليك) حمض ، ليسول). يجب إجراء التطعيمات والثقافات الفرعية عن طريق حرق أنابيب الاختبار ، والملاعق ، وحلقات البلاتين ، والماصات ، وما إلى ذلك على لهب الموقد.
5. إذا كانت الأطباق مكسورة أو إذا انسكبت السوائل التي تحتوي على مواد معدية أو انسكبت ثقافات حية ، فقم على الفور بتطهير مكان العمل الملوث واللباس واليدين بأكثر الطرق شمولاً. كل هذا يجب أن يتم في حضور أو تحت إشراف رئيس المختبر الذي يجب إبلاغه بالحادث على الفور.
6. يجب تدمير جميع العناصر والمواد المستخدمة وغير الضرورية إن أمكن (أفضل عن طريق الحرق أو التخلص بعناية في أجهزة التعقيم أو السوائل المطهرة).

اجمع كل العناصر المراد تطهيرها داخل المختبر في أجهزة استقبال خاصة ، وخزانات ، ودلاء ذات أغطية ، وما إلى ذلك ، وانقلها إلى الأوتوكلاف ، حيث يمكن تطهيرها في نفس اليوم. يجب مراقبة تسليم المواد المعدية إلى الأوتوكلاف وتعقيمها من قبل عمال المختبر المسؤولين المعينين بشكل خاص.

1. التزم بالنظافة الصارمة والدقة. تطهير وغسل اليدين قدر الإمكان خلال يوم العمل وبعد العمل.
2. يخضع عمال المختبر للتطعيم الإجباري ضد الأمراض المعدية الرئيسية (في المقام الأول ضد الأمراض المعوية).
3. يلزم إجراء محاسبة كمية يومية لجميع الثقافات الحية والحيوانات المصابة بإدخال في مجلات خاصة ودفاتر محاسبية.
4. بعد العمل ، يجب ترك جميع المواد والثقافات اللازمة لمزيد من العمل في ثلاجة أو آمنة ، ويجب ترتيب مكان العمل بالكامل.
5. يجب إجراء التنظيف الشامل اليومي للمختبر بطريقة رطبة باستخدام سائل مطهر.

يتم تنظيم ظروف العمل مع مسببات الأمراض المعدية وفقًا لدرجة خطر الكائنات الحية الدقيقة على الإنسان. على هذا الأساس ، تم تحديد أربع مجموعات من العوامل البيولوجية المسببة للأمراض (PBAs):

المجموعة الأولى: مسببات الأمراض ذات الخطورة بشكل خاص (الطاعون ، الجدري ، إلخ).

المجموعة الثانية: مسببات الأمراض شديدة العدوى البكتيرية والفطرية و العدوى الفيروسية(الجمرة الخبيثة والكوليرا وداء الكلب وما إلى ذلك)

المجموعة الثالثة: العوامل المسببة للعدوى البكتيرية والفطرية والفيروسية والأولية التي تم تحديدها على أنها أشكال تصنيفية مستقلة (السعال الديكي ، الكزاز ، السل ، إلخ)

المجموعة الرابعة: العوامل المسببة لتسمم الدم البكتيري والفطري والفيروسي والتهاب السحايا والالتهاب الرئوي والتهاب الأمعاء والالتهابات السامة والتسمم الحاد (العدوى الكاذبة ، إلخ).

تعمل معظم المختبرات الميكروبيولوجية مع مجموعات PBA الثالثة والرابعة ، وتشارك فقط المختبرات المتخصصة في دراسة مسببات الأمراض الخطيرة بشكل خاص (المجموعتان الأولى والثانية).

يجب أن تفي المختبرات الأساسية التي تعمل مع مجموعات PBA III و IV بعدد من المتطلبات (مبنى منفصل أو مدخل منفصل ، وتوافر أنظمة إمدادات المياه والكهرباء ، والتدفئة ، والتهوية ، وما إلى ذلك) وأن يكون لديها مجموعة المباني اللازمة وفقًا للقدرة الإنتاجية ومجموعة الدراسات التي أجريت. يجب أن يحتوي كل مختبر على منطقة "نظيفة" و "متسخة".

تشتمل المنطقة "القذرة" على غرف لاستلام وتسجيل المواد ، وصناديق وغرف لأبحاث الميكروبيولوجيا ، والترموستات ، والأوتوكلاف لتطهير المواد. يجب أن تكون النوافذ والأبواب في جميع الغرف مغلقة بإحكام. يجب أن تكون غرف العمل مع الكائنات الحية الدقيقة مجهزة بمصابيح مبيد للجراثيم أو بها خزانات أمان بيولوجية. يجب أن تكون تهوية الإمداد والعادم في المنطقة "القذرة" مزودة بمرشحات دقيقة لهواء العادم. وضع الملصقات الإلزامية على الطاولات والأوتوكلاف والحاويات التي تحتوي على محاليل مطهرة وأرفف للمواد النظيفة والملوثة. يجب أن يكون المختبر مجهزًا بأثاث خاص وأن يكون له أسطح أرضية وجدران ناعمة مقاومة للمنظفات والمطهرات.

تشمل المنطقة "النظيفة" أماكن للعمل التمهيدي (غرفة غسيل ، وغرفة تحضير ، وغرفة لتحضير وتعبئة وسائط المغذيات ، وما إلى ذلك) ، وغرفة للعمل مع الوثائق ، وغرفًا بها ثلاجات لتخزين وسائط المغذيات والمستحضرات التشخيصية ، وخزانة ملابس لملابس خارجية ، غرفة استراحة. في المنطقة "النظيفة" ، من الممكن العمل مع PBA غير الحية (دراسات مصلية ، وراثية جزيئية ، وكيمياء حيوية).

يشمل ضمان سلامة العمل مع الكائنات الحية الدقيقة المسببة للأمراض عاملين رئيسيين: تقني وبشري. العامل التقني هو توافر المناطق "النظيفة" و "المتسخة" ، والمعدات ، وأنظمة الحماية ، وما إلى ذلك اللازمة للعمل. العامل البشري هو صحة الإجراءات البشرية لضمان السلامة ، ومستوى الكفاءة في المعدات المهنية ، ومعرفة المصادر والآليات المحتملة للعدوى ، والتدريب المناسب والتدريب.

يرتبط العمل في مختبر بكتريولوجي تعليمي أيضًا بعاملين خطرين - الكائنات الحية الدقيقة التي تسبب الأمراض المعدية وفتح النار ، الأمر الذي يتطلب الامتثال لتدابير مكافحة الأوبئة والسلامة من الحرائق. يجب على الطلاب التعرف على قواعد السلامة والالتزام بها بصرامة:

ضروري:

العمل بالعباءات الطبية ذات الأكمام الطويلة والقبعات الطبية وأغطية الأحذية.

احتفظ بالممتلكات الشخصية في مكان مخصص لذلك ، اترك الملابس الخارجية في المرحاض ؛

يتم تنفيذ كل نوع من الأنشطة في منطقة معينة: العمل مع الكائنات الحية الدقيقة - على طاولة مختبر مجهزة خصيصًا ، وملء البروتوكولات - على سطح المكتب ؛

في حالة ملامسة مادة مصابة على الطاولة والأرض والأشياء الأخرى ، أبلغ المعلم على الفور وطهره ؛

· يجب وضع المواد المصابة في حاويات قوية مقاومة للماء أو حاويات بمحلول مطهر ، وتغلق قبل إخراجها من المختبر.

