Η τυπική μέθοδος προσυμπτωματικού ελέγχου για τη διάγνωση της λοίμωξης HIV είναι. Δοκιμές για HIV λοίμωξη: χαρακτηριστικά της διαδικασίας και ερμηνεία των αποτελεσμάτων

Η τυπική μέθοδος προσυμπτωματικού ελέγχου για τη διάγνωση της λοίμωξης HIV είναι. Δοκιμές για HIV λοίμωξη: χαρακτηριστικά της διαδικασίας και ερμηνεία των αποτελεσμάτων

Η έγκαιρη ανίχνευση της λοίμωξης HIV σάς επιτρέπει να ελέγξετε τον πολλαπλασιασμό του ιού στο αίμα και να αποτρέψετε την ανάπτυξη του AIDS. Μια τυπική εξέταση ELISA ανιχνεύει αντισώματα στο πλάσμα αίματος ενός άρρωστου ατόμου, τα οποία το ανοσοποιητικό σύστημα αρχίζει να παράγει ενάμιση έως τρεις μήνες μετά τη μόλυνση (η εμφάνισή τους συχνά συνοδεύεται από συμπτώματα χαρακτηριστικά της γρίπης - πυρετός και γενική κακουχία). Η PCR μπορεί να ανιχνεύσει τον HIV ήδη 2-3 εβδομάδες μετά τη μόλυνση.

Με σκοπό την έγκαιρη διάγνωση αυτής της χρόνιας ιογενής λοίμωξηΔιενεργούνται προληπτικές (μαζικές) εξετάσεις πληθυσμιακών ομάδων με αυξημένο κίνδυνο μόλυνσης από τον ιό HIV (για παράδειγμα, άτομα που κάνουν χρήση ναρκωτικών).

Μια τέτοια ανάλυση μπορεί να συνταγογραφηθεί από οποιονδήποτε γιατρό εάν υποψιάζεται τον ασθενή ή θεωρεί απαραίτητο να αποκλειστεί η μόλυνση από τον ιό HIV. Οποιοσδήποτε μπορεί να κάνει το τυπικό τεστ. από μόνοι τουςκαι δωρεάν, ακόμη και ανώνυμα, στα κέντρα πρόληψης του AIDS και στα παραρτήματά τους (σημεία). Το αποτέλεσμα μιας τέτοιας ανάλυσης είναι ιατρικό μυστικό· παρέχεται στον ασθενή μόνο αυτοπροσώπως.

Βασικές ενδείξεις

  • μετά από οποιαδήποτε σεξουαλική επαφή χωρίς προστασία με έναν νέο, περιστασιακό, άγνωστο σύντροφο.
  • μετά τον βιασμό?
  • εάν διαπιστώθηκε ότι ο σεξουαλικός σύντροφος (πρώην, νυν) έχει μολυνθεί από τον ιό HIV.
  • εάν ο σύντροφος βρισκόταν σε κατάσταση με υψηλό κίνδυνο μόλυνσης.
  • εάν η εισαγωγή ναρκωτικών ουσιών δεν πραγματοποιήθηκε με μεμονωμένες σύριγγες και βελόνες·
  • μετά από τατουάζ και τρύπημα με βελόνες κοινές σε μια ομάδα ανθρώπων.
  • μετά τη χρήση μη αποστειρωμένων βελόνων και ιατρικών εργαλείων.
  • μετά από έκθεση σε οροθετικό αίμα.
  • εάν διαγνωστεί ΣΜΝ.

Πρέπει επίσης να το κάνετε αυτό εάν παρατηρήσετε:

  • απότομη απώλεια βάρους χωρίς αντικειμενικό λόγο.
  • ανεξήγητη χρόνια διάρροια.
  • σύνδρομο χρόνιας κόπωσης;
  • συχνάζω κρυολογήματα;
  • νυχτερινές εφιδρώσεις;
  • αύξηση σε πολλές ομάδες λεμφαδένων.
  • συχνή συχνότητα ιογενών λοιμώξεων.

Πώς να προετοιμαστείτε για τη μελέτη

Η αιμοληψία από μια φλέβα πραγματοποιείται με άδειο στομάχι, επομένως, δεν συνιστάται να τρώτε για 8 ώρες πριν από την ανάλυση.

Χαρακτηριστικά ανάλυσης

Η παρουσία του ιού στο πλάσμα του αίματος επιβεβαιώνεται με τρεις εξετάσεις - ELISA, ανοσοστύπωμα, PCR.

Μια ενζυμική ανοσοπροσροφητική δοκιμασία (ELISA) ανιχνεύει πρωτεϊνικά αντισώματα έναντι του ιού, τα οποία αρχίζουν να κυκλοφορούν στο πλάσμα του αίματος 3-6 μήνες μετά την εμφάνισή του στον οργανισμό. Η ELISA είναι μια αρκετά ευαίσθητη μέθοδος, η ακρίβεια της οποίας φτάνει το 99%.

Το αποτέλεσμα αυτού του τεστ μπορεί να είναι θετικό, αρνητικό ή αμφισβητήσιμο. Εάν το αποτέλεσμα είναι οροαρνητικό με υψηλό κίνδυνο μόλυνσης ή αμφισβητήσιμο χωρίς τέτοιο κίνδυνο, τότε συνταγογραφούνται άλλα τεστ HIV. Μερικές φορές η ELISA εμφανίζει ψευδώς θετικό αποτέλεσμα σε μολυσματικές, ογκολογικές ή αυτοάνοσες ασθένειες, γεγονός που απαιτεί επίσης το διορισμό άλλων εξετάσεων.

Ανοσοκηλίδωση- Αυτή είναι επίσης μια εξέταση για την παρουσία αντισωμάτων στο πλάσμα του αίματος, αλλά πιο ευαίσθητη. Ένα οροθετικό τεστ επαληθεύει τη μόλυνση από τον ιό HIV. Το αμφίβολο τεστ επαναλαμβάνεται μετά από 4-6 εβδομάδες. Εάν το αποτέλεσμα δεν έχει αλλάξει, τότε αιμοδοτείται άλλες δύο φορές - κάθε 3 μήνες ή γίνεται άλλη εξέταση.

