A HIV-fertőzés diagnosztizálásának standard szűrési módszere az. HIV-fertőzés vizsgálata: az eljárás jellemzői és az eredmények értelmezése

A HIV-fertőzés diagnosztizálásának standard szűrési módszere az. HIV-fertőzés vizsgálata: az eljárás jellemzői és az eredmények értelmezése

A HIV-fertőzés korai felismerése lehetővé teszi a vírus szaporodásának szabályozását a vérben és megakadályozza az AIDS kialakulását. A szokásos ELISA-teszt a beteg ember vérplazmájában kimutatja az antitesteket, amelyeket az immunrendszer a fertőzés után másfél-három hónappal elkezd termelni (megjelenésüket gyakran az influenzára jellemző tünetek – láz és általános rossz közérzet – kísérik). A PCR a fertőzést követő 2-3 héten belül képes kimutatni a HIV-t.

Ennek a krónikusnak a korai diagnosztizálására vírusos fertőzés a HIV-fertőzés fokozott kockázatával rendelkező lakossági csoportok (például kábítószer-fogyasztók) szűrővizsgálatát (tömeges) végzik.

Az ilyen elemzést bármely orvos előírhatja, ha gyanítja a beteget, vagy szükségesnek tartja a HIV-fertőzés kizárását. A standard tesztet bárki elvégezheti saját akarat valamint ingyenesen, így névtelenül is, az AIDS prevenciós központokban és azok fiókjaiban (pontokon). Az ilyen elemzés eredménye orvosi titok, csak személyesen adják át a betegnek.

Főbb jelzések

  • minden védekezés nélküli szexuális kapcsolat után új, alkalmi, ismeretlen partnerrel;
  • nemi erőszak után;
  • ha kiderült, hogy a szexuális partner (volt, jelenlegi) HIV-fertőzött;
  • ha a partner magas fertőzésveszélyes helyzetekben volt;
  • ha a kábítószer bejuttatása nem egyedi fecskendőkkel és tűkkel történt;
  • közös tűvel végzett tetoválás és piercing után egy embercsoport számára;
  • nem steril tűk és orvosi műszerek használata után;
  • HIV-pozitív vérrel való érintkezés után;
  • ha STD-vel diagnosztizálják.

Ezt akkor is meg kell tenni, ha vannak:

  • hirtelen fogyás objektív ok nélkül;
  • megmagyarázhatatlan krónikus hasmenés;
  • krónikus fáradtság szindróma;
  • gyakori megfázás;
  • éjjeli izzadás;
  • a nyirokcsomók több csoportjának növekedése;
  • vírusfertőzések gyakori előfordulása.

Hogyan készüljünk fel a tanulmányra

A vénából a vérvételt éhgyomorra végzik, ezért az elemzés előtt 8 órával nem ajánlott enni.

Elemzési funkciók

A vírus jelenlétét a vérplazmában három teszttel igazolják - ELISA, immunoblot, PCR.

Az enzimhez kötött immunszorbens vizsgálat (ELISA) kimutatja a vírus elleni fehérje antitesteket, amelyek 3-6 hónappal a szervezetben való megjelenése után kezdenek keringeni a vérplazmában. Az ELISA meglehetősen érzékeny módszer, amelynek pontossága akár 99%.

Ennek a tesztnek az eredménye lehet pozitív, negatív vagy nem meggyőző. Ha az eredmény szeronegatív, magas fertőzési kockázattal, vagy kétséges ilyen kockázat nélkül, akkor más HIV-teszteket rendelnek el. Néha az ELISA hamis pozitív eredményt mutat fertőző, onkológiai vagy autoimmun betegségekben, ami más tesztek kijelölését is szükségessé teszi.

Immunblot vizsgálat- Ez is egy teszt az antitestek jelenlétére a vérplazmában, de érzékenyebb. A szeropozitív teszt igazolja a HIV-fertőzést. A kétes tesztet 4-6 hét múlva meg kell ismételni. Ha az eredmény nem változott, akkor a vért még kétszer veszik - 3 havonta, vagy egy másik vizsgálaton vesznek részt.

A polimeráz láncreakció (PCR) a vírus DNS-ét azonosítja a vérplazmában 2-3 héttel azután, hogy bejutott a vérbe.

Ennek a tesztnek a költsége és a hamis pozitív válaszok valószínűsége azonban csak akkor javasolja a használatát, ha a két korábbi (standard) vizsgálat eredményei nem teszik lehetővé a HIV-fertőzés diagnosztizálását vagy kizárását.

Ha komoly a HIV-fertőzés gyanúja, jobb, ha kapcsolatba lép az AIDS-megelőzési központtal, ahol orvos irányítása mellett minden szükséges vizsgálaton át kell menni, és megbízható eredményt kap.

És

HIV elleni antitestek 1/2- a vérplazma fehérje jellegű összetevői, amelyek megakadályozzák a HIV-fertőzés szaporodását és teljesen semlegesítik annak negatív hatását.

Mi az a HIV antitest teszt 1/2 (szűrés)

A HIV 1,2 elleni antitestek szűrőelemzése - olyan tesztrendszer, amely lehetővé teszi az immunhiány-vírussal fertőzött emberek azonosítását. Ezeken kívül léteznek úgynevezett megerősítő (kisegítő) tesztek, amelyek feladata a vírussal nem fertőzött, de a vírusra pozitív reakcióval rendelkező egyének azonosítása a szűrés során.

A HIV-fertőzés szűrővizsgálatának lényege az immunhiányos vírus elleni antitestek meghatározása. Megkülönböztető jellemzője a fokozott érzékenység - több mint 99,5%. A tesztelés sajátossága, hogy a szűrés álpozitív eredményt adhat, ha a páciens szervezete autoantitesteket tartalmaz.

Ugyanez az eredmény mutatható ki betegnél májbetegség, influenza elleni védőoltás vagy bármilyen akut betegség fennállása esetén. vírusos betegség. Ez alapján a pontos eredmény érdekében a szűréssel együtt általában a fent említett megerősítő vizsgálatot szokás elvégezni.

Az elemzés indikációi

Az orvosi gyakorlatban meglehetősen sokféle indikáció létezik a szűrésre. A páciens kérheti:

  • fertőzés gyanúja (ha szoros kapcsolat volt a HIV-fertőzés hordozójával);
  • fogyással, lázzal;
  • tüdőgyulladás, amely nem alkalmas a hagyományos terápiára;
  • krónikus természetű betegségek, amelyek ismeretlen okból keletkeztek;
  • a műtét előkészítése során;
  • vérátömlesztések;
  • terhesség és családtervezés;
  • Gyulladt nyirokcsomókkal;
  • Alkalmi szex.

Speciális kockázati csoportba tartozó személyek: kábítószer-függők és szokatlan szexuális életet folytatók.

Hogyan történik a HIV antitest szűrés 1/2

Az eljárás magában foglalja számos szükséges szabály betartását:

  • a betegnek kizárólag éhgyomorra kell vért adnia (víz fogyasztása megengedett);
  • legalább nyolc órának el kell telnie az utolsó étkezés óta;
  • az orvost tájékoztatni kell arról, hogy a beteg milyen gyógyszereket szed, és ismernie kell az adagolást (ha nincs lehetőség akár rövid távú visszavonásra);
  • ha a beteg képes késleltetni a használatot gyógyszerek, ezt ajánlott 10-15 nappal a manipuláció napja előtt megtenni;
  • A vizsgálat megkezdése előtti napon tanácsos a betegnek megtagadni a sült vagy zsíros ételek fogyasztását, továbbá tilos alkoholos italokat inni, dohányozni és korlátozni a nehéz fizikai aktivitást.

Meg kell jegyezni, hogy az immunhiányos vírust hordozó anyáktól született gyermekek fertőzésének jelenlétére vonatkozó laboratóriumi vizsgálatoknak megvannak a sajátosságai.