يجب أن تبقى أبواب المختبر مغلقة أثناء العمل.

في نهاية العمل ، اغسل يديك جيدًا ، وإذا لزم الأمر ، عالجها بمحلول مطهر.

تناول الطعام في المختبر

سحب السائل في ماصة عن طريق الفم

اضيءوا سراج روح من اخر

حمل مصباح كحول مشتعل

اترك المصباح الروحي مشتعلًا بعد انتهاء استخدامه المقصود

اترك المستحضرات غير المثبتة وأطباق بتري المزودة بالثقافات والأواني الأخرى التي تحتوي على مواد معدية في مكان العمل

لمس مادة الاختبار في أطباق بتري المصنفة بيديك

المختبر البكتيريولوجي مؤسسة علمية وعملية تقوم بإجراء الدراسات المناعية وغيرها من الدراسات الميكروبيولوجية. توجد مختبرات بكتريولوجية طبية وبيطرية وصناعية.

يتم تنظيم المعامل الطبية البكتريولوجية في المحطات الصحية والوبائية وغيرها لإجراء البحوث من أجل توضيح التشخيصات والمراقبة الصحية والوبائية. يوجد في المختبر البكتريولوجي: مصنع متوسط ​​الحجم ، حوض ، غرفة تحضير ، غرفة تعقيم ، إلخ. يجب تكييف جهاز ومعدات المختبرات البكتريولوجية لإجراء البحوث في ظل ظروف معقمة ، مما يضمن عدم إصابة الأفراد بالعدوى. يجب أن تكون غرفة المختبر البكتريولوجي مشرقة وواسعة. من الضروري استبعاد إمكانية المسودات. مكان خاص محجوز لمستحضرات التلوين.

المعدات الإلزامية في مكان عمل عالم البكتيريا عبارة عن موقد ، ووعاء به محلول من حمض الكربوليك للماصات المستخدمة ، ووعاء قابل للإغلاق ، وحوامل لأنابيب الاختبار وحلقة بكتيرية ، وأوعية مصقولة ، وملاقط ، ومقص ، ومشرط ، وشرائح وأغطية . يجب أن يحتوي المختبر البكتريولوجي على صواني معدنية لأطباق بتري أو دلاء مجلفنة أو خزانات لرمي الأطباق المستعملة. بالإضافة إلى الأواني الزجاجية المعتادة للمختبرات ، يتم تزويد المختبرات البكتريولوجية بأنواع خاصة من الأواني الزجاجية: للنمو على وسط كثيف ، ومراتب بكتيرية ، وما إلى ذلك. هناك حاجة أيضًا إلى المصابيح المطاطية لامتصاص المواد الخطرة بشكل خاص في الماصات. يجب غسل البكتريولوجيا وتعقيمها بالمعالجة الحرارية وإغلاقها بسدادات قطنية معقمة. لا تستخدم المواد الكيميائية على الأطباق ، حيث يمكن أن تؤثر كمياتها النزرة على تطور الميكروبات. أهمها بالنسبة للمختبر البكتيري هي أجهزة بذر الكائنات الحية الدقيقة (الحلقات البكتيرية ، ماصات باستير ، ملاعق زجاجية وبلاتينية). لإجراء المحاصيل في ظل ظروف معقمة ، تم تجهيز المختبرات البكتريولوجية بصناديق زجاجية خاصة مزودة بمصابيح فوق بنفسجية (انظر).

يحتاج المختبر البكتريولوجي إلى: ثلاجة لتخزين الأمصال والركائز البيولوجية الأخرى ؛ مجهر مع إضاءة. جهاز الطرد المركزي؛ أو غرفة ترموستاتية لنمو البكتيريا ؛ جهاز لهز المخاليط المختلفة. ، معقم الهواء الجاف (باستير فرن) للتعقيم ، والأطباق والمعقمات الكهربائية. يجب أن تكون غرف المرافق للعمل مع حيوانات المختبر ، وغسل الأطباق وتجفيفها ، وتوزيع وسائط المغذيات ، وما إلى ذلك ، مجهزة بشكل مناسب.

عند العمل في مختبر جرثومي ، خاصة مع الكائنات الدقيقة المسببة للأمراض ، يجب مراعاة القواعد التالية.
1. يجب على جميع الأشخاص في المختبر البكتريولوجي ارتداء ملابس العمل.

2. يمنع الأكل والتدخين في الغرفة.

3. يجب على كل موظف استخدام مكان عمله الخاص فقط.

4. يجب تنفيذ جميع العمليات وفقًا لقواعد العقم: تتم جميع المحاصيل بالقرب من لهب الموقد ، ويتم نقل السوائل المصابة على صينية بمحلول مطهر ، إلخ.

5. كل المخزون الذي كان على اتصال مع المواد المعدية عرضة للتعقيم أو التدمير.

6. يتم تسجيل وتسجيل جميع الثقافات وكذلك الحيوانات المصابة في مجلة باستخدام نموذج خاص.

المختبر البكتيريولوجي مؤسسة علمية وعملية تقوم بإجراء البحوث الميكروبيولوجية. المختبرات البكتريولوجية السريرية والتشخيصية في المستشفيات ، بناءً على ملف تعريف الأخير ، تجري الدراسات اللازمة لتحديد التشخيص أو توضيحه. تجري المعامل البكتريولوجية في المحطات الصحية والوبائية الفحص الوقائي للسكان والفحص الصحي والبكتريولوجي منتجات الطعام. تعتبر المختبرات البكتريولوجية التي تؤدي وظائف التحكم عالية التخصص ، على سبيل المثال ، في الشركات المنتجة للمستحضرات البكتيرية. بالإضافة إلى المختبرات الطبية ، هناك شبكة من المعامل البكتريولوجية البيطرية التي تجري دراسات تشخيصية ووقائية للحيوانات ، ومختبرات بكتريولوجية متخصصة تخدم احتياجات صناعة الأغذية والزراعة ، إلخ. مهام البحث.

يشمل هيكل المختبر الجرثومي الكبير: المختبر نفسه ، ووحدة الوسائط ، والغسيل ، والتحضير ، والتعقيم ، والحوض. يجب أن تكون غرفة المختبر البكتريولوجي مشرقة وواسعة. زجاجة بمحلول تطهير اليد مثبتة فوق حوض الغسيل. طاولات العمل مغطاة بمشمع أو زجاج. موقد غاز أو كحول ، جرة للماصات المستخدمة بمحلول 3٪ من حمض الكربوليك ، وعاء للصوف القطني ، حلقة بكتيرية ، مجموعة من المعايير البكتيرية ، رفوف أنابيب الاختبار ، الأكواخ ، ملاقط ، مقص ، مشرط ، شرائح وتوضع الأغطية على الطاولة. يجب أن يكون المختبر البكتريولوجي مجهزًا بخزانات لرمي الأطباق المصابة. عادة ، في المختبر البكتريولوجي ، تم تجهيز جدول خاص لمستحضرات التلوين.

أرز. 1. أطباق بتري.

أرز. 2. فراش لنمو البكتيريا.

أرز. 3. ماصات باستير.