Η αλυσιδωτή αντίδραση πολυμεράσης (PCR) αναγνωρίζει το DNA του ιού στο πλάσμα του αίματος 2-3 εβδομάδες μετά την είσοδό του στην κυκλοφορία του αίματος.

Ωστόσο, το κόστος αυτής της εξέτασης και η πιθανότητα ψευδώς θετικών υποδηλώνει τη χρήση της μόνο όταν τα αποτελέσματα δύο προηγούμενων (τυποποιημένων) μελετών δεν παρέχουν ευκαιρία για τη διάγνωση ή τον αποκλεισμό της λοίμωξης από τον ιό HIV.

Εάν έχετε σοβαρή υποψία μόλυνσης από τον ιό HIV, είναι καλύτερο να επικοινωνήσετε με ένα κέντρο πρόληψης του AIDS, όπου, υπό την καθοδήγηση ενός γιατρού, περάστε όλες τις απαραίτητες εξετάσεις και λάβετε ένα αξιόπιστο αποτέλεσμα.

και

Αντισώματα κατά του HIV 1/2- συστατικά του πλάσματος του αίματος, πρωτεϊνική φύση, που εμποδίζουν τον πολλαπλασιασμό της λοίμωξης HIV και εξουδετερώνουν πλήρως την αρνητική τους επίδραση.

Τι είναι το τεστ αντισωμάτων HIV 1/2 (προληπτικός έλεγχος)

Το τεστ διαλογής για αντισώματα κατά του HIV 1,2 είναι ένα σύστημα δοκιμών που μπορεί να εντοπίσει άτομα που έχουν μολυνθεί από τον ιό της ανοσοανεπάρκειας. Εκτός από αυτά, υπάρχουν τα λεγόμενα επιβεβαιωτικά (βοηθητικά) τεστ, το έργο των οποίων είναι ο εντοπισμός ατόμων που δεν έχουν μολυνθεί από τον ιό, αλλά με θετική αντίδραση στον ιό κατά τη διάρκεια του προσυμπτωματικού ελέγχου.

Η ουσία της μελέτης προσυμπτωματικού ελέγχου της λοίμωξης HIV είναι ο προσδιορισμός των αντισωμάτων στον ιό της ανοσοανεπάρκειας. Το χαρακτηριστικό του χαρακτηριστικό είναι η αυξημένη ευαισθησία - περισσότερο από 99,5%. Η ιδιαιτερότητα της εξέτασης είναι ότι ο προσυμπτωματικός έλεγχος μπορεί να δώσει ένα ψευδώς θετικό αποτέλεσμα εάν το σώμα του ασθενούς περιέχει αυτοαντισώματα.

Ένα πανομοιότυπο αποτέλεσμα μπορεί να ανιχνευθεί στην περίπτωση ηπατικής νόσου στον ασθενή, του εμβολιασμού κατά της γρίπης ή της παρουσίας οποιουδήποτε οξέος ιογενής νόσος... Με βάση αυτό, για να ληφθούν ακριβή αποτελέσματα, μαζί με τον έλεγχο, είναι συνήθως σύνηθες να γίνεται το προαναφερθέν τεστ επιβεβαίωσης.

Ενδείξεις για ανάλυση

Στην ιατρική πρακτική, υπάρχει ένα αρκετά ευρύ φάσμα ενδείξεων για προσυμπτωματικό έλεγχο. Ο ασθενής μπορεί να επικοινωνήσει σε περίπτωση:

  • υποψία λοίμωξης (εάν υπήρξε στενή επαφή με φορέα μόλυνσης από τον ιό HIV).
  • με απώλεια βάρους, πυρετό?
  • πνευμονία που δεν ανταποκρίνεται στη συμβατική θεραπεία.
  • ασθένειες χρόνιας φύσης που έχουν προκύψει για άγνωστους λόγους.
  • στη διαδικασία προετοιμασίας για χειρουργική επέμβαση.
  • μετάγγιση αίματος;
  • προγραμματισμός εγκυμοσύνης και οικογένειας.
  • Με φλεγμονώδεις λεμφαδένες.
  • Περιστασιακή σεξουαλική επαφή.

Άτομα που διατρέχουν ειδικό κίνδυνο: τοξικομανείς και άτομα με ακατάλληλη σεξουαλική ζωή.

Πώς γίνεται ο προσυμπτωματικός έλεγχος αντισωμάτων HIV 1/2;

Η διαδικασία συνεπάγεται συμμόρφωση με ορισμένους απαραίτητους κανόνες:

  • ο ασθενής πρέπει να δίνει αίμα αποκλειστικά με άδειο στομάχι (επιτρέπεται το πόσιμο νερό).
  • από τη στιγμή του τελευταίου γεύματος, πρέπει να περάσουν τουλάχιστον οκτώ ώρες.
  • ο γιατρός θα πρέπει να ενημερώνεται για τα φάρμακα που παίρνει ο ασθενής και να γνωρίζει τη δοσολογία (εάν δεν υπάρχει δυνατότητα έστω και βραχυπρόθεσμης απόσυρσης).
  • εάν ο ασθενής μπορεί να καθυστερήσει τη χρήση φάρμακα, συνιστάται να το κάνει αυτό 10-15 ημέρες πριν από την ημέρα της χειραγώγησης.
  • την ημέρα πριν από την έναρξη της εξέτασης, συνιστάται ο ασθενής να αρνηθεί να πάρει τηγανητά ή λιπαρά τρόφιμα, επίσης απαγορεύεται να πίνει αλκοολούχα ποτά, να καπνίζει και να περιορίζει τη βαριά σωματική δραστηριότητα.

Πρέπει να σημειωθεί ότι οι εργαστηριακές εξετάσεις για την παρουσία λοίμωξης σε παιδιά που γεννήθηκαν από μητέρες που είναι φορείς του ιού της ανοσοανεπάρκειας έχουν τις δικές τους ιδιαιτερότητες.