A HIV-fertőzés időben történő diagnosztizálása rendkívül fontos intézkedéssé válik, mivel a korábbi kezelés nagymértékben meghatározhatja a betegség további fejlődését és meghosszabbíthatja a beteg életét. Az elmúlt években jelentős előrelépés történt ennek a szörnyű betegségnek a felderítésében: a régi tesztrendszereket felváltják a fejlettebbek, elérhetőbbé válnak a vizsgálati módszerek, és jelentősen megnőtt a pontosságuk.

Ebben a cikkben arról fogunk beszélni modern módszerek HIV-fertőzés diagnosztizálása, amelyet hasznos tudni a probléma időben történő kezeléséhez és a beteg normális életminőségének fenntartásához.

A HIV diagnosztizálásának módszerei

Oroszországban a HIV-fertőzés diagnosztizálására szabványos eljárást végeznek, amely két szintből áll:

  • ELISA tesztrendszer (szűrőelemzés);
  • immunblot (IB).

Más diagnosztikai módszerek is használhatók:

  • expressz tesztek.

ELISA tesztrendszerek

A diagnózis első szakaszában a HIV-fertőzés kimutatására szűrőtesztet (ELISA) alkalmaznak, amely laboratóriumokban létrehozott HIV-fehérjéken alapul, amelyek a szervezetben a fertőzésre válaszul termelődő specifikus antitesteket rögzítik. A tesztrendszer reagenseivel (enzimeivel) való kölcsönhatás után az indikátor színe megváltozik. Ezenkívül ezeket a színváltozásokat speciális berendezéssel dolgozzák fel, amely meghatározza az elvégzett elemzés eredményét.

Az ilyen ELISA-tesztek a HIV-fertőzés bejutását követő néhány héten belül képesek eredményt mutatni. Ez az elemzés nem határozza meg a vírus jelenlétét, hanem kimutatja az ellenanyag termelését. Előfordul, hogy az emberi szervezetben a HIV-ellenes antitestek termelése a fertőzés után 2 héttel kezdődik, de a legtöbb embernél később, 3-6 hét után termelődnek.

Az ELISA teszteknek négy generációja létezik, különböző érzékenységgel. Az utóbbi években egyre gyakrabban alkalmazzák a III és IV generációs tesztrendszereket, amelyek szintetikus peptideken vagy rekombináns fehérjéken alapulnak, és nagyobb specifitásúak és pontosabbak. Használhatók a HIV-fertőzés diagnosztizálására, a HIV-prevalencia nyomon követésére és a biztonság garantálására az adományozott vér tesztelésekor. A III és IV generációs ELISA tesztrendszerek pontossága 93-99% (az országokban érzékenyebb teszteket is gyártanak Nyugat-Európa – 99%).

Az ELISA teszt elvégzéséhez 5 ml vért veszünk a páciens vénájából. Az utolsó étkezés és az elemzés között legalább 8 órának kell eltelnie (általában reggel, éhgyomorra kell elvégezni). Az ilyen tesztet legkorábban az állítólagos fertőzés után 3 héttel ajánlott elvégezni (például új szexuális partnerrel való védekezés nélküli közösülés után).

Az ELISA teszt eredményei 2-10 nap elteltével érhetők el:

  • negatív eredmény: HIV-fertőzés hiányát jelzi, és nem szükséges szakemberhez fordulni;
  • téves negatív eredmény: -on figyelhető meg korai időpontok fertőzés (legfeljebb 3 hét), az AIDS késői stádiumában súlyos immunszuppresszióval és nem megfelelő vérkészítéssel;
  • téves pozitív eredmény: egyes betegségeknél és nem megfelelő vérkészítés esetén is megfigyelhető;
  • pozitív eredmény: fertőzést jelez HIV fertőzés, IB szükséges és a beteg beutalója az AIDS Központ szakorvosához.

Miért adhat hamis pozitív eredményt az ELISA teszt?

Az ELISA HIV-teszt hamis pozitív eredményei figyelhetők meg nem megfelelő vérfeldolgozás esetén, vagy olyan betegeknél, akiknél a következő állapotok és betegségek:

  • myeloma multiplex;
  • az Epstein-Barr vírus által kiváltott fertőző betegségek;
  • állapot után ;
  • autoimmun betegség;
  • a terhesség hátterében;
  • vakcinázás utáni állapot.

A fent leírt okok miatt a vérben olyan nem specifikus, keresztreagáló antitestek lehetnek jelen, amelyek termelődését nem HIV-fertőzés váltotta ki.

Az elmúlt években jelentősen csökkent a hamis pozitív eredmények gyakorisága a III és IV generációs tesztrendszerek alkalmazása miatt, amelyek érzékenyebb peptidet és rekombináns fehérjéket tartalmaznak (ezeket in vitro géntechnológiával állítják elő). Az ilyen ELISA tesztek alkalmazása után a hamis pozitív eredmények gyakorisága jelentősen csökkent, és körülbelül 0,02-0,5%.

A hamis pozitív eredmény nem jelenti azt, hogy egy személy HIV-fertőzött. Ilyen esetekben a WHO újabb ELISA-tesztet javasol (kötelező IV generáció).

A páciens vérét egy referencia- vagy választott laboratóriumba küldik „repeat” jelzéssel, és IV generációs ELISA tesztrendszerrel tesztelik. Ha az új elemzés eredménye negatív, akkor az első eredményt hibásnak (hamis pozitívnak) ismeri el, és az IB-t nem hajtják végre. Ha az eredmény pozitív vagy kétséges a második teszt során, a betegnek 4-6 héten belül IB-n kell átesnie a HIV-fertőzés megerősítésére vagy cáfolatára.

immunblot

A HIV-fertőzés végleges diagnózisát csak pozitív immunblot (IB) eredmény megszerzése után lehet felállítani. Ennek megvalósításához nitrocellulóz csíkot használnak, amelyen vírusfehérjéket alkalmaznak.

Az IB vérmintavétele vénából történik. Ezután speciális kezelésen esik át, és a szérumában lévő fehérjéket töltésük és molekulatömegük szerint speciális gélben választják el (a manipulációt speciális berendezésen, elektromos tér hatására végzik). A vérszérum gélre nitrocellulóz csíkot helyeznek, és egy speciális kamrában blottolást („blotolást”) végeznek. A csíkot feldolgozzák, és ha a felhasznált anyagok HIV-ellenes antitesteket tartalmaznak, akkor az IB antigén sávokhoz kötődnek, és vonalként jelennek meg.

Az IB akkor tekinthető pozitívnak, ha:

  • az amerikai CDC-kritériumok szerint - két vagy három sor van a gp41, p24, gp120 / gp160 csíkon;
  • az amerikai FDA kritériumai szerint - a csíkon két p24, p31 és egy gp41 vagy gp120 / gp160 vonal található.

Az esetek 99,9%-ában a pozitív IB eredmény HIV-fertőzést jelez.

Vonalak hiányában az IB negatív.

A gp160, gp120 és gp41 vonalak azonosításakor az IB kétséges. Ilyen eredmény akkor észlelhető, ha:

  • onkológiai betegségek;
  • terhesség;
  • gyakori vérátömlesztés.

Ilyen esetekben javasolt egy második vizsgálat elvégzése egy másik cég készletének felhasználásával. Ha további IB után az eredmény kétséges marad, akkor hat hónapig tartó követés szükséges (3 havonta IB).

polimeráz láncreakció

A PCR teszt képes kimutatni a vírus RNS-ét. Érzékenysége meglehetősen magas, és lehetővé teszi a HIV-fertőzés kimutatását már a fertőzés után 10 nappal. Egyes esetekben a PCR álpozitív eredményt adhat, mert nagy érzékenysége más fertőzések ellenanyagaira is reagálhat.

Ez a diagnosztikai technika drága, speciális felszerelést és magasan képzett szakembereket igényel. Ezek az okok nem teszik lehetővé a populáció tömeges tesztelése során történő elvégzését.

A PCR-t a következő esetekben alkalmazzák:

  • HIV kimutatására újszülötteknél, akik HIV-fertőzött anyától születtek;
  • HIV kimutatására az "ablakidőszakban" vagy kétes IB esetén;
  • a HIV koncentrációjának szabályozása a vérben;
  • donorvér vizsgálatához.