في المختبر البكتريولوجي ، بالإضافة إلى الأواني الزجاجية الكيميائية العادية ، هناك حاجة إلى أواني زجاجية خاصة: أطباق بتري زجاجية (الشكل 1) لنمو البكتيريا على وسط صلب ؛ المراتب البكتيرية (الشكل 2) للحصول على كميات كبيرة من الكتلة الميكروبية ؛ أنابيب رو مع انقباض لنمو البكتيريا على مياه ضحلة البطاطا ؛ أنابيب اختبار واسرمان بطول 90 مم وقطر داخلي. 9-10 مم لضبط RSK وتفاعل التراص ؛ أنابيب ترسيب بطول 90 مم وقطر. 3-5 مم ؛ أنابيب اختبار بكتيرية لتنمية البكتيريا على وسائط المغذيات السائلة والصلبة ؛ ماصات باستير (الشكل 3) ؛ ماصات Mohr لبذر المواد السائلة المصابة ؛ الماصات أو الماصات الأوتوماتيكية مع الكمثرى ، باستثناء شفط المادة عن طريق الفم. يجب ترشيح الأواني الزجاجية المستخدمة في المختبر البكتيري في محلول حمض الهيدروكلوريك بنسبة 1-2٪ وتعقيمها درجة حرارة عالية. يتم التلقيح على وسط المغذيات الصلبة باستخدام ملاعق زجاجية (الشكل 4) وحلقة بكتيرية (الشكل 5). تنمو البكتيريا في منظمات الحرارة أو الغرف الثرموستاتية.

أرز. 4. ملاعق زجاجية.

أرز. 5. الحلقة البكتيرية.

يجب أن يكون المختبر البكتيريولوجي المعني بدراسة البكتيريا اللاهوائية مزودًا بمضخات متناهية الصغر ومضخات تفريغ والتي تستخدم أيضًا للترشيح والترشيح الفائق. للحفاظ على العقم عند العمل بالمزارع البكتيرية ، تم تجهيز المختبرات البكتريولوجية بصناديق زجاجية خاصة. يتم تخزين جميع المواد الغذائية والثقافات البكتيرية والأمصال في الثلاجة.

يجب أن يحتوي كل مختبر جرثومي على جهاز طرد مركزي وشاكر (الشكل 6) ومجهر. بالنسبة لمعظم الدراسات ، يتم استخدام مجهر MBI-1 مع إضاءة OI-7 وجهاز تباين الطور.

أرز. 6. جهاز للاهتزاز (مكوك - جهاز).

يجب أن يكون المختبر البكتريولوجي مجهزًا بمعدات التعقيم: جهاز التعقيم ، جهاز Koch ، فرن باستير ، جهاز تخثر الدم. لتعقيم الركائز السائلة ، استخدم المرشحات البكتيرية (انظر). يجب أن تحتوي المختبرات البكتريولوجية على أجهزة لصب الوسائط (الشكل 7) ، ومجموعات الكواشف لإجراء بعض التحليلات الكيميائية ، بالإضافة إلى مقارنة ميكايليس أو مقياس الجهد لتحديد درجة الحموضة في الوسط.

أرز. 7. جهاز لصب الوسائط.

يتم العمل مع الحيوانات في المختبر البكتيري فقط في الحوض (انظر).

أثناء العمل في المختبر البكتيريولوجي ، يجب مراعاة القواعد التالية: 1) يجب أن يرتدي كل شخص في المختبر ملابس خاصة ؛ 2) يجب أن يكون لكل موظف مكان عمل ؛ 3) يمنع الأكل والتدخين في المختبر البكتيري. 4) عند العمل مع المواد المعدية ، يجب استخدام الأدوات ؛ يجب تعقيم الأدوات التي لامست المواد المعدية ؛ 5) عند شفط المواد السائلة ، يوصى باستخدام الكمثرى ؛ يجب توصيل جميع الماصات بالقطن ؛ 6) يتم إجراء نقل السوائل المصابة فوق وعاء بمحلول مطهر ؛ 7) يتم تنفيذ العمل مع المواد المصابة عند الموقد ، وحرق حواف أنبوب الاختبار ، والحلقات ، والملاعق ، وما إلى ذلك ؛ 8) يجب كتابة اسم الثقافة والرقم والتاريخ على الأطباق المصابة ؛ 9) في حالة وصول المواد المعدية إلى الأشياء المحيطة ، يتم التطهير - يتم سكب هذا المكان بمحلول مطهر وحرقه بمسحة بالكحول المحترق ؛ 10) تسجيل المواد المصابة بالأطباق ووضعها في الخزانات وتعقيمها في نفس اليوم. 11) يتم تخزين الثقافات في أعمدة أجار في أنابيب مختومة مع ملصقات ؛ 12) يتم تسجيل جميع الثقافات ، وكذلك الحيوانات المصابة ، في مجلة في شكل خاص.

المختبر البكتريولوجي- مؤسسة علمية وعملية تقوم بالدراسات البكتريولوجية والمناعية وغيرها من الدراسات الميكروبيولوجية. وفقا لتمايز علم الأحياء الدقيقة بشكل عام وعلم الجراثيم كأحد فروعها ، توجد مختبرات جرثومية بمهام ووظائف متنوعة. تقوم المختبرات البكتريولوجية السريرية والتشخيصية في المستشفيات بإجراء البحوث اللازمة لتحديد أو توضيح تشخيص مرض معد ، والتحكم في فعالية العلاج.

يتم تحديد تخصص المختبرات البكتريولوجية في المستشفيات من خلال ملف المستشفى (الأمراض المعدية الحادة ، الأمراض المعدية للأطفال ، الأمراض التناسلية ، السل ، إلخ). المختبرات البكتريولوجية في المحطات الصحية والوبائية ، مثل المختبرات السريرية ، تعمل في أعمال التشخيص ، وتخدم المستشفيات التي ليس لديها مختبرات خاصة بها ، وإجراء الفحوصات الوقائية للسكان والفحص الصحي والبكتريولوجي للغذاء والماء.

بالإضافة إلى المختبرات الطبية ، هناك شبكة واسعة من المختبرات البكتريولوجية البيطرية التي تجري دراسات تشخيصية ووقائية للأمراض المعدية في الحيوانات (انظر المختبر البيطري). المختبرات البكتريولوجية عالية التخصص التي تؤدي وظائف التحكم ، مثل المختبرات البكتريولوجية في محطات المياه ، ومختبرات التحكم في الشركات المنتجة للقاحات والأمصال والمستحضرات البكتيرية الأخرى. يتم تنظيم المختبرات البكتريولوجية الخاصة في مرافق التطهير. مهمتهم هي مراقبة الجودة البكتريولوجية للتطهير. جنبا إلى جنب مع المختبرات البكتريولوجية للملف الطبي والبيطري ، هناك مختبرات بكتريولوجية متخصصة تخدم احتياجات صناعة الأغذية (مصانع النبيذ ، والمخابز ، ومصانع الجعة وغيرها من المشاريع) ، والزراعة ، وما إلى ذلك على عكس المختبرات البكتريولوجية المذكورة أعلاه ، والتي تحل المشاكل العملية ، في هيكل معاهد البحث المقابلة ، توفر المعاهد مختبرات بكتريولوجية من مختلف الملامح ، مصممة لحل مشاكل البحث المختلفة. يمكن أن تكون المختبرات البكتريولوجية ثابتة ومتحركة. تُستخدم الأخيرة للصيانة الصحية ومكافحة الأوبئة للوحدات العسكرية ، وكذلك في الظروف الميدانية الميدانية (انظر المختبر ، في الظروف الميدانية العسكرية). بالإضافة إلى القوات المتنقلة ، تمتلك القوات أيضًا مختبرات ثابتة. تحدد خصائص البحث الذي يتم إجراؤه في المختبرات البكتريولوجية هيكل المختبرات وطريقة العمل فيها.