Η έγκαιρη διάγνωση της HIV λοίμωξης γίνεται ένα εξαιρετικά σημαντικό μέτρο, καθώς η έγκαιρη έναρξη της θεραπείας μπορεί σε μεγάλο βαθμό να προκαθορίσει την περαιτέρω εξέλιξη της νόσου και να παρατείνει τη ζωή του ασθενούς. Τα τελευταία χρόνια, έχει σημειωθεί σημαντική πρόοδος στην ανίχνευση αυτής της τρομερής ασθένειας: τα παλιά συστήματα δοκιμών αντικαθίστανται από πιο προηγμένα, οι μέθοδοι εξέτασης γίνονται πιο προσιτές και η ακρίβειά τους αυξάνεται σημαντικά.

Σε αυτό το άρθρο, θα μιλήσουμε για σύγχρονες μεθόδουςδιαγνωστικά της HIV λοίμωξης, η οποία είναι χρήσιμη για την έγκαιρη αντιμετώπιση αυτού του προβλήματος και τη διατήρηση της φυσιολογικής ποιότητας ζωής του ασθενούς.

Διαγνωστικές τεχνικές HIV

Στη Ρωσία, για τη διάγνωση της λοίμωξης HIV, πραγματοποιείται μια τυπική διαδικασία, η οποία περιλαμβάνει δύο επίπεδα:

  • Σύστημα δοκιμής ELISA (ανάλυση διαλογής).
  • ανοσοστύπωμα (IB).

Επίσης, άλλες μέθοδοι μπορούν να χρησιμοποιηθούν για διαγνωστικά:

  • εξπρές τεστ.

Συστήματα δοκιμών ELISA

Στο πρώτο στάδιο της διάγνωσης, χρησιμοποιείται ένα τεστ προσυμπτωματικού ελέγχου (ELISA) για την ανίχνευση μόλυνσης από τον ιό HIV, το οποίο βασίζεται σε πρωτεΐνες HIV που δημιουργούνται σε εργαστήρια και παγιδεύουν συγκεκριμένα αντισώματα που παράγονται στο σώμα ως απόκριση στη μόλυνση. Μετά την αλληλεπίδρασή τους με αντιδραστήρια (ένζυμα) του συστήματος δοκιμής, το χρώμα του δείκτη αλλάζει. Περαιτέρω, αυτές οι αλλαγές χρώματος υποβάλλονται σε επεξεργασία σε ειδικό εξοπλισμό, ο οποίος καθορίζει το αποτέλεσμα της ανάλυσης που εκτελείται.

Τέτοιες δοκιμές ELISA είναι ικανές να δείξουν αποτελέσματα εντός λίγων εβδομάδων μετά την εισαγωγή της λοίμωξης HIV. Αυτή η ανάλυση δεν ανιχνεύει την παρουσία ενός ιού, αλλά ανιχνεύει την παραγωγή αντισωμάτων σε αυτόν. Μερικές φορές, στο ανθρώπινο σώμα, η παραγωγή αντισωμάτων κατά του HIV ξεκινά μετά από 2 εβδομάδες μετά τη μόλυνση, αλλά στους περισσότερους ανθρώπους αναπτύσσονται αργότερα, μετά από 3-6 εβδομάδες.

Υπάρχουν τέσσερις γενιές δοκιμών ELISA με διαφορετική ευαισθησία. Τα τελευταία χρόνια χρησιμοποιούνται συχνότερα δοκιμαστικά συστήματα της γενιάς III και IV, τα οποία δημιουργούνται με βάση συνθετικά πεπτίδια ή ανασυνδυασμένες πρωτεΐνες και έχουν μεγαλύτερη ειδικότητα και ακρίβεια. Μπορούν να χρησιμοποιηθούν για τη διάγνωση της λοίμωξης από τον ιό HIV, την παρακολούθηση του επιπολασμού του HIV και τη διασφάλιση της ασφάλειας κατά τον προσυμπτωματικό έλεγχο του δωρεά αίματος. Η ακρίβεια των συστημάτων δοκιμών ELISA της γενιάς III και IV είναι 93-99% (τα πιο ευαίσθητα τεστ που παράγονται στις χώρες Δυτική Ευρώπη – 99%).

Για τη διενέργεια της εξέτασης ELISA λαμβάνονται 5 ml αίματος από τη φλέβα του ασθενούς. Θα πρέπει να περάσουν τουλάχιστον 8 ώρες μεταξύ του τελευταίου γεύματος και της εξέτασης (συνήθως γίνεται το πρωί με άδειο στομάχι). Συνιστάται να κάνετε μια τέτοια εξέταση όχι νωρίτερα από 3 εβδομάδες μετά την υποτιθέμενη μόλυνση (για παράδειγμα, μετά από απροστάτευτη επαφή με νέο σεξουαλικό σύντροφο).

Τα αποτελέσματα της δοκιμής ELISA λαμβάνονται σε 2-10 ημέρες:

  • αρνητικό αποτέλεσμα: υποδηλώνει την απουσία μόλυνσης από τον ιό HIV και δεν απαιτεί παραπομπή σε ειδικό.
  • ψευδώς αρνητικό αποτέλεσμα: μπορεί να παρατηρηθεί στις πρώιμες ημερομηνίεςλοίμωξη (έως 3 εβδομάδες), στα τελευταία στάδια του AIDS με έντονη καταστολή της ανοσίας και με ακατάλληλη εκτέλεση προετοιμασίας αίματος.
  • ψευδώς θετικό αποτέλεσμα: μπορεί να παρατηρηθεί με ορισμένες ασθένειες και με ακατάλληλη προετοιμασία αίματος.
  • θετικό αποτέλεσμα: υποδηλώνει μόλυνση HIV λοίμωξη, απαιτεί ΙΒ και παραπομπή του ασθενούς σε ειδικό στο κέντρο του AIDS.