Csak a PCR teszttel nem diagnosztizálják a HIV-t, hanem kiegészítő diagnosztikai módszerként a viták megoldására.


Expressz módszerek

A HIV-diagnosztika egyik újítása a gyorstesztek lettek, amelyek eredménye 10-15 perc alatt értékelhető. A leghatékonyabb és legpontosabb eredményeket a kapilláris áramlás elvén alapuló immunkromatográfiás tesztek adják. Ezek speciális csíkok, amelyekre vért vagy más vizsgálati folyadékot (nyál, vizelet) visznek fel. HIV-ellenes antitestek jelenlétében 10-15 perc elteltével színes és kontrollcsík jelenik meg a teszten - pozitív eredmény. Ha az eredmény negatív, csak a kontrollvonal jelenik meg.

Az ELISA tesztekhez hasonlóan a gyorstesztek eredményeit IB analízissel kell megerősíteni. Csak ezt követően lehet diagnosztizálni a HIV-fertőzést.

Vannak expressz készletek otthoni teszteléshez. Az OraSure Technologies1 (USA) teszt az FDA által jóváhagyott, vény nélkül kapható, és a HIV kimutatására használható. A vizsgálat után, pozitív eredmény esetén, a betegnek ajánlott egy speciális központban végzett vizsgálat a diagnózis megerősítésére.

A fennmaradó otthoni használatra szánt teszteket az FDA még nem hagyta jóvá, és eredményeik nagyon megkérdőjelezhetőek lehetnek.

Annak ellenére, hogy a gyorstesztek pontossága gyengébb, mint az IV-generációs ELISA-tesztek, széles körben használják a populáció további tesztelésére.

HIV-fertőzés vizsgálatát bármely poliklinikán, a Központi Regionális Kórházban vagy az AIDS-re szakosodott centrumokban végezheti. Oroszország területén teljesen bizalmasan vagy névtelenül tartják őket. Minden páciens orvosi vagy pszichológiai tanácsot kaphat az elemzés előtt vagy után. A HIV-tesztekért csak a kereskedelmi egészségügyi intézményekben kell fizetni, az állami klinikákon és kórházakban pedig ingyenesen végzik el.

Ha többet szeretne megtudni arról, hogyan kaphat el HIV-fertőzést, és milyen mítoszok léteznek a fertőzés lehetőségével kapcsolatban, olvassa el

Az előbbiek az összes HIV-fertőzött személy azonosítására szolgálnak, az utóbbiak pedig a nem HIV-fertőzöttek azonosítására szolgálnak, de a szűrővizsgálatok során pozitív reakciót adtak. Ezért a szűrővizsgálatok rendkívül érzékenyek, azaz szinte nincs álnegatív eredmény, a megerősítő tesztek pedig nagyon specifikusak, vagyis szinte nincs álpozitív eredmény. Ezek a tesztek együttesen pontos és megbízható eredményeket adnak, amelyek képesek kimutatni a szennyezett vérkészítményeket és diagnosztizálni a HIV-fertőzést. Vannak azonban olyan biológiai tényezők, amelyek csökkentik e tesztek pontosságát; laboratóriumi hibák is előfordulhatnak. Ezért minden HIV-antitesteket vizsgáló laboratóriumnak kifogástalan minőség-ellenőrzési programmal kell rendelkeznie ezekhez a tesztekhez. Nem szabad elfelejtenünk, hogy a megbízhatóság laboratóriumi kutatás soha nem 100%, és eredményeiket mindig a klinikai diagnózis kiegészítésének kell tekinteni.

Ablakidőszak és a HIV-fertőzés korai felismerése:

A HIV-ellenes antitestek hamarosan a fertőzés után kezdenek termelődni, de megjelenésük időpontja számos tényezőtől függ, különösen a beteg immunrendszerének állapotától és a vírus tulajdonságaitól. Fontos megjegyezni, hogy az antitestek már a fertőzés után is jelen lehetnek a vérben, de koncentrációjuk egyes módszerek kimutatási határa alatt lehet (ablakperiódus). Az első tesztrendszerek szinte minden HIV-fertőzöttnél kimutattak antitesteket a fertőzés után 6-12 héttel. A legújabb tesztrendszerek, köztük a harmadik generációs trap ELISA is, a fertőzés után 3-4 héttel kimutatják az antitesteket. A fertőzés és a HIV-fertőzés diagnosztizálása közötti idő néhány nappal lerövidíthető HIV-antigén kimutatási módszerekkel, és további néhány nappal a HIV RNS kimutatási módszerekkel. Ha az összes leírt módszert alkalmazzák, a HIV-fertőzés diagnózisa a legtöbb betegnél már a fertőzés után 2-3 héttel megállapítható. A HIV-ellenes antitestek szűrésére szolgáló, kereskedelemben kapható tesztrendszerek nagyon magas és megközelítőleg azonos érzékenységgel rendelkeznek, ami elegendő a HIV-fertőzöttek többségének kimutatására (úgynevezett epidemiológiai érzékenység). A különböző tesztrendszerek azonban különböznek az analitikai érzékenységben, vagyis abban, hogy képesek-e kimutatni az antitestek alacsony szintjét, amelyek a szerokonverzió befejeződése előtt fordulnak elő.

Vannak tesztrendszerek, amelyeket a HIV elleni IgM antitestek kimutatására terveztek, de ezeket nem használják széles körben a HIV-fertőzés korai diagnosztizálására, mivel az IgM antitestek nem mindig termelődnek korán a fertőzés után. Egyes harmadik generációs tesztrendszerek egyidejűleg detektálják a HIV elleni IgM és IgG antitesteket, és nagyobb analitikai érzékenységgel rendelkeznek.

Lásd még: A HIV-státusz nyilvánosságra hozatala sajnálkozás nélkül, Szövényeltérés, Vaszkuláris aneurizma: rejtett veszély az egészségre, Szülés előtti szűrés; kromoszóma-rendellenességek, lappangó strabismus (Strabismus latenta, Heterophoria), rejtett kockázat: nők és szívbetegségek, látens szifilisz (Syphilis latens), polimeráz protokoll láncreakció valós idejű reverz transzkripcióval (RT-PCR, Realtime RT-PCR) CDC az influenza A(H1N1) vírus kimutatására és kivizsgálására, fogcsikorgatás (bruxizmus), Vigyázat: rejtett allergének

… bármely diagnózis fertőző betegség epidemiológiai, klinikai és laboratóriumi adatok összehasonlításán alapul, és ezen adatok valamelyik csoportjának értékének túlzása diagnosztikai hibákhoz vezethet.

A HIV-fertőzés diagnosztizálása két szakaszból áll:
én színpad - a HIV-fertőzés tényleges tényének megállapítása;
II színpad - a betegség stádiumának meghatározása.

A HIV-FERTŐZÉS TÉNYÉNEK MEGÁLLAPÍTÁSA

Maga a HIV-fertőzés tényének megállapítása (vagyis a HIV-fertőzöttek azonosítása) szintén két szakaszból áll:
színpadra állítomkapcsolt immunszorbens vizsgálat(ELISA): az ELISA módszer egy szűrés (szűrés) - a feltehetően fertőzött egyének kiválasztása, vagyis célja a gyanús személyek azonosítása és kiszűrése. egészséges egyének; a HIV-ellenes antitesteket a kívánt antitestek elleni más antitestek (más antitestek elleni antitestek) segítségével mutatják ki.

Ezek a "segítő" antitestek egy enzimmel vannak megjelölve. Minden szűrővizsgálatnak nagyon érzékenynek kell lennie, hogy ne hagyja ki a beteget. Emiatt nem túl magas a specifitásuk, vagyis az ELISA pozitív választ ("valószínűleg beteg") adhat nem fertőzött embereknél (például autoimmun betegségekben: reuma, szisztémás lupus erythematosus stb.). A hamis pozitív eredmények gyakorisága különböző tesztrendszerek használatakor 0,02 és 0,5% között van. Ha egy személy ELISA-vizsgálata pozitív eredményt adott, akkor a HIV-fertőzés tényének megerősítéséhez további vizsgálatot kell végezni.