المطلب الرئيسي للمختبرات البكتريولوجية والناشئة عن تفاصيل عملها هو تهيئة الظروف التي تضمن أداء البحث في أكثر الظروف تعقيدًا وتضمن للعاملين وغيرهم من العدوى المحتملة. يشمل هيكل المختبر البكتريولوجي: المختبر نفسه وعدد من الأقسام الفرعية الإضافية إليه. علاجهم: sredovovarnya والغسيل والتحضير والتعقيم و vivarium (انظر). هذه التقسيمات ، كوحدات هيكلية مستقلة ، هي جزء من المختبرات البكتريولوجية الكبيرة. في المختبرات البكتريولوجية الصغيرة لا توجد أحواض حيوانية وغرفة تحضيرية خاصة ، ويمكن دمج غرف الوسط وغرف التعقيم في غرفة واحدة.

الجهاز والمعدات

أرز. 5. ملاعق زجاجية. الشكل 6. ملعقة مصنوعة من سلك بلاتينيوم.

يجب أن تكون مباني المختبرات البكتريولوجية مشرقة وواسعة بدرجة كافية. يجب طلاء الجدران بطلاء زيتي وعدم وجود تشققات في الأرضية. يجب أن تكون نوافذ المختبر موجهة نحو الشمال أو الشمال الغربي. عند توجيه النوافذ إلى الجنوب ، يتم تعليق النوافذ بستائر بيضاء. يجب أن يحتوي المختبر البكتريولوجي على حوض غسيل أو حوض غسيل ، توضع فوقه زجاجة بها محلول لتطهير الأيدي على الرف. يتم وضع سطح مكتب عالم البكتيريا ، إن أمكن ، على مسافة 1 متر من النافذة ومغطى بمشمع أو زجاج. يتم وضع موقد غاز على الطاولة (في حالة عدم وجود موقد غاز ، موقد كحول). معدات مكان العمل الإلزامية عبارة عن مرطبان ماصة به محلول مطهر (محلول حمض الكربوليك بنسبة 3٪) ، وعاء خزفي أو زجاجي قابل للإغلاق للصوف القطني ، حامل حلقة بكتيرية ، مجموعة من المعايير البكتيرية ، رفوف أنابيب الاختبار ، أوعية مطلية بالمينا ، ملاقط ، مقص ومشرط ، وشرائح زجاجية نظيفة مع وبدون ثقوب ، وكذلك أغطية. عادةً ما يتم استخدام شرائح بحجم 26 × 76 مم وسمك 1 - 1.2 مم ، أغطية من 18 × 18 أو 20 × 20 مم. يجب أن يكون المختبر البكتريولوجي مجهزًا بصواني معدنية لحمل أطباق بتري أو دلاء مجلفنة أو خزانات لإغراق الأواني أو المعدات المصابة. يتم تخزين المجاهر في علبة أو تحت غطاء زجاجي. يجب ألا يكون سطح المكتب مليئًا بالعناصر غير الضرورية. عادة في المختبر البكتريولوجي ، تم تجهيز طاولة صغيرة إضافية لتلوين المستحضرات الثابتة. توضع على مثل هذا الجدول: مجموعة من الأصباغ والمواد الكاشفة الضرورية في كتلة مع ماصات وعلب مطاطية (الشكل 1) ، كفيت أو بلورة مصقول مع حامل للاستعدادات أو ملاقط سلكية أو ملاقط كورنيت (الشكل 2) شرائح التثبيت ، أوراق من ورق الترشيح لإزالة السائل من المستحضرات المغسولة ، غسالة (الشكل 3) أو قنينة ماء. تم تجهيز المختبر البكتريولوجي بمجموعة متنوعة من الأواني اللازمة للبحث. بالإضافة إلى الأواني الزجاجية الكيميائية المعتادة (أسطوانات ، قوارير ، أكواب ، ماصات حجمية ، إلخ) ، هناك حاجة إلى واحدة خاصة مصممة للبكتريولوجيا و الاختبارات المناعيةالأواني: 1) أطباق بتري زجاجية تستخدم لنمو البكتيريا على وسط كثيف والحصول على مستعمرات بكتيرية معزولة ؛ 2) الحصير البكتيري (الشكل 4) - الزجاجات المسطحة (22 × 17 × 5 سم) التي تستخدم في إنماء عدد كبير من البكتيريا ؛ 3) أنابيب رو مع انقباض لنمو البكتيريا على المياه الضحلة للبطاطا ؛ 4) أنابيب اختبار واسرمان بطول 90 مم وقطرها الداخلي 9-10 مم لإعداد تفاعل التثبيت التكميلي وتفاعل التراص ؛ 5) أنابيب الترسيب بطول 90 مم وقطرها 3-5 مم لإعداد تفاعل الترسيب ؛ 6) أنابيب الاختبار البكتيرية المستخدمة في زراعة البكتيريا على وسائط المغذيات الصلبة والسائلة ؛ 7) ماصات Pasteur المستخدمة لتلقيح المواد السائلة ، وتخفيف السوائل بطريقة التنقيط ، ووضع الأصباغ ، وما إلى ذلك ؛ 8) ماصات أو ماصات Mohr ذات التمدد الكروي في الجزء الأوسط لتلقيح المواد السائلة المصابة ، وكذلك الماصات أو الماصات الأوتوماتيكية بالكمثرى المطاطية ، باستثناء شفط المادة عن طريق الفم. لزراعة الثقافات في وسائط المغذيات السائلة ، وتخزين وتعبئة وسائط المغذيات ، والكواشف ، وما إلى ذلك ، يتم استخدام الأواني الزجاجية المعتادة في المختبرات. يجب أن يتم ترشيح الأواني الزجاجية المستخدمة في المختبر البكتيري مبدئيًا ، حيث يتم غليها عادةً في محلول حمض الهيدروكلوريك بنسبة 1-2٪. يجب أن يتم تطهير الأطباق البكتريولوجية التي تزرع فيها الميكروبات فقط بمساعدة درجة حرارة عالية دون استخدام أي مطهرات ، لأن وجود هذا الأخير ، حتى في شكل آثار ، يمكن أن يعيق نمو الميكروبات بشكل أكبر. يتم تلقيح الكائنات الحية الدقيقة في المختبر البكتيري باستخدام حلقات جرثومية أو ملاعق زجاجية أو بلاتينية (الشكل 5 و 6). تتم زراعة البكتيريا في ترموستات الهواء (انظر) ، وفي المختبرات البكتريولوجية الكبيرة - في غرف ثرموستاتية خاصة.

إذا كنت بحاجة إلى تحكم دقيق في درجة الحرارة وزراعة البكتيريا على المدى القصير نسبيًا أو عند إعداد تفاعلات مناعية ، فمن الملائم استخدام ترموستات فائقة الدقة في الماء. يجب أن يكون كل مختبر جرثومي حيث يدرسون اللاهوائية مزودًا ببالون لاهوائي (انظر) ومجففات ومضخات تفريغ لإزالة الهواء. هذا الأخير يستخدم أيضًا في التصفية. لتحقيق أفضل الظروف المعقمة اللازمة للبذر أو العزلة أو الثقافة الفرعية للمزارع ، تم تجهيز المعامل البكتريولوجية بصناديق زجاجية خاصة مع صناديق مسبقة. يحتوي الصندوق على موقد غاز ، ووعاء به محلول مطهر ، ومصباح للأشعة فوق البنفسجية مبيد للجراثيم ، إن أمكن. في حالة عدم وجود صندوق ثابت ، عند القيام ببعض الأعمال التي تتطلب درجة عالية من التعقيم ، يمكنك استخدام صندوق سطح المكتب المحمول (انظر المربعات ، الميكروبيولوجية).