Γιατί ένα τεστ ELISA μπορεί να δώσει ψευδώς θετικά αποτελέσματα;

Τα ψευδώς θετικά αποτελέσματα μιας δοκιμής ELISA για HIV μπορούν να παρατηρηθούν με ακατάλληλη επεξεργασία του αίματος ή σε ασθενείς με τις ακόλουθες καταστάσεις και ασθένειες:

  • πολλαπλό μυέλωμα?
  • μολυσματικές ασθένειες που προκαλούνται από τον ιό Epstein-Barr.
  • κατάσταση μετά?
  • αυτοάνοσο νόσημα;
  • στο πλαίσιο της εγκυμοσύνης?
  • κατάσταση μετά τον εμβολιασμό.

Για τους λόγους που περιγράφονται παραπάνω, μπορεί να υπάρχουν στο αίμα μη ειδικά αντισώματα διασταυρούμενης αντίδρασης, η παραγωγή των οποίων δεν προκλήθηκε από μόλυνση από τον ιό HIV.

Τα τελευταία χρόνια, η συχνότητα των ψευδώς θετικών αποτελεσμάτων έχει μειωθεί σημαντικά λόγω της χρήσης συστημάτων δοκιμής της γενιάς III και IV, τα οποία περιέχουν πιο ευαίσθητα πεπτίδια και ανασυνδυασμένες πρωτεΐνες (συντίθενται με γενετική μηχανική in vitro). Μετά την έναρξη της χρήσης τέτοιων δοκιμών ELISA, η συχνότητα των ψευδώς θετικών αποτελεσμάτων έχει μειωθεί σημαντικά και είναι περίπου 0,02-0,5%.

Η εύρεση ψευδούς θετικού δεν σημαίνει ότι ένα άτομο έχει μολυνθεί από τον ιό HIV. Σε τέτοιες περιπτώσεις, ο ΠΟΥ συνιστά άλλη εξέταση ELISA (υποχρεωτική IV γενιά).

Το αίμα του ασθενούς αποστέλλεται σε εργαστήριο αναφοράς ή διαιτησίας με την ένδειξη "repeat" και ελέγχεται σε σύστημα δοκιμών ELISA IV γενιάς. Εάν το αποτέλεσμα της νέας ανάλυσης είναι αρνητικό, τότε το πρώτο αποτέλεσμα αναγνωρίζεται ως λανθασμένο (ψευδώς θετικό) και το IB δεν πραγματοποιείται. Σε περίπτωση θετικού ή αμφίβολου αποτελέσματος κατά τη δεύτερη εξέταση, ο ασθενής πρέπει να λάβει IB σε 4-6 εβδομάδες για να επιβεβαιώσει ή να αρνηθεί τη μόλυνση από τον HIV.

Immune blotting

Η οριστική διάγνωση της λοίμωξης HIV μπορεί να γίνει μόνο αφού ληφθεί ένα θετικό αποτέλεσμα ανοσοστύπωσης (IB). Για την εφαρμογή του, χρησιμοποιείται μια λωρίδα νιτροκυτταρίνης, στην οποία εφαρμόζονται ιικές πρωτεΐνες.

Η αιμοληψία για IB πραγματοποιείται από φλέβα. Στη συνέχεια υφίσταται ειδική επεξεργασία και οι πρωτεΐνες που περιέχονται στον ορό του διαχωρίζονται σε ειδικό τζελ ανάλογα με το φορτίο και το μοριακό τους βάρος (ο χειρισμός γίνεται σε ειδικό εξοπλισμό υπό την επίδραση ηλεκτρικού πεδίου). Μια λωρίδα νιτροκυτταρίνης εφαρμόζεται στο πήκτωμα ορού αίματος και η στύπωση ("blotting") πραγματοποιείται σε ειδικό θάλαμο. Η λωρίδα υποβάλλεται σε επεξεργασία και εάν τα υλικά που χρησιμοποιούνται περιέχουν αντισώματα κατά του HIV, τότε συνδέονται με αντιγονικές ζώνες στο IB και εμφανίζονται ως γραμμές.

Το IB θεωρείται θετικό εάν:

  • σύμφωνα με τα αμερικανικά κριτήρια CDC - υπάρχουν δύο ή τρεις γραμμές gp41, p24, gp120 / gp160 στην ταινία.
  • σύμφωνα με τα κριτήρια του αμερικανικού FDA - στη λωρίδα υπάρχουν δύο γραμμές p24, p31 και μια γραμμή gp41 ή gp120 / gp160.

Στο 99,9% των περιπτώσεων, ένα θετικό αποτέλεσμα ΙΒ υποδηλώνει μόλυνση από τον ιό HIV.

Ελλείψει γραμμών, το IB είναι αρνητικό.

Η αναγνώριση γραμμών με gp160, gp120 και gp41- IB είναι αμφίβολη. Ένα τέτοιο αποτέλεσμα μπορεί να ανιχνευθεί όταν:

  • ογκολογικές ασθένειες?
  • εγκυμοσύνη;
  • συχνές μεταγγίσεις αίματος.

Σε τέτοιες περιπτώσεις, συνιστάται η επανεξέταση χρησιμοποιώντας κιτ άλλης εταιρείας. Εάν, μετά από επιπλέον IB, το αποτέλεσμα παραμένει αμφίβολο, τότε η παρατήρηση είναι απαραίτητη για έξι μήνες (το IB πραγματοποιείται κάθε 3 μήνες).

Αλυσιδωτή αντίδραση πολυμεράσης

Μια εξέταση PCR μπορεί να ανιχνεύσει το RNA του ιού. Η ευαισθησία του είναι αρκετά υψηλή και σας επιτρέπει να ανιχνεύσετε τη μόλυνση από τον ιό HIV ήδη 10 ημέρες μετά τη μόλυνση. Σε ορισμένες περιπτώσεις, η PCR μπορεί να δώσει ψευδώς θετικά αποτελέσματα, καθώς η υψηλή ευαισθησία της μπορεί επίσης να αντιδράσει σε αντισώματα σε άλλες λοιμώξεις.