Az ELISA elvégzése az esetek 3-5% -ában hamis negatív eredmény lehetséges - ha a fertőzés viszonylag nemrégiben történt, és az antitestek szintje még mindig nagyon alacsony, vagy a betegség végső stádiumában, amelyet súlyos károsodás jellemez. immunrendszer, az antitestképződési folyamat súlyos károsodásával. Ezért, ha bizonyíték van HIV-fertőzöttekkel való érintkezésre, általában 2-3 hónap elteltével ismételt vizsgálatokat végeznek.
II szakaszimmunoblot(a Western blot, Western blot módosításában): összetettebb módszer, és a fertőzés tényének megerősítésére szolgál.

Ez a módszer nem a HIV elleni komplex antitesteket, hanem annak egyedi szerkezeti fehérjéi (p24, gp120, gp41 stb.) elleni antitesteket mutat ki.

Az immunoblot eredménye akkor tekinthető pozitívnak, ha legalább három fehérje ellen kimutatható antitest, amelyek közül az egyiket az env gének, a másikat a gag gének, a harmadikat a pol gének kódolják. Ha egy vagy két fehérje ellen antitesteket észlelnek, az eredmény kétségesnek minősül, és megerősítést igényel.

A legtöbb laboratóriumban a HIV-fertőzés diagnosztizálására akkor kerül sor, ha a p24, p31, gp4l és gpl20/gp160 fehérjék elleni antitesteket egyidejűleg mutatják ki. A módszer lényege: a vírust komponensekre (antigénekre) bontják, amelyek ionizált aminosavmaradékokból állnak, és ezért minden komponensnek van egy-egy egymástól eltérő hajnala; majd elektroforézissel (elektromos árammal) az antigének szétoszlanak a csík felületén - ha HIV-ellenes antitestek vannak a tesztszérumban, akkor az összes antigéncsoporttal kölcsönhatásba lépnek, és ez kimutatható.

Emlékezni kell A HIV-ellenes antitestek a fertőzöttek 90-95%-ánál a fertőzést követő 3 hónapon belül, a fertőzöttek 5-9%-ánál 6 hónap után, a fertőzöttek 0,5-1%-ánál pedig a későbbiekben jelennek meg a HIV elleni antitestek.

AIDS-stádiumban az antitestek száma csökkenhet, egészen a teljes eltűnésig.

Az immunológiában van olyan, hogy "szerológiai ablak"- a fertőzéstől az ilyen számú, kimutatható antitest megjelenéséig tartó időszak.

HIV-fertőzés esetén ez az időszak általában 2-12 hétig tart, ritka esetekben hosszabb ideig. A „szerológiai ablak” alatt az ember a vizsgálatok szerint egészséges, valójában azonban HIV-fertőzött. Megállapítást nyert, hogy a HIV DNS legalább három évig az emberi genomban lehet aktivitás jelei nélkül, és nem jelennek meg a HIV elleni antitestek (a HIV-fertőzés markerei).

Ebben az időszakban („szerológiai ablak”) lehetőség nyílik a HIV-fertőzött személy azonosítására, illetve a fertőzés után 1-2 héttel. polimeráz láncreakció(PCR).

Ez egy rendkívül érzékeny módszer – elméletileg 10 ml táptalajban 1 DNS detektálható. A módszer lényege a következő: polimeráz láncreakció segítségével egy nukleinsavból sok másolatot kapnak (a vírus egy nukleinsav - DNS vagy RNS - fehérjeburokban), amelyeket ezután jelölt enzimek vagy izotópok segítségével detektálnak. , valamint jellegzetes szerkezettel. A PCR költséges diagnosztikai módszer, ezért szűrésre nem és rutinszerűen használják.

A BETEGSÉG SZAKASZÁNAK MEGHATÁROZÁSA

Az AIDS kialakulása mindenekelőtt a T-limfociták-helperek elpusztításán alapul, amelyeket monoklonális antitestek - differenciálódási klaszterek -, mint CD4 jellemeznek.

Ebben a tekintetben a betegség diagnosztizálása és előrehaladásának nyomon követése lehetetlen a T-helper alpopuláció ellenőrzése nélkül, amelyet legkényelmesebben lézeres sejtválogatóval lehet végrehajtani.

Enyhe HIV-fertőzés esetén a T-limfociták száma rendkívül változó mutató. Általánosságban elmondható, hogy a CD4-sejtek számának (abszolút és relatív) csökkenése figyelhető meg azoknál az egyéneknél, akiknél a HIV-fertőzés legalább egy éve történt.

Másrészt tovább korai szakaszaiban A fertőzés gyakran a T-szuppresszorok (CD8) élesen megnövekedett számának bizonyul mind a perifériás vérben, mind a megnagyobbodott nyirokcsomókban.

Súlyos AIDS-szel a betegek túlnyomó többségénél csökkent a T-limfociták összszáma (kevesebb, mint 1000/1 μl vér, beleértve a CD4 limfocitákat is – kevesebb, mint 22/1 μl, míg a CD8 tartalom abszolút értéke a normál tartományon belül marad).

Ennek megfelelően a CD4/CD8 arány élesen csökken. A T-limfociták in vitro válasza standard antigénekre és mitogénekre szigorúan a viszonylag csökkent CD4 számnak megfelelően csökken.

Előrehaladott AIDS eseténáltalános lymphopenia, neutropenia, thrombocytopenia (illetve a limfociták, neutrofilek és vérlemezkék számának csökkenése), vérszegénység jellemzi.

Ezek a változások a hematopoietikus szervek vírus általi károsodása miatti központi gátlásából, valamint a perifériás sejtalpopulációk autoimmun pusztulásából fakadhatnak. Ezenkívül az AIDS-re a gamma-globulinok mennyiségének mérsékelt növekedése és az IgG-tartalom domináns növekedése jellemző.

Az AIDS súlyos tüneteit mutató betegek gyakran emelt szint IgA. A betegség egyes szakaszaiban az AIDS markerek, például az 1-mikroglobulin, a savstabil interferon, az 1-timozin szintje jelentősen megnő. Ugyanez történik a szabad neopterin, egy makrofág metabolit kiválasztásával.

A felsorolt ​​tesztek mindegyikének relatív fontosságát egyelőre nem lehet felmérni, ezek száma folyamatosan növekszik. Ezért ezeket a HIV-fertőzés immunovirológiai és citológiai markereivel kölcsönhatásban kell figyelembe venni.

Mert klinikai elemzés a vért leukopenia, limfopenia (illetve a leukociták és limfociták számának csökkenése) jellemzi.

1. szakasz - " inkubációs szakasz» - még nem mutatták ki a HIV elleni antitesteket; a HIV-fertőzés diagnózisa ebben a szakaszban epidemiológiai adatok alapján történik, és laboratóriumilag meg kell erősíteni a humán immunhiányos vírus, annak antigénjei, HIV-nukleinsavak kimutatásával a beteg vérszérumában;
2. szakasz - " kezdeti megnyilvánulások szakasza»- ebben az időszakban már folyik az antitestek termelése:;
2A szakasz - " tünetmentes» - A HIV-fertőzés csak antitestek termelésével nyilvánul meg;
2B szakasz - " akut HIV-fertőzés másodlagos betegség nélkül"- a betegek vérében széles plazma limfociták - "mononukleáris sejtek" kimutathatók, és gyakran megfigyelhető a CD4-limfociták szintjének átmeneti csökkenése (akut klinikai fertőzés a fertőzöttek 50-90% -ánál fordul elő először 3 hónappal a fertőzés után; az akut fertőzés időszakának kezdete általában megelőzi a szerokonverziót, pl.