أرز. 7. عداد مستعمرات آلي مع جهاز تحكم تلفزيوني: 1 - طبق بتري مع مستعمرات نامية. 2 - لوحة النتائج الإلكترونية بأرقام تشير إلى عدد المستعمرات في طبق بتري ؛ 3 - شاشة تليفزيونية لمشاهدة صورة مكبرة للمستعمرات المزروعة في طبق بتري.

يتم تخزين الثقافات البكتيرية ، والأمصال العلاجية والتشخيصية ، والعاقمات وغيرها من الركائز البيولوجية (الأمصال ، ومحاليل الببتون ، وما إلى ذلك) في الثلاجة. من المفترض أن يتم تخزين المزارع البكتيرية في أنابيب اختبار مختومة أو أمبولات ، والتي يجب أن تحتوي المختبرات البكتيرية على موقد لحام أو موقد لحام عادي. الملحق الإجباري لأي مختبر جرثومي هو المجهر (انظر). بالنسبة لمعظم الدراسات ، يتم استخدام مجهر وإضاءة MBI-3. كما تم تجهيز المعامل البكتريولوجية البحثية بمجاهر تباين الطور ، ومضيئة ، وإلكترونية. لتحديد عدد مستعمرات البكتيريا المزروعة في أطباق بتري ، يتم استخدام عدادات من أنظمة مختلفة. أحد هذه العدادات هو عداد آلي بجهاز مسح وجهاز تحكم في التلفزيون يمكنه العد حتى 500 كوب في الساعة (الشكل 7). من العناصر المهمة في معدات المختبرات البكتريولوجية أجهزة الاهتزاز المستخدمة في الحالات التي يكون فيها من الضروري ضمان خلط ورج المادة لفترة معينة (إزالة رجفان الدم ، وتجانس المادة ، وما إلى ذلك). لترسيب الجزيئات الكثيفة (الخلايا الميكروبية ، وخلايا الأقمشة ، وتعليق المادة المدروسة) الموجودة في أجهزة الطرد المركزي ذات الاستخدام السائل (انظر). بالنسبة لمعظم الدراسات ، يتم استخدام أجهزة الطرد المركزي في الغالب ، بالتناوب بسرعة 3000-3500 دورة في الدقيقة. في حالة عدم وجود أجهزة طرد مركزي كهربائية ، يتم استخدام أجهزة الطرد المركزي اليدوية.

يعتمد نشاط المختبرات البكتريولوجية إلى حد كبير على الامتثال للمتطلبات الأساسية - العمل في ظل ظروف معقمة بأشياء معقمة (الأدوات ، وسائط المغذيات ، الأطباق). لذلك في معدات المعامل البكتريولوجية ، تأخذ معدات التعقيم مكانًا مهمًا (انظر). يحتوي كل مختبر جرثومي على جهاز تعقيم (انظر) ، وجهاز كوخ ، وفرن باستور (انظر فرن باستير) ، وجهاز لتخثر مصل اللبن. للتعقيم بالغليان ، يتم استخدام المعقمات التقليدية (انظر) ، ويتم تسخينها من شبكة كهربائية أو بوسائل أخرى.

لتعقيم الركائز السائلة المتغيرة بتأثير درجة الحرارة ، استخدم المرشحات البكتيرية (انظر). تجفيف الأشياء المبللة (الأطباق ، الأدوات) بعد التعقيم بالبخار أو بالضغط يتم في خزانات التجفيف (انظر). تشتمل معدات المعامل البكتريولوجية اللازمة لتحضير وسائط المغذيات الأكثر استخدامًا ، بالإضافة إلى المعدات المحددة ، على أجهزة لصب الوسائط ، ومجموعات من الكواشف والأواني لإجراء بعض التحليلات الكيميائية (تحديد النيتروجين الأميني ، التربتوفان ، الكلوريدات ، إلخ) ، وكذلك أدوات وكواشف لتحديد الرقم الهيدروجيني للوسط ؛ مؤشر عالمي ومؤشرات ومقارن ميكايليس أو مقياس جهد.

يتم العمل مع الحيوانات في المختبرات البكتريولوجية في غرفة خاصة - الحوض. لا يسمح بإجراء التجارب على الحيوانات في المعامل البكتريولوجية الفعلية. للقيام بالعمل الأساسي مع الحيوانات (أخذ الدم ، ووضع العينات البيولوجية ، والتفاعلات التشخيصية ، وما إلى ذلك) ، يجب أن يكون لديك: موازين لوزن الفئران والخنازير والأرانب ، وآلات أو أجهزة لتثبيتها (الشكل 8) ، ومجموعة من محاقن ، أرقام لوصف الحيوانات (أو الأصباغ) ، مزيلات الشعر.

تحدد خصوصية العمل البكتريولوجي المتطلبات العالية بشكل خاص لنظافة مباني المختبرات البكتريولوجية. أهمية خاصة هي نقاء الهواء ، وعدم وجود الغبار فيه. من الأفضل تنظيف مباني المعامل البكتريولوجية في نهاية يوم العمل أو قبل ساعات قليلة من بدء العمل ، حيث أن الغبار المتصاعد في الهواء أثناء التنظيف يزيد من محتوى الميكروبات فيه ويجعل من الصعب تعقيم العمل . يُنصح بعد تنظيف المباني قبل العمل بتعريضها للإشعاع بمصابيح uvio المبيدة للجراثيم لمدة 0.5-1 ساعة. من أجل منع العدوى داخل المختبر وإمكانية انتشار العدوى عند العمل في المختبرات البكتريولوجية ، يجب مراعاة القواعد الأساسية التالية: 1) يجب على جميع الأشخاص في المختبر ارتداء العباءات ؛ 2) لا يسمح بالحديث والمشي المفرط ؛ 3) يجب على كل موظف استخدام مكان العمل المخصص له فقط ؛ 4) الأكل والتدخين ممنوعان في المختبر البكتريولوجي. 5) عند العمل مع المواد المعدية ، من الضروري استخدام الأدوات (ملاقط ، إبر ، خطافات) ولا تلمسها بأي حال من الأحوال ؛ كل المخزون الذي كان على اتصال مع المواد المعدية عرضة للتعقيم أو التدمير ؛ 6) عند شفط المواد السائلة ، يوصى باستخدام المصابيح المطاطية ؛ يجب إغلاق الماصات بسدادات قطنية ؛ 7) يتم نقل السوائل المصابة من وعاء إلى وعاء على صينية أو بلورة مملوءة بسائل مطهر ؛ 8) يتم تنفيذ جميع الأعمال المتعلقة بالبذر ، وإعادة البذر ، وعزل الثقافات ، وإعداد المستحضرات من المواد المصابة عند الموقد ، أثناء حرق حواف أنابيب الاختبار ، والحلقات ، والملاعق ، وما إلى ذلك ؛ 9) أنابيب الاختبار والقوارير والقوارير وما إلى ذلك ، حيث يتم وضع المادة المصابة في عملية العمل ، يتم تمييزها على الفور بطبيعة المادة واسم ورقم الثقافة والتاريخ ؛ 10) إذا كانت المادة المعدية قد اصطدمت بالأشياء المحيطة ، فمن الضروري إجراء تطهير شامل على الفور: صب هذا المكان بمحلول مطهر ، ثم ، إن أمكن ، احرقه بمسحة بالكحول المحترق ؛ 11) تسجيل الأشياء والمواد المصابة أثناء العمل ، وجمعها في خزانات أو دلاء ، وإغلاقها وإغلاقها وتعقيمها في نفس اليوم ؛ 12) يتم تخزين المزارع ، إذا لزم الأمر ، في أعمدة أجار تحت الزيت في أنابيب مختومة مع ملصقات ؛ 13) يتم تسجيل وحساب جميع الثقافات ، وكذلك الحيوانات المصابة أثناء العمل ، في مجلة في شكل خاص.