Αυτή η διαγνωστική τεχνική είναι δαπανηρή και απαιτεί ειδικό εξοπλισμό και υψηλά καταρτισμένους ειδικούς. Αυτοί οι λόγοι δεν καθιστούν δυνατή τη διεξαγωγή του κατά τη διάρκεια μαζικών δοκιμών του πληθυσμού.

Η PCR χρησιμοποιείται σε τέτοιες περιπτώσεις:

  • για την ανίχνευση του HIV σε νεογέννητα που γεννήθηκαν από μητέρες μολυσμένες με HIV·
  • για την ανίχνευση του HIV κατά την "περίοδο του παραθύρου" ή σε περίπτωση αμφίβολου IB.
  • για τον έλεγχο της συγκέντρωσης του HIV στο αίμα.
  • για τη μελέτη αίματος δότη.

Μόνο με το τεστ PCR, ο HIV δεν διαγιγνώσκεται, αλλά πραγματοποιείται ως πρόσθετη διαγνωστική μέθοδος για την επίλυση αμφιλεγόμενων καταστάσεων.


Μέθοδοι εξπρές

Μία από τις καινοτομίες στη διάγνωση του HIV είναι τα γρήγορα τεστ, τα αποτελέσματα των οποίων μπορούν να αξιολογηθούν μέσα σε 10-15 λεπτά. Τα πιο αποτελεσματικά και ακριβή αποτελέσματα λαμβάνονται με ανοσοχρωματογραφικές δοκιμές που βασίζονται στην αρχή της τριχοειδούς ροής. Είναι ειδικές ταινίες στις οποίες εφαρμόζεται αίμα ή άλλα διερευνημένα υγρά (σάλιο, ούρα). Με την παρουσία αντισωμάτων κατά του HIV, μετά από 10-15 λεπτά, εμφανίζεται μια έγχρωμη λωρίδα στο τεστ και μια ταινία ελέγχου - ένα θετικό αποτέλεσμα. Εάν το αποτέλεσμα είναι αρνητικό, εμφανίζεται μόνο η ταινία ελέγχου.

Όπως και μετά τις δοκιμές ELISA, τα αποτελέσματα των ταχέων δοκιμών πρέπει να επιβεβαιώνονται με ανάλυση IB. Μόνο τότε μπορεί να γίνει διάγνωση μόλυνσης από τον ιό HIV.

Υπάρχουν κιτ express για οικιακές δοκιμές. Το τεστ OraSure Technologies1 (ΗΠΑ) είναι εγκεκριμένο από τον FDA, πωλείται χωρίς ιατρική συνταγή και μπορεί να χρησιμοποιηθεί για την ανίχνευση του HIV. Μετά την εξέταση, σε περίπτωση θετικού αποτελέσματος, συνιστάται στον ασθενή να υποβληθεί σε εξέταση σε εξειδικευμένο κέντρο για επιβεβαίωση της διάγνωσης.

Οι υπόλοιπες δοκιμές για οικιακή χρήση δεν έχουν ακόμη εγκριθεί από τον FDA και μπορεί να είναι πολύ αμφισβητήσιμες.

Παρά το γεγονός ότι οι γρήγορες δοκιμές είναι κατώτερες σε ακρίβεια από τις δοκιμές ELISA IV γενιάς, χρησιμοποιούνται ευρέως για πρόσθετες δοκιμές του πληθυσμού.

Μπορείτε να κάνετε εξετάσεις για την ανίχνευση μόλυνσης από τον ιό HIV σε οποιαδήποτε κλινική, κεντρικό περιφερειακό νοσοκομείο ή σε εξειδικευμένα κέντρα AIDS. Στο έδαφος της Ρωσίας, τηρούνται απολύτως εμπιστευτικά ή ανώνυμα. Κάθε ασθενής μπορεί να αναμένει να λάβει ιατρική ή ψυχολογική συμβουλή πριν ή μετά την εξέταση. Θα πρέπει να πληρώσετε για τεστ HIV μόνο σε εμπορικά νοσοκομεία και σε κρατικές πολυκλινικές και νοσοκομεία γίνονται δωρεάν.

Διαβάστε σχετικά με τους τρόπους με τους οποίους μπορείτε να μολυνθείτε από τον ιό HIV και ποιοι μύθοι υπάρχουν σχετικά με τις πιθανότητες να μολυνθείτε

Τα πρώτα έχουν σχεδιαστεί για να ταυτοποιούν όλα τα άτομα που έχουν μολυνθεί από τον ιό HIV, τα δεύτερα για τον εντοπισμό ατόμων που δεν έχουν μολυνθεί από τον ιό HIV, αλλά που έδωσαν θετική αντίδραση κατά τη διάρκεια της εξέτασης προσυμπτωματικού ελέγχου. Επομένως, τα τεστ προσυμπτωματικού ελέγχου είναι πολύ ευαίσθητα, δηλαδή σχεδόν δεν δίνουν ψευδώς αρνητικά αποτελέσματα και τα επιβεβαιωτικά τεστ είναι εξαιρετικά συγκεκριμένα, δηλαδή σχεδόν δεν δίνουν ψευδώς θετικά αποτελέσματα. Όταν συνδυάζονται, αυτές οι εξετάσεις παρέχουν ακριβή και αξιόπιστα αποτελέσματα που μπορούν να ανιχνεύσουν μολυσμένα προϊόντα αίματος και να διαγνώσουν τη μόλυνση από τον ιό HIV. Ωστόσο, υπάρχουν βιολογικοί παράγοντες που μειώνουν την ακρίβεια αυτών των δοκιμών. είναι επίσης πιθανά εργαστηριακά σφάλματα. Επομένως, κάθε εργαστήριο που ελέγχει τα αντισώματα HIV πρέπει να έχει ένα άψογο πρόγραμμα ποιοτικού ελέγχου για αυτές τις εξετάσεις. Μην ξεχνάτε αυτή την αξιοπιστία εργαστηριακή έρευναδεν είναι ποτέ 100% και ότι τα αποτελέσματά τους θα πρέπει πάντα να θεωρούνται συμπληρωματικά της κλινικής διάγνωσης.