HIV elleni antitestek megjelenése);
2B szakasz - " akut HIV-fertőzés másodlagos betegségekkel» - a CD4-limfociták szintjének csökkenése és az ebből eredő immunhiány hátterében különböző etiológiájú másodlagos betegségek jelennek meg (mandulagyulladás, bakteriális és pneumocystis tüdőgyulladás, candidiasis, herpesz fertőzés stb.);
3. szakasz - " rejtett» - az immunhiány progressziójára adott válaszként az immunválasz módosul a CD4 sejtek túlzott reprodukciója formájában, amit a CD4 limfociták szintjének fokozatos csökkenése követ, átlagosan 0,05-0,07 × 109 / l sebességgel évente; HIV-ellenes antitestek találhatók a vérben;
4. szakasz - " másodlagos betegségek stádiuma» - a CD4 limfociták kimerülése, a vírus elleni antitestek koncentrációja jelentősen csökken (a másodlagos betegségek súlyosságától függően a 4A, 4B, 4C stádiumokat különböztetjük meg);
5. szakasz - " terminál szakasz» - jellemzően a CD4 sejtek számának csökkenése 0,05 × 109 / l alá; a vírus elleni antitestek koncentrációja jelentősen csökken, vagy előfordulhat, hogy az antitestek nem mutathatók ki.

A HIV-fertőzés laboratóriumi diagnózisa

A HIV-fertőzés diagnosztizálása során 4 módszercsoportot alkalmaznak:

1. Vírus, antigénjei vagy RNS-másolatai jelenlétének meghatározása a betegektől vagy HIV-fertőzöttektől származó anyagokban

Felszíni (gp 120 és gp 41) és belső (p 18 és p 24) HIV fehérjék elleni specifikus antitestek kimutatásán alapuló szerológiai diagnosztika.

3. A HIV-fertőzés patognómikus (specifikus) elváltozásainak azonosítása az immunrendszerben.

Opportunista fertőzések (AIDS-hez kapcsolódó betegségek) laboratóriumi diagnosztikája.

1. Virológiai diagnosztika. A HIV-izolálás anyaga a vér T-limfocitái, csontvelői leukociták, A nyirokcsomók, agyszövet, nyál, sperma, gerincvelői folyadék, vérplazma.

A kapott anyagot T-limfociták (H9) folyamatos tenyészetének megfertőzésére használjuk. A HIV sejttenyészetben történő kimutatását CPP-vel (szimplasztok képződése), valamint immunfluoreszcenciával, elektronmikroszkóppal, kifejezett reverz transzkriptáz aktivitással végezzük.

A modern kutatási módszerek 1000 sejtenként egy fertőzött limfocita kimutatását teszik lehetővé.

A vírusantigének kimutatását a fertőzött T-limfocitákban monoklonális antitestekkel végezzük

Az elmúlt években a HIV RNS kópiák számának meghatározása a vérplazmában polimeráz láncreakció (PTCR) módszerrel, ún. vírusterhelés.

Ha a kezelésben nem részesülő betegeknél a vírusterhelés a kimutathatósági határ alatt van (ez kevesebb, mint 5000 HIV RNS kópia 1 ml plazmában), ez progresszió hiányát vagy lassú progresszióját jelzi. A fertőzés mértéke minimális. A magas vírusterhelés (több mint 10 000 RNS kópia 1 ml plazmában) 1 µl-ben kevesebb, mint 300 CO4-limfocitával rendelkező betegeknél mindig a betegség progresszióját jelzi.

Szerológiai diagnózis. Jelenleg ez kapta a legnagyobb forgalmat.

Feltárandó anyag: 5 ml. heparinizált vér, amely hűtve 6-8 óráig tartható a laboratóriumba szállítás előtt, de nem fagyasztható.

Azzal a céllal szerológiai diagnózis Az AIDS-t elsősorban módszerekkel alkalmazzák enzim immunoassay standard enzim immunoassay-vel (ELISA).

Ez egy szűrési módszer. A működés elve a direkt ELISA klasszikus elvén alapul. Az immunszorbensek HIV-ből vagy szintetikusan nyert immobilizált inaktivált vírusspecifikus antigént tartalmazó polisztirol tabletták.

Ezután a vizsgált szérumot hígítva adjuk hozzá. Az inkubálást antigénnel ellátott üregekben végezzük. Az AG-nak az AT-hez való kötődése után a meg nem kötött fehérjéket háromszor mossuk, majd a humán immunglobulinok elleni, enzimjelzéssel ellátott antitestek konjugátumát adjuk a lyukakba.

A specifikus AG + AT komplex képződését az enzim szubsztrátjának (ortofenilén-diamin és hidrogén-peroxid oldatának) bejuttatásával lehet kimutatni.

Ennek eredményeként a táptalaj színe az antitestek mennyiségével arányosan változik. A vizsgálat eredményeit spektrofotométeren veszik figyelembe.

Az ELISA szerint vírusspecifikus antitesteket tartalmazó vérszérumokat immunoblottal tovább kell vizsgálni.

Az immunblot egy megerősítő teszt, mivel különféle HIV-fehérjék elleni antitesteket mutat ki.

A HIV-fehérjék poliakrilamid gélelektroforézissel végzett előzetes molekulatömeg szerinti frakcionálásán (szétválasztásán) alapul, amelyet az antigének nitrocellulóz membránra történő átvitele követ. Ezután a tesztszérumot felvisszük a membránra. Ebben az esetben a specifikus antitestek komplexet képeznek egy specifikus antigénnel (gp.120, gp.41, p.24, p.18). A vizsgálat utolsó szakasza a különböző HIV-fehérjék elleni antitestek kimutatása.

Ehhez enzimmel vagy radioizotópos jelöléssel jelölt humán fehérjék elleni antitesteket adnak a rendszerhez.

Így a páciens szérumában az összes vagy a legtöbb HIV-antigén ellen vírusspecifikus antitestek kimutathatók (vagy nem észlelhetők).

3. Az immunállapot vizsgálata. A következők azonosítására irányul:

1) a CD4 / CD8 sejtek arányának csökkenése (N 2 és >, AIDS esetén - 0,5 ill.<);

2) a CD4 sejtek mennyiségének csökkenése (<200 клеток/мл.);

3) az egyik laboratóriumi tünet jelenléte, beleértve a vérszegénységet, leukopeniát, thrombocytopeniát, limfopéniát;

4) az Ig A és Ig G koncentrációjának növekedése a vérszérumban;

5) a limfociták blastos granulációjának mitogénekre adott válaszának csökkenése;

6) a GTZ bőrreakció hiánya számos antigénre;

7) a keringő immunkomplexek szintjének növekedése.

Előző1234567891011Következő

MUTASS TÖBBET:

HIV elleni antitestek 1/2- a vérplazma fehérje jellegű összetevői, amelyek megakadályozzák a HIV-fertőzés szaporodását és teljesen semlegesítik annak negatív hatását.

Mi az a HIV antitest teszt 1/2 (szűrés)

A HIV 1,2 elleni antitestek szűrőelemzése - olyan tesztrendszer, amely lehetővé teszi az immunhiány-vírussal fertőzött emberek azonosítását. Ezeken kívül léteznek úgynevezett megerősítő (kisegítő) tesztek, amelyek feladata a vírussal nem fertőzött, de a vírusra pozitív reakcióval rendelkező egyének azonosítása a szűrés során.

A HIV-fertőzés szűrővizsgálatának lényege az immunhiányos vírus elleni antitestek meghatározása.

Megkülönböztető jellemzője a fokozott érzékenység - több mint 99,5%. A tesztelés sajátossága, hogy a szűrés álpozitív eredményt adhat, ha a páciens szervezete autoantitesteket tartalmaz.

Májbetegségben, influenza elleni védőoltásban vagy bármilyen akut vírusos betegségben szenvedő betegnél azonos eredmény mutatható ki. Ez alapján a pontos eredmény érdekében a szűréssel együtt általában a fent említett megerősítő vizsgálatot szokás elvégezni.

Az elemzés indikációi

Az orvosi gyakorlatban meglehetősen sokféle indikáció létezik a szűrésre.