يتم إجراء جميع الدراسات الميكروبيولوجية والبيوكيميائية والبيولوجية الجزيئية للكائنات الدقيقة في مختبرات خاصة ، يعتمد هيكلها ومعداتها على كائنات الدراسة (البكتيريا والفيروسات والفطريات والأوليات) ، وكذلك على توجهها المستهدف (البحث العلمي ، تشخيص الأمراض). يتم إجراء دراسة الاستجابة المناعية والتشخيص المصلي لأمراض الإنسان والحيوان في المختبرات المناعية والمصلية (مصل الدم - مصل الدم).

تعد المختبرات البكتريولوجية والفيروسية والفطرية والمصلية (المناعية) جزءًا من المحطات الصحية والوبائية (SES) ومراكز التشخيص والمستشفيات الكبيرة. تقوم مختبرات SES بإجراء التحليلات البكتريولوجية والفيروسية والمصلية للمواد التي تم الحصول عليها من المرضى والأشخاص المخالطين لهم ، وفحص ناقلات البكتيريا وإجراء الدراسات الصحية والميكروبيولوجية للمياه والهواء والتربة والغذاء ، إلخ.

في علم البكتيريا و المعامل المصليةتجري المستشفيات ومراكز التشخيص أبحاثًا لتشخيص الأمراض المعوية والقيحية والجهاز التنفسي والأمراض المعدية الأخرى ، وممارسة السيطرة الميكروبيولوجية على التعقيم والتطهير.

يتم تشخيص العدوى الخطيرة بشكل خاص (الطاعون ، التولاريميا ، الجمرة الخبيثة ، إلخ) في مختبرات النظام الخاصة ، والتي يتم تنظيمها وتشغيلها بشكل صارم.

تقوم المعامل الفيروسية بتشخيص الأمراض التي تسببها الفيروسات (الأنفلونزا ، التهاب الكبد ، شلل الأطفال ، إلخ) وبعض أنواع البكتيريا - الكلاميديا(ornithosis ، إلخ) و ريكتسيا(التيفوس ، حمى كيو ، إلخ). عند تنظيم المختبرات الفيروسية وتجهيزها ، فإنها تأخذ في الاعتبار خصوصيات العمل مع الفيروسات ، ومزارع الخلايا وأجنة الدجاج ، والتي تتطلب أدق عقم.

تقوم مختبرات علم الفطريات بتشخيص الأمراض التي تسببها الفطريات المسببة للأمراض والعوامل المسببة لداء الفطريات.

تقع المختبرات عادةً في عدة غرف ، يتم تحديد المنطقة وفقًا لنطاق العمل والغرض.

يحتوي كل مختبر على:

أ) صناديق للعمل مع مجموعات فردية من مسببات الأمراض ؛

ب) مباني البحث المصلي.

ج) غرف غسيل وتعقيم الصحون والطبخ
وسائط المغذيات لينيا

د) حوض مع صناديق لحيوانات التجارب الصحية
نيويورك

ه) التسجيل لاستلام واصدار الاختبارات.

إلى جانب هذه الغرف ، تحتوي المختبرات الفيروسية على صناديق للمعالجة الخاصة لمواد الاختبار والعمل مع مزارع الخلايا.

معدات المعامل الميكروبيولوجية

تم تجهيز المختبرات بعدد من الأدوات والأجهزة الإلزامية.

1. أدوات الفحص المجهري: مجهر غمر بيولوجي مع أجهزة إضافية (جهاز إضاءة ، جهاز تباين الطور ، مكثف مجال مظلم ، إلخ) ، مجهر مضيء.

2. ترموستات وثلاجات.

3. أجهزة لتحضير وسائط المغذيات ، المحاليل ، إلخ: أجهزة الحصول على الماء المقطر (المقطر) ، الموازين الفنية والتحليلية ، أجهزة قياس الأس الهيدروجيني ، معدات الترشيح ، الحمامات المائية ، أجهزة الطرد المركزي.

4. مجموعة من الأدوات للتلاعب بالميكروبات: الحلقات البكتريولوجية ، والملاعق ، والإبر ، والملاقط ، إلخ.

5. آنية زجاجية للمختبر: أنابيب اختبار ، قوارير ، أطباق بتري ، مراتب ، قوارير ، أمبولات ، باستير ، ماصات متدرجة ، إلخ ، جهاز لصنع أنابيب الشاش القطني.

تحتوي مجمعات التشخيص الكبيرة على أجهزة تحليل آلية ونظام محوسب لتقييم المعلومات الواردة.

يوجد بالمختبر مكان لتلوين المستحضرات المجهرية ، حيث توجد محاليل صبغات خاصة ، كحول ، أحماض ، ورق ترشيح ، إلخ. كل مكان عمل مجهز بموقد غاز أو مصباح روح ووعاء بمحلول مطهر. للعمل اليومي ، يجب أن يتوفر في المختبر وسائط المغذيات اللازمة ، والكواشف الكيميائية ، والمستحضرات التشخيصية وغيرها من المواد.

المختبرات الكبيرة لهاغرف ترموستاتية للزراعة الجماعية للكائنات الحية الدقيقة ، وتحديد التفاعلات المصلية. للزراعة وتخزين الثقافات وتعقيم الأواني الزجاجية للمختبر وأغراض أخرى ، يتم استخدام المعدات التالية.

1. منظم الحراره.جهاز يتم فيه الحفاظ على درجة حرارة ثابتة. درجة الحرارة المثلى لتكاثر معظم الكائنات الحية الدقيقة المسببة للأمراض هي 37 درجة مئوية. الترموستات هي الهواء والماء.

2. ميكروانيروستات.جهاز لتنمية الكائنات الحية الدقيقة في ظل الظروف اللاهوائية.

3. C0 2 - حاضنة.جهاز لخلق درجة حرارة وجو ثابتين لتكوين غاز معين. مصمم لزراعة الكائنات الحية الدقيقة التي تتطلب تكوين الغاز في الغلاف الجوي.

4. ثلاجات.تستخدم في المختبرات الميكروبيولوجية لتخزين مزارع الكائنات الحية الدقيقة والوسائط الغذائية والدم واللقاحات والأمصال والمستحضرات الأخرى النشطة بيولوجيًا عند درجة حرارة حوالي 4 درجات مئوية. لتخزين الأدوية في درجات حرارة أقل من 0 درجة مئوية ، يتم استخدام ثلاجات منخفضة الحرارة ، حيث يتم الحفاظ على درجة الحرارة عند -20 درجة مئوية أو -75 درجة مئوية.