Περίοδος παραθύρου και ανίχνευση μόλυνσης από τον ιό HIV στα αρχικά στάδια μόλυνσης:

Τα αντισώματα κατά του HIV αρχίζουν να παράγονται λίγο μετά τη μόλυνση, αλλά ο χρόνος εμφάνισής τους εξαρτάται από πολλούς παράγοντες, ιδίως από την κατάσταση του ανοσοποιητικού συστήματος του ασθενούς και τις ιδιότητες του ιού. Είναι σημαντικό να σημειωθεί ότι αντισώματα μπορεί να υπάρχουν στο αίμα ήδη στα αρχικά στάδια μετά τη μόλυνση, αλλά η συγκέντρωσή τους είναι κάτω από το όριο ανίχνευσης ορισμένων μεθόδων (περίοδος παραθύρου). Τα πρώτα συστήματα δοκιμών ανίχνευσαν αντισώματα σε όλους σχεδόν τους ασθενείς με HIV λοίμωξη 6-12 εβδομάδες μετά τη μόλυνση. Τα πιο πρόσφατα συστήματα δοκιμών, συμπεριλαμβανομένης της τρίτης γενιάς trap ELISA, ανιχνεύουν αντισώματα 3-4 εβδομάδες μετά τη μόλυνση. Ο χρόνος μεταξύ της μόλυνσης και της διάγνωσης της λοίμωξης HIV μπορεί να μειωθεί κατά μερικές ημέρες χρησιμοποιώντας μεθόδους για την ανίχνευση αντιγόνων HIV και κατά μερικές ημέρες χρησιμοποιώντας μεθόδους για την ανίχνευση του HIV RNA. Εάν χρησιμοποιήσετε όλες τις μεθόδους που περιγράφονται, η διάγνωση της HIV λοίμωξης στους περισσότερους ασθενείς μπορεί να διαπιστωθεί εντός 2-3 εβδομάδων μετά τη μόλυνση. Τα εμπορικά διαθέσιμα συστήματα δοκιμών για τον έλεγχο για αντισώματα κατά του HIV έχουν πολύ υψηλή και περίπου την ίδια ευαισθησία, επαρκή για την ανίχνευση της πλειονότητας των μολυσμένων με HIV (η λεγόμενη επιδημιολογική ευαισθησία). Ωστόσο, διαφορετικά συστήματα δοκιμών διαφέρουν ως προς την αναλυτική ευαισθησία, δηλαδή στην ικανότητά τους να ανιχνεύουν χαμηλά επίπεδα αντισωμάτων που εμφανίζονται πριν από την ολοκλήρωση της ορομετατροπής.

Υπάρχουν συστήματα δοκιμών που έχουν σχεδιαστεί για την ανίχνευση αντισωμάτων IgM κατά του HIV, αλλά δεν χρησιμοποιούνται ευρέως στην έγκαιρη διάγνωση της HIV λοίμωξης, καθώς τα αντισώματα IgM δεν παράγονται πάντα νωρίς μετά τη μόλυνση. Ορισμένα δοκιμαστικά συστήματα τρίτης γενιάς ανιχνεύουν ταυτόχρονα αντισώματα IgM και IgG έναντι του HIV και έχουν υψηλότερη αναλυτική ευαισθησία.

Δείτε επίσης:Αποκάλυψη της κατάστασης του HIV χωρίς τύψεις, Καμπυλότητα του ρινικού διαφράγματος, Αγγειακό ανεύρυσμα: λανθάνουσα απειλή για την υγεία, Προγεννητικός έλεγχος. χρωμοσωμικές ανωμαλίες, Λανθάνον στραβισμός (Strabismus latenta, Heterophoria), Λανθάνον κίνδυνος: γυναίκες και καρδιακές παθήσεις, Λανθάνουσα σύφιλη (Syphilis latens), Πρωτόκολλο πολυμεράσης αλυσιδωτή αντίδρασημε αντίστροφη μεταγραφή σε πραγματικό χρόνο (RT-PCR RT, Realtime RT-PCR) CDC για την ανίχνευση και έρευνα του ιού της γρίπης A (H1N1), Τρίξιμο δοντιών (βρουξισμός), Προσοχή: κρυφά αλλεργιογόνα

... διαγνωστικά οποιουδήποτε μολυσματική ασθένειαβασίζεται σε σύγκριση επιδημιολογικών, κλινικών και εργαστηριακών δεδομένων και η υπερβολή της τιμής μιας από τις ομάδες αυτών των δεδομένων μπορεί να οδηγήσει σε διαγνωστικά σφάλματα.

Η διάγνωση της λοίμωξης HIV περιλαμβάνει δύο στάδια:
Εγώσκηνή - διαπιστώνοντας το πραγματικό γεγονός της μόλυνσης από τον ιό HIV;
IIσκηνή - προσδιορισμός του σταδίου της νόσου.

ΔΕΣΜΙΩΣΗ ΤΟΥ ΓΕΓΟΝΟΣ ΤΗΣ ΛΟΙΜΩΞΗΣ HIV

Η διαπίστωση του πραγματικού γεγονότος της λοίμωξης από τον ιό HIV (δηλαδή ο εντοπισμός των μολυσμένων με HIV), με τη σειρά του, περιλαμβάνει επίσης δύο στάδια:
Στάδιο Ισυνδεδεμένη ανοσοπροσροφητική δοκιμασία(ELISA): η μέθοδος ELISA είναι μια μέθοδος προσυμπτωματικού ελέγχου (screening) - η επιλογή των ύποπτων μολυσμένων ατόμων, δηλαδή ο σκοπός της είναι ο εντοπισμός ύποπτων ατόμων και ο έλεγχος υγιή άτομα; τα αντισώματα κατά του HIV ανιχνεύονται χρησιμοποιώντας άλλα αντισώματα στα αντισώματα στόχου (αντισώματα έναντι άλλων αντισωμάτων).