A beteg akkor fordulhat a laboratóriumhoz, ha:

  • fertőzés gyanúja (ha szoros kapcsolat volt a HIV-fertőzés hordozójával);
  • fogyással, lázzal;
  • tüdőgyulladás, amely nem alkalmas a hagyományos terápiára;
  • krónikus természetű betegségek, amelyek ismeretlen okból keletkeztek;
  • a műtét előkészítése során;
  • vérátömlesztések;
  • terhesség és családtervezés;
  • Gyulladt nyirokcsomókkal;
  • Alkalmi szex.

Speciális kockázati csoportba tartozó személyek: kábítószer-függők és szokatlan szexuális életet folytatók.

Hogyan történik a HIV antitest szűrés 1/2

Az eljárás magában foglalja számos szükséges szabály betartását:

  • a betegnek kizárólag éhgyomorra kell vért adnia (víz fogyasztása megengedett);
  • legalább nyolc órának el kell telnie az utolsó étkezés óta;
  • az orvost tájékoztatni kell arról, hogy a beteg milyen gyógyszereket szed, és ismernie kell az adagolást (ha nincs lehetőség akár rövid távú visszavonásra);
  • ha a beteg késleltetheti a gyógyszerek alkalmazását, ajánlott ezt 10-15 nappal a manipuláció napja előtt megtenni;
  • A vizsgálat megkezdése előtti napon tanácsos a betegnek megtagadni a sült vagy zsíros ételek fogyasztását, továbbá tilos alkoholos italokat inni, dohányozni és korlátozni a nehéz fizikai aktivitást.

Meg kell jegyezni, hogy az immunhiányos vírust hordozó anyáktól született gyermekek fertőzésének jelenlétére vonatkozó laboratóriumi vizsgálatoknak megvannak a sajátosságai.

Mivel a gyermek életének első hónapjaiban a HIV-ellenes anyai antitestek jelen lehetnek a vérében, az elemzés eredményei alapján lehetetlen objektív képet kapni az újszülött egészségi állapotáról, sőt negatív eredményt is. egyáltalán nem jelenti azt, hogy a vírus nem tudott áthatolni a placenta gáton.

A pontos adatok megszerzése érdekében a vizsgálatot a gyermek születését követő 36 hónapon belül el kell végezni.

Szolgáltatások a "Modern diagnosztika" irányába

Klinikák a "modern diagnosztika" irányába

A HIV-antitestek tesztelésének vagy szűrésének két tág, de nagyon jól meghatározott célja van – az esetek felderítése és a megfigyelés. Az esetek azonosításakor első lépésként minden egyes egyén HIV-státuszát tisztázni kell a megfelelő kezelés vagy a megfelelő intézkedésekkel történő nyomon követés megkezdése érdekében.

Az epidemiológiai felügyelet célja a HIV prevalenciájának, a fertőzöttek megoszlásának és tendenciáinak felmérése egy csoportban vagy egy teljes populációban.

A HIV-ellenanyag-teszt érzékenysége annak mértéke, hogy mennyire képes pontosan kimutatni ezeket az antitesteket a mintában, míg a teszt specifitása azt a képességét méri, hogy mennyire képes pontosan megerősíteni az antitestek hiányát, ha azok nincsenek jelen a mintában.

Ideális esetben a teszt szenzitivitásának és specificitásának el kell érnie a 100%-ot. A gyakorlatban egyetlen biológiai teszt sem felel meg ennek a követelménynek, a HIV elleni antitestek vizsgálata azonban a jelenleg elérhető legérzékenyebb és legspecifikusabb tesztek közé tartozik.

Az AIDS laboratóriumi diagnosztikája az AIDS gyanújában szenvedő betegek anyagának virológiai, szerológiai és immunológiai vizsgálatából áll.

A virológiai vizsgálatok során a vér mononukleáris sejtjeinek primer tenyészetei használhatók a vírus izolálására.

A vírus izolálása és azonosítása módszeresen nehéz, és erre szakosodott laboratóriumokban is elvégezhető. A rutin tömeges vizsgálatoknál jelenleg alkalmazott leghatékonyabb diagnosztikai módszer a humán immundeficiencia vírus elleni antitestek kimutatása. A HIV-ellenes antitestek a fertőzés első hónapjának végén jelenhetnek meg. Számos szerző iktatta, hogy a szerokonverzió kialakulása 4-7 héttől 6 hónapig vagy még tovább tart. Az antitestek jelenléte az AIDS diagnosztikája vagy annak kialakulásának kockázatára utal.

Az antitestek nemcsak az AIDS szerológiai markerei. A betegség preklinikai szakaszában feltárva lehetővé teszik a korai diagnózist. Jelenlétük különös jelentőséggel bír a hordozók kimutatása szempontjából.

Az antitesteket sok éven át, szinte egész életen át kimutatják. A kutatók párhuzamosságot állapítottak meg a vírus és a vele szembeni antitestek kimutatásában, vagyis az immunhiányos vírus elleni antitestek jelenléte nagy valószínűséggel jelzi, hogy egy személy vírushordozó.

Az inkubációs periódusban megjelent HIV antigén elleni antitestek a betegség kialakulásával továbbra is intenzíven termelődnek, mivel az antigén irritációt mind a fertőzött limfocitákból felszabaduló virionok, mind pedig a véráramba kerülő szubvirion komponensek stimulálják a fertőzött limfocitákból. fertőzött sejtekkel és fertőzött limfociták által.

Ugyanakkor a fertőzött sejtek genomjába beépült provírus hozzáférhetetlen marad a specifikus antitestek számára. Ez magyarázza a látszólag paradox tényt: minél több a humán immunhiányos vírus elleni antitest a vérszérumban, annál könnyebb magát a vírust izolálni a betegtől.

Ez azért történik, mert a vírusfertőzésre válaszul termelődő antitestek nem semlegesítenek, ezért nincs észrevehető hatásuk a vírusra, hanem egyszerűen jelen vannak vele együtt a szervezetben. Az AIDS-vírus elleni antitestek (AT) kimutatására számos tesztet fejlesztettek ki, amelyek lehetővé teszik a kutatások elvégzését kellően magas specifitás és érzékenység mellett. Ezek a szilárd fázisú radioimmunoassay, a radioimmunprecipitáció, az immunfluoreszcencia, az enzim immunoassay és az immunblot módszerei.

A gyakorlatban a legszélesebb körben alkalmazható az enzimhez kötött immunszorbens vizsgálat (ELISA), amelyet nagy érzékenység, a reakció eredményeinek kvantitatív és vizuális rögzítésének képessége jellemez, amely a módszert bármilyen szintű laboratórium számára hozzáférhetővé teszi.

Az ELISA külföldi és hazai tesztrendszereket használ.

A HIV-fertőzés és az AIDS klinikai lefolyása

Óvatosan kell eljárni a fertőzött anyától született gyermekeknél. Klinika hiányában a gyermek fertőzöttnek minősül, ha a HIV-fertőzés egy év után is fennáll. Az ELISA pozitív eredményének megérkezésekor háromszor meg kell vizsgálni az egyetlen pozitív eredményt adó szérumot, és meg kell erősíteni a pozitív eredményt független rendszerben - immunblot

Az AT kimutatása az ELISA reakcióban nem ad elegendő információt, mivel nem jelzi az alany állapotát, hanem csak lappangást, betegséget, vagy tünetmentes fertőzés jelenlétét jelzi.

Az immunblot több információval szolgál, mivel az AT jelenléte számos HIV antigénnél egy súlyos betegségre, míg az 1-2 antigénnel való reakció inkább egy enyhe fertőző folyamatra jellemző.

Tájékoztató jellegű a T (segítők) számának és a limfociták T4 és Te (szuppresszorok) arányának kiszámítása, amelyet mono-kponális antitestekkel határoztak meg.

A betegség fontos kritériuma lehet az immunglobulinok számának éles növekedése, különösen az A és V. A vér általános klinikai elemzése során a betegséget lymphopenia, leukopenia, erythropenia, thrombocytopenia, eosinophilia jelezheti.