5. أجهزة الطرد المركزي.يتم استخدامه لترسيب الكائنات الحية الدقيقة وخلايا الدم الحمراء والخلايا الأخرى ، لفصل السوائل غير المتجانسة (المستحلبات ، المعلقات). في المختبرات ، يتم استخدام أجهزة طرد مركزي ذات أوضاع تشغيل مختلفة.

6. خزانة تجفيف وتعقيم(فرن باستير). مصمم للتعقيم بالهواء الجاف للأواني الزجاجية للمختبرات وغيرها من المواد المقاومة للحرارة.

7. معقم بخاري (أوتوكلاف).مصمم للتعقيم بالبخار شديد السخونة (تحت الضغط). تستخدم الأوتوكلاف في المختبرات الميكروبيولوجية نماذج مختلفة(رأسي ، أفقي ، ثابت ، محمول).

المختبرات البكتيرية والفيروسية والفطرية والمناعة ومعداتها. جهاز ميكروسكوب حديث. طرق المجهر. طرق دراسة مورفولوجيا الكائنات الدقيقة

برنامج

1. قواعد عمل وتنظيم المعامل الميكروبيولوجية (البكتريولوجية ، الفيروسية ، الفطرية).

2. الأدوات والمعدات الأساسية للمختبر الميكروبيولوجي.

3. المجاهر والمعدات الدقيقة. قواعد العمل بمجهر الغمر (الأهداف).

توضيح

1. ترتيب وتطبيق الأدوات والمعدات الرئيسية المستخدمة في المعامل الميكروبيولوجية: الثرموستات ، وأجهزة الطرد المركزي ، والأوتوكلاف ، وخزانة التجفيف ، والأدوات والأواني.

2. جهاز مجهر بيولوجي. طرق مختلفة من الفحص المجهري: المجال المظلم ، تباين الطور ، الإنارة ، الإلكترون.

3. محضرات الميكروبات (الخميرة والبكتيريا) بطرق الفحص المجهري المختلفة.

الاحالة للطلاب

1. مجهريا ورسم تخطيطي لمستحضرات تشبه الخميرة من الجنس الكانديداباستخدام أنواع مختلفة من الفحص المجهري.

القواعد الارشادية

قواعد العمل في المعامل الميكروبيولوجية.

العمل في معمل ميكروبيولوجي مؤسسة طبيةأجريت مع مسببات الأمراض المعدية - الكائنات الحية الدقيقة المسببة للأمراض.

لذلك ، من أجل الحماية من العدوى ، يجب على الموظفين التقيد الصارم باللوائح الداخلية:

1. يجب على جميع العاملين العمل بالعباءات الطبية والقبعات والأحذية القابلة للنزع. يمنع منعا باتا الدخول إلى المختبر بدون رداء الحمام. في الحالات الضرورية ، يرتدي العمال قناع الشاش على وجوههم. يتم تنظيم العمل مع الميكروبات الخطرة بشكل خاص من خلال تعليمات خاصة ويتم تنفيذه في مختبرات آمنة.

2. يحظر التدخين وتناول الطعام في المختبر.

3. يجب الحفاظ على مكان العمل بترتيب مثالي. يجب تخزين المتعلقات الشخصية للموظفين في مكان مخصص لذلك.

4. في حالة التلامس العرضي مع مادة مصابة على منضدة وأرضية وأسطح أخرى ، يجب معالجة هذا المكان بعناية بمحلول مطهر.

5. يجب أن يتم تخزين ومراقبة المزارع الميكروبية وتدميرها وفقًا لتعليمات خاصة. يتم تسجيل ثقافات الميكروبات المسببة للأمراض في مجلة خاصة.

6. في نهاية العمل ، يجب غسل اليدين جيدًا ومعالجتها ، إذا لزم الأمر ، بمحلول مطهر.

المجاهر وطرق الفحص المجهري

أرز. 1.1 المجاهر.

أ - نظرة عامة على مجهر بيولام ؛ ب - مجهر MBR-1: 1 - قاعدة مجهر ؛ 2 - جدول الموضوع ؛ 3 - مسامير لتحريك طاولة الكائن ؛ 4 - محطات ضغط الدواء ؛ 5 - مكثف 6 - قوس المكثف. 7 - برغي لتقوية المكثف في الغلاف ؛ 8 - مقبض لتحريك المكثف ؛ 9 - مقبض غشاء قزحية المكثف ؛ 10 - مرآة 11 - حامل الأنبوب ؛ 12 - مقبض برغي قياس الماكرو ؛ 13 - مقبض المسمار الميكرومتري ؛ 14 - مسدس الأهداف. 15 - العدسات 16 - أنبوب مائل ؛ 17 - برغي لتثبيت الأنبوب ؛ 18 - عينية.

بالنسبة للدراسات الميكروبيولوجية ، يتم استخدام عدة أنواع من المجاهر (البيولوجية ، الإنارة ، الإلكترونية) وطرق الفحص المجهري الخاصة (تباين الطور ، المجال المظلم).

في الممارسة الميكروبيولوجية ، يتم استخدام مجاهر العلامات التجارية المحلية: MBR-1 ، MBI-2 ، MBI-3 ، MBI-6 ، "Bio-lam" R-1 ، إلخ (الشكل 1.1). وهي مصممة لدراسة الشكل والبنية والحجم والميزات الأخرى للميكروبات المختلفة ، والتي لا يقل حجمها عن 0.2-0.3 ميكرون.

الفحص المجهري للغطس

تستخدم لزيادة دقة الطريقة المجهر الضوئي. يتم تحديد قوة حل نظام الفحص المجهري الضوئي البصري من خلال الطول الموجي للضوء المرئي والفتحة العددية للنظام. تشير الفتحة العددية إلى مقدار زاوية الحد الأقصى لمخروط الضوء الذي يدخل العدسة ، وتعتمد على الخصائص البصرية (القدرة الانكسارية) للوسيط بين الجسم وعدسة الهدف. إن غمر العدسة في وسط (زيت معدني ، ماء) يحتوي على معامل انكسار مرتفع قريب من الزجاج يمنع الضوء من التشتت من الجسم.

أرز. 1.2 مسار الأشعة في نظام الغمر n هو معامل الانكسار.

أرز. 1.3 مسار الأشعة في مكثفات المجال المظلم ، أ عبارة عن مكثف مكافئ ؛ ب - مكثف قلبي ؛ 1 - عدسة 2 - زيت الغمر 3 - التحضير 4 - سطح المرآة 5 - الحجاب الحاجز.

وبالتالي ، يتم تحقيق زيادة في الفتحة العددية وبالتالي الدقة. بالنسبة للفحص المجهري بالغمر ، يتم استخدام عدسات غاطسة خاصة ومجهزة بملصق (MI - غمر بالزيت ، VI - غمر في الماء). لا يتجاوز القرار المحدد لمجهر الغمر 0.2 ميكرومتر. يظهر مسار الأشعة في نظام الغمر في الشكل. 1.2

يتم تحديد التكبير الكلي للمجهر بواسطة نتاج تكبير الهدف وتكبير العدسة العينية. على سبيل المثال ، تكبير المجهر بهدف غمر 90 وعدسة 10 هو: 90 × 10 = 900.