Αυτά τα βοηθητικά αντισώματα επισημαίνονται με ένα ένζυμο. Όλες οι εξετάσεις προσυμπτωματικού ελέγχου πρέπει να είναι ιδιαίτερα ευαίσθητες για να μην χάσετε έναν ασθενή. Εξαιτίας αυτού, η ειδικότητά τους δεν είναι πολύ υψηλή, δηλαδή η ELISA μπορεί να δώσει θετική απάντηση («πιθανώς άρρωστος») σε μη μολυσμένα άτομα (για παράδειγμα, σε ασθενείς με αυτοάνοσα νοσήματα: ρευματισμοί, συστηματικός ερυθηματώδης λύκος κ.λπ.). Η συχνότητα των ψευδώς θετικών αποτελεσμάτων κατά τη χρήση διαφόρων συστημάτων δοκιμών κυμαίνεται από 0,02 έως 0,5%. Εάν το τεστ ELISA ενός ατόμου είναι θετικό, τότε για να επιβεβαιωθεί το γεγονός της μόλυνσης από τον ιό HIV, είναι απαραίτητο να εξεταστεί περαιτέρω.

Κατά τη διεξαγωγή ELISA, είναι πιθανά ψευδώς αρνητικά αποτελέσματα στο 3 - 5% των περιπτώσεων - εάν η μόλυνση εμφανίστηκε σχετικά πρόσφατα και το επίπεδο των αντισωμάτων είναι ακόμα πολύ χαμηλό ή στο τελικό στάδιο της νόσου, που χαρακτηρίζεται από σοβαρή βλάβη στο ανοσοποιητικό σύστημα με βαθιά διαταραχή της διαδικασίας παραγωγής αντισωμάτων. Επομένως, παρουσία δεδομένων που υποδεικνύουν επαφή με μολυσμένα με HIV, επαναλαμβανόμενες εξετάσεις πραγματοποιούνται συνήθως μετά από 2 έως 3 μήνες.
ΙΙ στάδιοανοσοστύπωμα(όπως τροποποιήθηκε από Western Blot, Western blot): Αυτή είναι μια πιο σύνθετη μέθοδος και χρησιμεύει για να επιβεβαιώσει το γεγονός της μόλυνσης.

Αυτή η μέθοδος ανιχνεύει όχι πολύπλοκα αντισώματα κατά του HIV, αλλά αντισώματα σε μεμονωμένες δομικές πρωτεΐνες (p24, gp120, gp41, κ.λπ.).

Τα αποτελέσματα της ανοσοστύπωσης θεωρούνται θετικά εάν ανιχνευτούν αντισώματα σε τουλάχιστον τρεις πρωτεΐνες, η μία από τις οποίες κωδικοποιείται από τα γονίδια env, η άλλη από τα γονίδια gag και η τρίτη από τα γονίδια pol. Εάν ανιχνευθούν αντισώματα σε μία ή δύο πρωτεΐνες, το αποτέλεσμα θεωρείται διφορούμενο και απαιτεί επιβεβαίωση.

Στα περισσότερα εργαστήρια, η HIV λοίμωξη διαγιγνώσκεται εάν εντοπιστούν ταυτόχρονα αντισώματα έναντι των πρωτεϊνών p24, p31, gp4l και gpl20 / gp160. Η ουσία της μεθόδου: ο ιός καταστρέφεται σε συστατικά (αντιγόνα), τα οποία αποτελούνται από ιονισμένα υπολείμματα αμινοξέων, και επομένως όλα τα συστατικά έχουν διαφορετική αυγή. στη συνέχεια, χρησιμοποιώντας ηλεκτροφόρηση (ηλεκτρικό ρεύμα), τα αντιγόνα κατανέμονται στην επιφάνεια της ταινίας - εάν υπάρχουν αντισώματα κατά του HIV στον ορό δοκιμής, τότε θα αλληλεπιδράσουν με όλες τις ομάδες αντιγόνων και αυτό μπορεί να ανιχνευθεί.

Θα πρέπει να το θυμόμαστεότι τα αντισώματα HIV εμφανίζονται στο 90-95% των μολυσμένων ατόμων εντός 3 μηνών μετά τη μόλυνση, στο 5-9% των μολυσμένων αντισωμάτων HIV εμφανίζονται μετά από 6 μήνες και στο 0,5-1% των μολυσμένων αντισωμάτων HIV εμφανίζονται αργότερα.

Στο στάδιο του AIDS, ο αριθμός των αντισωμάτων μπορεί να μειωθεί, μέχρι την πλήρη εξαφάνιση.

Στην ανοσολογία, υπάρχει μια τέτοια έννοια όπως Ορολογικό παράθυρο- την περίοδο από τη μόλυνση μέχρι την εμφάνιση τέτοιας ποσότητας αντισωμάτων που μπορεί να ανιχνευθεί.

Για τον HIV, αυτή η περίοδος διαρκεί συνήθως από 2 έως 12 εβδομάδες, σε σπάνιες περιπτώσεις μεγαλύτερη. Την περίοδο του «ορολογικού παραθύρου», σύμφωνα με αναλύσεις, ένα άτομο είναι υγιές, αλλά στην πραγματικότητα έχει προσβληθεί από τον ιό HIV. Έχει διαπιστωθεί ότι το DNA του HIV μπορεί να βρίσκεται στο ανθρώπινο γονιδίωμα για τουλάχιστον τρία χρόνια χωρίς σημάδια δραστηριότητας και δεν εμφανίζονται αντισώματα έναντι του HIV (δείκτες HIV λοίμωξης).

Κατά τη διάρκεια αυτής της περιόδου ("ορολογικό παράθυρο"), είναι δυνατός ο εντοπισμός ενός ατόμου που έχει μολυνθεί από τον ιό HIV και ακόμη και 1-2 εβδομάδες μετά τη μόλυνση, είναι δυνατό με τη βοήθεια αλυσιδωτή αντίδραση πολυμεράσης(PCR).