A járványügyi felügyelethez használt HIV-teszteknek nem kell olyan pontosaknak lenniük, mint a klinikai célokra előírtaknak.

Azonban nagyon alacsony HIV-prevalencia esetén a populációban minden pozitív mintát meg kell ismételni további tesztekkel.

A HIV-ellenes antitestek kimutatására vagy szűrésre történő vérvételhez társulhat az alanyok nevének regisztrálása (névgyűjtés), vagy elvégezhető vezetéknév vagy személyazonosító adatok regisztrációja nélkül (anonim gyűjtés) (1. táblázat).

Az azonosító adatok nélküli anonim szűrést a következő pontok jellemzik: más célra gyűjtött vérmintákat használnak fel; az anonimitás garantált, mivel nem gyűjtenek vagy vesznek figyelembe azonosító adatokat; nem szükséges az alanyok hozzájárulása; nem szükséges kapcsolatba lépni a tanácsadással és a szociális szolgálatokkal; Végül, és ami a legfontosabb, a statisztikai becslések hibái, amelyek a lakosság részvételi szintjétől függenek, minimálisra csökkennek.

Bár pontosabb adatok nyerhetők anonim HIV-teszttel, ennek a módszernek a következő hátrányai vannak: nem tudja kiküszöbölni az esetleges szelekciós torzítást; a magas kockázatú viselkedésre és más fontos változókra vonatkozó adatok nem állnak rendelkezésre, és nem gyűjthetők visszamenőleg; nem lehet kapcsolatot létesíteni HIV-fertőzött személyekkel, hogy tájékoztassák őket állapotukról; A vizsgálat csak olyan személyek csoportjában végezhető, akiknek a vérvétel más célból történik.

Azokon a területeken, ahol a HIV prevalencia nagyon alacsonynak tekinthető, a közegészségügyi felügyeletnek elsősorban a legmagasabb kockázatú magatartást tanúsító egyénekre vagy populációkra kell összpontosítania.

Ebben a kockázati csoportban a HIV-szűréshez szükséges vért a legegyszerűbb szexuális úton terjedő betegségek kezelésére szakosodott központokból vagy hasonló intézményekből szerezni.

Ha az intravénás kábítószer-használat is gyakori, a kábítószer-használóktól erre szakosodott intézményekben vérmintát kell venni.

Általában elegendő 3 vagy 6 havonta egyszeri vérvétel a legveszélyeztetettebb csoportokban azokról a földrajzi területekről, ahol az ilyen csoportok a legelterjedtebbek. Kivételt képezhetnek a kockázati csoportok, például az intravénás droghasználók, akiknél gyakoribb vizsgálatra lehet szükség.

A WHO jelenleg a klinikai kutatások számára fejleszti a betegségosztályozási (staging) rendszert, amely a kezelési vizsgálatok során is alkalmazható, és ennek prediktív értéke is lehet.

Egy ilyen rendszer azonban nem helyettesíti az AIDS jelenlegi, az egészségügyi felügyeletben használt definícióit.

Jelenleg mindenhol a tervezett (rutin) HIV-megfigyelési rendszereket fejlesztik ki.

Ezeket a rendszereket a jelenlegi járványügyi helyzethez kell igazítani; így a vírus nagyon alacsony prevalenciájú populációiban alkalmazott mintavételi módszereknek szükségszerűen el kell térniük azoktól, amelyeket közepes vagy magas prevalencia esetén alkalmaznak.

Az ilyen felügyelet magában foglalja a jól meghatározott és hozzáférhető populációk rutinfelmérését.

Mindenekelőtt azokat a csoportokat kell tartalmaznia, amelyek a leginkább ki vannak téve a fertőzés veszélyének, és mindegyik csoportban állandó, előre meghatározott számú egyedet kell kiválasztani a vizsgálatra.

Az elmúlt években egyre elterjedtebbé vált a megfigyelhető csoportokban végzett anonim szűrés, az azonosító adatok figyelembevétele nélkül, mint a HIV-fertőzés epidemiológiai felügyeletének pontos és költséghatékony módja az egészségügyi ellátórendszerben.

A HIV laboratóriumi diagnózisának módszerei

Magasan specializált laboratóriumban végzik:

a) a vérben keringő antitestek, antigének és immunkomplexek meghatározása; a vírus tenyésztése, genomi anyagának és enzimeinek kimutatása;

b) az immunrendszer sejtes kapcsolatának funkcióinak felmérése.

A főszerep a szerológiai diagnosztikai módszereké, amelyek az antitestek, valamint a kórokozó antigének meghatározását célozzák a vérben és más testnedvekben.

A HIV-ellenes antitestek vizsgálatát a következők érdekében végzik:

a) a vérátömlesztés és -átültetés biztonsága;

b) felügyelet, tesztelés a HIV-fertőzés prevalenciájának nyomon követésére és egy adott populációban előfordulásának dinamikájának tanulmányozására;

c) HIV-fertőzés diagnosztizálása, i.e.

e) A látszólag egészséges emberek vagy a HIV-fertőzéshez vagy AIDS-hez hasonló klinikai tünetekkel rendelkező betegek vérszérumának önkéntes vizsgálata.

A HIV-fertőzés laboratóriumi diagnózisának rendszere három szakaszból áll.

Az első szakasz a szűrés, amelynek célja a HIV-fehérjék elleni antitestek jelenlétének elsődleges vérvizsgálata. A második szakasz referencia - lehetővé teszi speciális módszertani technikák alkalmazását a szűrési szakaszban kapott elsődleges pozitív eredmény tisztázására (megerősítésére). A harmadik szakasz - szakértő - a laboratóriumi diagnosztika korábbi szakaszaiban azonosított HIV-fertőzési markerek jelenlétének és specifitásának végső ellenőrzésére szolgál.

A laboratóriumi diagnosztika több szakaszának szükségessége elsősorban gazdasági megfontolásokból adódik.

A gyakorlatban számos tesztet alkalmaznak a HIV-fertőzöttek kellő biztonsággal történő azonosítására:

Az első szint kimutatására szolgáló ELISA (ELISA) teszt (enzimhez kötött immunszorbens vizsgálat) nagy érzékenységgel jellemezhető, bár az alábbiaknál kisebb specifitás;

Immunblot (Western-blot), egy nagyon specifikus és leggyakrabban használt teszt a HIV-1 és a HIV-2 megkülönböztetésére;

Antigenemia p25-teszt, hatékony a fertőzés kezdeti szakaszában;

Polimeráz láncreakció (PCR).

A vérminták tömeges szűrése esetén ajánlatos alanyok csoportjából származó szérumkeverékeket úgy összeállítani, hogy az egyes minták végső hígítása ne haladja meg az 1:100 arányt.

Ha a szérumkeverék pozitív, a pozitív keverék minden szérumát tesztelik. Ez a módszer nem vezet az érzékenység elvesztéséhez sem ELISA, sem immunoblot esetén, de 60-80%-kal csökkenti a munkaerőköltséget és a kezdeti vizsgálat költségeit.

Immunológiai módszerek

a T segítők száma,

2. T4 és T8 aránya,

3. túlérzékenységi állapot,

4. a T-sejtrendszer kompenzációs funkciója.

Az immunglobulinok túltermelésében nyilvánul meg, alacsony affinitásúak, és a szervezet anyaga még többet fogyaszt.

Hátrányok: későn jelennek meg, egyes immunológiai mutatók más fertőzésekkel járhatnak.

Klinikai módszerek – talán. más betegségekhez hasonlóan a legjellemzőbb megnyilvánulásokat a későbbi szakaszokban rögzítik, így a klinikai diagnózis nem túl hatékony

A fő módszert - szerológiai - 2 szakaszban hajtják végre:

1 - szűrővizsgálat - mintavétel az immunanalízis összes fehérjével szembeni összes antitestre.

Ez a szakasz 95%-ban igaz és 5%-ban hamis pozitív eredményt ad.