الفحص المجهري في الضوء المرسل (الفحص المجهري للمجال الساطع)تستخدم لدراسة الأشياء الملطخة في المستحضرات الثابتة.

الفحص المجهري للمجال المظلم.يتم استخدامه للدراسة داخل الحجاج للميكروبات في المستحضرات الأصلية غير الملوثة. يعتمد الفحص المجهري للمجال المظلم على ظاهرة حيود الضوء تحت الإضاءة الجانبية للجسيمات المعلقة في سائل ( تأثير تيندال). يتم تحقيق التأثير باستخدام مكثف مكافئ أو قلبي الشكل ، والذي يحل محل مكثف تقليدي في مجهر بيولوجي (الشكل 1.3). باستخدام طريقة الإضاءة هذه ، تدخل العدسة فقط الأشعة المنعكسة من سطح الجسم. نتيجة لذلك ، تظهر الجسيمات المضيئة الزاهية على خلفية مظلمة (مجال رؤية غير مضاء). التحضير في هذه الحالة له الشكل الموضح في الشكل. 1.4 ، ب (في الملحق).

على النقيض من المرحلة المجهري.مصممة لدراسة الأدوية المحلية. يتيح جهاز تباين الطور رؤية الأشياء الشفافة في المجهر. يمر الضوء عبر تراكيب بيولوجية مختلفة بسرعات مختلفة ، والتي تعتمد على الكثافة الضوئية للجسم. نتيجة لذلك ، يحدث تغيير في طور الموجة الضوئية ، والذي لا تدركه العين. يقوم جهاز الطور ، الذي يتضمن مكثفًا خاصًا وعدسة ، بتحويل التغييرات في طور الموجة الضوئية إلى تغييرات مرئية في السعة. وبالتالي ، يتم تحقيق تعزيز الاختلاف في الكثافة الضوئية للأجسام. يكتسبون تباينًا عاليًا ، يمكن أن يكون إيجابيًا أو سلبيًا. يُطلق على تباين الطور الإيجابي صورة مظلمة لكائن في مجال رؤية ساطع ، سلبي - صورة ضوئية لكائن على خلفية داكنة (انظر الشكل 1.4 ؛ في الملحق).

بالنسبة للفحص المجهري الطوري ، يتم استخدام مجهر تقليدي وجهاز تباين طوري إضافي KF-1 أو KF-4 (الشكل 1.5) ، بالإضافة إلى أجهزة إضاءة خاصة.

الفحص المجهري الإنارة (أو الفلوريسنت).بناءً على ظاهرة التلألؤ الضوئي.

التلألؤ- وهج المواد التي تحدث تحت تأثير الإشعاع الخارجي: الضوء ، الأشعة فوق البنفسجية ، المؤينة ، إلخ. التلألؤ الضوئي - تألق جسم تحت تأثير الضوء. إذا قمت بإضاءة جسم مضيء بضوء أزرق ، فإنه ينبعث منه أشعة حمراء أو برتقالية أو صفراء أو خضراء. والنتيجة هي صورة ملونة للكائن.

أرز. 1.5 جهاز تباين الطور ، أهداف المرحلة ؛ ب - المجهر الإضافي ؛ ج - مكثف المرحلة.

يعتمد الطول الموجي للضوء المنبعث (لون التألق) على التركيب الكيميائي الفيزيائي لمادة الإنارة.

خبراتتألق الكائنات البيولوجية (ملك،أو تلألؤ بيولوجي) دون تلطيخ أولي بسبب وجود مواد الإنارة الخاصة به ، ثانوي (مستحث) -يحدث نتيجة لتلطيخ المستحضرات بأصباغ إنارة خاصة - الفلوروكرومات(برتقال أكريدين ، أورومين ، كوريفوسفين ، إلخ). يتميز الفحص المجهري للإنارة بعدد من المزايا مقارنة بالطرق التقليدية: القدرة على فحص الميكروبات الحية واكتشافها في مادة الاختبار بتركيزات صغيرة بسبب درجة التباين العالية.

في الممارسة المعملية ، يستخدم الفحص المجهري الفلوري على نطاق واسع لتحديد ودراسة العديد من الميكروبات.

المجهر الإلكتروني.يسمح لك بمراقبة الأشياء التي تتجاوز أبعادها دقة المجهر الضوئي (0.2 ميكرون). يستخدم المجهر الإلكتروني لدراسة الفيروسات ، والتركيب الدقيق للعديد من الكائنات الحية الدقيقة ، والتركيبات الجزيئية وغيرها من الكائنات الدقيقة الفرعية. يتم استبدال أشعة الضوء في مثل هذه المجاهر بتدفق إلكتروني ، والذي ، عند تسارع معين ، له طول موجي يبلغ حوالي 0.005 نانومتر ، أي ما يقرب من 100000 مرة أصغر من الطول الموجي للضوء المرئي. تتيح لك الدقة العالية للميكروسكوب الإلكتروني ، والتي تصل إلى 0.1-0.2 نانومتر ، الحصول على زيادة مفيدة إجمالية تصل إلى 1000000.

إلى جانب الأجهزة من النوع "شبه الشفاف" ، يستخدمونها مسح المجاهر الإلكترونية ،توفير صورة إغاثة لسطح الكائن. إن قوة حل هذه الأجهزة أقل بكثير من قدرة المجاهر الإلكترونية من نوع "الإرسال".

قواعد العمل بالمجهر

يتضمن العمل مع أي مجهر ضوئي ضبط الإضاءة الصحيحة لمجال الرؤية والتحضير والمجهر بأهداف مختلفة. يمكن أن تكون الإضاءة طبيعية (ضوء النهار) أو اصطناعية ، حيث يتم استخدام مصادر إضاءة خاصة - أجهزة إضاءة من ماركات مختلفة.

عند الفحص المجهري للمستحضرات باستخدام عدسة غاطسة ، يجب على المرء الالتزام الصارم بترتيب معين:

1) ضع قطرة من زيت الغمر على اللطاخة المحضرة والملطخة على الشريحة وضعها على المنضدة المنزلقة ، وتثبيتها بالمشابك ؛

2) أدر المسدس إلى علامة هدف الغمر 90x أو 100x ؛

3) قم بخفض أنبوب المجهر بعناية حتى يتم غمر العدسة في قطرة زيت ؛

4) اضبط التركيز التقريبي باستخدام المسمار اللولبي ؛

5) نفذ التركيز النهائي للتحضير باستخدام برغي ميكرومتر ، وقم بتدويره في الداخل دورة واحدة فقط.لا تسمح للعدسة بالتلامس مع
نظير ، لأن هذا قد يؤدي إلى كسر زجاج الغطاء أو العدسة الأمامية للهدف (المسافة الحرة لهدف الغمر هي 0.1-1 مم).

في نهاية المجهر ، إزالة الزيت من العدسة الغاطسةوحرك المسدس إلى عدسة 8x صغيرة.

بالنسبة للفحص المجهري للمجال المظلم والطور المتباين ، يتم استخدام المستحضرات الأصلية (القطرة "المسحوقة" ، إلخ ، انظر الموضوع 2.1) ؛ مجهر بهدف 40x أو هدف غمر خاص مع غشاء قزحية يسمح لك بضبط الفتحة الرقمية من 1.25 إلى 0.85. يجب ألا يتجاوز سمك الشرائح 1-1.5 مم ، زلات الغطاء - 0.15-0.2 مم.