2 - megerősítő módszer - minden mintát megerősítő módszerrel vizsgálnak. Ez a technika lehetővé teszi a vírusfehérje elleni antitestek kimutatását.

Pozitív eredmény, ha legalább 3 vírusfehérje ellen kimutatható antitest, ha 1 vagy 2 esetében az eredmény kétséges és további vizsgálatot igényel.

A HIV-fertőzés elsődleges szerodiagnózisában a teljes antitesteket szűrő-szűrővizsgálatokkal – ELISA-val és agglutinációs reakciókkal – határozzák meg.

A második (arbitrációs) szakaszban összetettebb tesztet alkalmaznak - immunblotot, amely nemcsak a kezdeti következtetés megerősítését vagy elutasítását teszi lehetővé, hanem a vírus egyes fehérjéivel szembeni antitestek meghatározásának szintjén is.

A HIV antitest teszt eredményeinek értelmezése

A HIV-ellenes antitestek elemzésének eredményét kellően sok különböző tényező befolyásolja, és ezek közül is fontos az elemzés időpontja az esetleges fertőzés után.

A legtöbb esetben a HIV-antitestek a fertőzés után 6-12 héttel kimutathatók.

Ezt az időszakot a vírusnak a szervezetbe jutásától a kimutatható mennyiségű antitest megjelenéséig a pozitív szerokonverzió időszakának vagy „ablak” periódusnak nevezzük. Ritkán előfordulnak olyan esetek, amikor az antitestek a fertőzés után 6 hónappal jelennek meg, és az antitestek kimutatásának csak 1 év elteltével történő kimutatásáról nincs bizonyíték. Jelenleg a diagnosztikai szolgálat az ELISA módszerek új generációit alkalmazza, amelyek lehetővé teszik a HIV-ellenes antitestek kimutatását a fertőzés után 3-4 héttel, és ezeknek a módszereknek bizonyos kombinációi, az úgynevezett tesztelési stratégiák 2-3 hétre csökkentik az „ablak” időszakot. azaz .

lehetővé teszik a HIV elleni antitestek kimutatását, amint azok termelődni kezdenek a szervezetben.

A negatív eredmény azt jelenti, hogy az alany vérében nem találtak HIV-ellenes antitesteket.

Ezt az állapotot szeronegativitásnak nevezik, és általában azt jelenti, hogy a személy nem fertőzött.

A negatív eredmény nem ad garanciát a jövőre nézve. Csak a vizsgálatkori állapotot közli. Kis esély van arra, hogy a felmérés az ablak időszakában készült. Ezért, ha egy személy korábban fennállt a HIV-fertőzés kockázatának, és a teszt negatív lett, legalább 6 hónappal a kockázati esemény után újra meg kell vizsgálni.

A pozitív eredmény azt jelenti, hogy az alany vérében HIV-ellenes antitesteket találtak.

Ezt az állapotot szeropozitivitásnak nevezik – egy személy HIV-fertőzött. Fontos megérteni, hogy a pozitív eredmény csak HIV-fertőzést jelez, és nem AIDS-et.

Rendkívül fontos azonban az orvoshoz fordulni tanácsért, szükség esetén orvosi segítségért, hogy a pozitív eredményt követően hosszú ideig megőrizzük a jó életminőséget.

Határozatlan eredmény. Ritkán a HIV-ellenanyag-teszt eredménye nem egyértelmű.

A laboratórium nem tudja megmondani, hogy a személy szeropozitív vagy szeronegatív. Ilyen körülmények között orvoshoz kell fordulni, és ismételten vizsgálatot kell végezni.

A HIV-fertőzés diagnózisa laboratóriumban a vírus elleni specifikus antitestek kimutatásával állapítható meg. Sok más vírusos betegségben az antitestek jelenléte múltbeli fertőzést jelez. Mivel azonban a HIV-fertőzés krónikus fertőzéssé fejlődik, a szeropozitív egyének nemcsak aktívan fertőződnek, hanem fertőzőek is.

A HIV elleni antitestek jelenlétének kimutatására szolgáló szerológiai teszt 1985-ben vált széles körben elérhetővé. A leggyakrabban használt módszer az enzim-linked immunosorbent assay (ELISA), de más típusú antitesttesztek fejlesztése is folyamatban van, mint például a részecskeagglutináció és a "pont". ELISA. A tesztek gyorsan és egyszerűen elvégezhetők, és nem igényelnek bonyolult berendezéseket.

Bár a fenti tesztek nagyon érzékenyek, hamis eredményeket adhatnak, és a pozitív eredményt további teszttel kell megerősíteni, például Western blot vagy indirekt immunfluoreszcenciával.

Lehetőség van a HIV antigének (vírus vagy vírusfehérje) közvetlen meghatározására is a spermában; az ipar előállítja a szükséges reagenskészleteket. Ezeket a vizsgálatokat eredetileg úgy tervezték, hogy kísérletet tegyenek a fertőzés jelenlétének laboratóriumi jelzésére a fertőzés és az antitesttermelés közötti "ablak" során, amely általában 4-16 hétig tart. Az antigénvizsgálatokat manapság egyre szélesebb körben alkalmazzák AIDS-betegek vírusellenes kezelésének eredményének nyomon követésére.

A HIV-fertőzés szűrőprogramjai (azaz a teljes populáció vagy bizonyos alpopulációk szűrése a fertőzés vagy betegség meghatározására) segíthetnek:

  • megakadályozzák a vírus véren és vérkészítményeken, spermán, szöveteken vagy transzplantációs szerveken keresztül történő átvitelét;
  • epidemiológiai információkat szerezzen a HIV prevalenciájáról és incidenciájáról.

Amikor egy szűrési programot megvitatnak, a WHO nyilatkozatában (4. melléklet) szereplő összes kérdést egyértelműen meg kell fogalmazni és meg kell válaszolni. A rosszul megtervezett és rosszul végrehajtott programok károsíthatják a közegészséget és pazarolhatják az erőforrásokat. A közegészségügyi szükségleteket és az emberi jogokat leginkább a technológiai, logisztikai, valamint társadalmi, jogi és etikai kérdések alapos mérlegelése szolgálja, mielőtt döntés születik a szűrési program folytatásáról.

A kötelező HIV-szűrésnek nagyon korlátozott szerepe van az AIDS-megelőzési és -ellenőrzési programokban.

A donorok rutinszerű szűrése segít megelőzni a HIV véren, spermán vagy más sejteken, szöveteken és szerveken keresztül történő átvitelét. Az ilyen átvilágítás része az egyén tájékozott hozzájárulása és a konzultációk, amelyeket bizalmasan kell kezelni.

A szeropozitív egyének felméréssel történő azonosítása lehetővé teszi a HIV epidemiológiai típusának meghatározását, ami szükséges a speciális oktatási programokra vagy egyéb megelőző szolgáltatásokra szoruló területek és populációk felméréséhez. Ezeket a felméréseket olyan módszerekkel kell elvégezni, amelyek nem veszélyeztetik az emberi jogok tiszteletben tartását. Ezeket a konzultáció során vagy tájékozott személy hozzájárulásával, a titoktartás tiszteletben tartása mellett, vagy anonim módon, szabadon (más személyazonosításra alkalmas adat rögzítése nélkül) kell elvégezni.

Az önkéntes AIDS-teszt része lehet a HIV-vel kapcsolatos feltételezett betegségek egészségügyi ellátásának, és integrálható információs, oktatási, tanácsadási és egyéb támogató szolgáltatásokkal a fenntartható viselkedésmódosítás előmozdítása érdekében. Az önkéntes HIV-szűrés során nagyon fontos a tájékozott egyén beleegyezése, és a titoktartás megőrzése mellett a tanácsadás lehetősége. Az önkéntes HIV-tesztelési szolgáltatásokat széles körben elérhetővé kell tenni az AIDS-megelőzési és -ellenőrzési programok részeként, és meg kell könnyíteni az ilyen szolgáltatásokhoz való hozzáférést.



nézetek

Mentés az Odnoklassnikibe Mentés a VKontakte-ba