Αυτή είναι μια εξαιρετικά ευαίσθητη μέθοδος - θεωρητικά είναι δυνατό να ανιχνευθεί 1 DNA ανά 10 ml μέσου. Η ουσία της μεθόδου είναι η εξής: χρησιμοποιώντας την αλυσιδωτή αντίδραση πολυμεράσης, λαμβάνονται πολλά αντίγραφα ενός νουκλεϊκού οξέος (ένας ιός είναι ένα νουκλεϊκό οξύ - DNA ή RNA - σε ένα φάκελο πρωτεΐνης), τα οποία στη συνέχεια ανιχνεύονται χρησιμοποιώντας επισημασμένα ένζυμα ή ισότοπα , καθώς και από τη χαρακτηριστική τους δομή. Η PCR είναι μια δαπανηρή διαγνωστική μέθοδος, επομένως δεν χρησιμοποιείται στον προσυμπτωματικό έλεγχο και τακτικά.

ΟΡΙΣΜΟΣ ΣΤΑΔΙΟΥ ΤΗΣ ΝΟΣΟΥ

Η ανάπτυξη του AIDS βασίζεται, πρώτα απ 'όλα, στην καταστροφή των Τ-βοηθών λεμφοκυττάρων, που σημειώνονται με μονοκλωνικά αντισώματα - ομάδες διαφοροποίησης - όπως το CD4.

Από αυτή την άποψη, η διάγνωση και η παρακολούθηση της εξέλιξης της νόσου είναι αδύνατη χωρίς την παρακολούθηση του υποπληθυσμού των Τ-βοηθών, η οποία πραγματοποιείται πιο εύκολα με τη χρήση διαλογέα κυττάρων λέιζερ.

Με ήπια λοίμωξη HIVο αριθμός των Τ-λεμφοκυττάρων είναι ένας εξαιρετικά μεταβλητός δείκτης. Γενικά, μείωση του αριθμού των κυττάρων CD4 (απόλυτο και σχετικό) διαπιστώνεται σε άτομα που μολύνθηκαν με HIV τουλάχιστον πριν από ένα χρόνο.

Από την άλλη πλευρά, στις πρώιμα στάδιαλοιμώξεις, ο αριθμός των καταστολέων Τ (CD8) συχνά αυξάνεται απότομα τόσο στο περιφερικό αίμα όσο και στους διευρυμένους λεμφαδένες.

Με σοβαρό AIDSΗ συντριπτική πλειονότητα των ασθενών έχει μειωμένο συνολικό αριθμό Τ-λεμφοκυττάρων (λιγότερο από 1000 σε 1 μl αίματος, συμπεριλαμβανομένων των λεμφοκυττάρων CD4 - λιγότερο από 22 σε 1 μl, ενώ η απόλυτη τιμή της περιεκτικότητας σε CD8 παραμένει εντός του φυσιολογικού εύρους).

Αντίστοιχα, η αναλογία CD4 / CD8 πέφτει απότομα. Η in vitro απόκριση των Τ-λεμφοκυττάρων σε τυπικά αντιγόνα και μιτογόνα μειώνεται σε αυστηρή συμφωνία με τον σχετικά μειωμένο αριθμό CD4.

Για τα τελευταία στάδια του AIDSχαρακτηρίζεται από γενική λεμφοπενία, ουδετεροπενία, θρομβοπενία (αντίστοιχα, μείωση του αριθμού λεμφοκυττάρων, ουδετερόφιλων και αιμοπεταλίων), αναιμία.

Αυτές οι αλλαγές μπορεί να είναι συνέπεια της κεντρικής αναστολής της αιμοποίησης λόγω βλάβης των αιμοποιητικών οργάνων από τον ιό, καθώς και της αυτοάνοσης καταστροφής κυτταρικών υποπληθυσμών στην περιφέρεια. Επιπλέον, το AIDS χαρακτηρίζεται από μια μέτρια αύξηση της ποσότητας των γ-σφαιρινών με κυρίαρχη αύξηση της περιεκτικότητας σε IgG.

Οι ασθενείς με σοβαρά συμπτώματα AIDS έχουν συχνά ανυψωμένο επίπεδο IgA. Σε ορισμένα στάδια της νόσου, το επίπεδο δεικτών του AIDS όπως η 1-μικροσφαιρίνη, η σταθερή σε οξύ ιντερφερόνη, η 1-θυμοσίνη αυξάνεται σημαντικά. Το ίδιο συμβαίνει και με την έκκριση ελεύθερης νεοπτερίνης, μεταβολίτη των μακροφάγων.

Δεν είναι ακόμη δυνατό να εκτιμηθεί η σχετική σημασία καθενός από τις αναφερόμενες δοκιμές, ο αριθμός των οποίων αυξάνεται συνεχώς. Επομένως, θα πρέπει να λαμβάνονται υπόψη σε αλληλεπίδραση με δείκτες HIV λοίμωξης τόσο ανοσοϊολογικής όσο και κυτταρολογικής φύσης.

Για κλινική ανάλυσηΤο αίμα χαρακτηρίζεται από λευκοπενία, λεμφοπενία (αντίστοιχα, μείωση του αριθμού των λευκοκυττάρων και των λεμφοκυττάρων).

Στάδιο 1 - " στάδιο επώασης»- δεν έχουν ακόμη ανιχνευθεί αντισώματα κατά του HIV. η διάγνωση της HIV λοίμωξης σε αυτό το στάδιο γίνεται με βάση επιδημιολογικά δεδομένα και πρέπει να επιβεβαιωθεί εργαστηριακά με την ανίχνευση στον ορό αίματος του ασθενούς του ιού της ανθρώπινης ανοσοανεπάρκειας, των αντιγόνων του, των νουκλεϊκών οξέων του HIV.
Στάδιο 2 - " στάδιο των πρωτογενών εκδηλώσεων"- σε αυτήν την περίοδο υπάρχει ήδη παραγωγή αντισωμάτων :;
Στάδιο 2Α - " ασυμπτωματικός»- Η μόλυνση από τον ιό HIV εκδηλώνεται μόνο με την παραγωγή αντισωμάτων.
Στάδιο 2Β - " οξεία λοίμωξη HIV χωρίς δευτερογενή νοσήματα"- λεμφοκύτταρα ευρέως πλάσματος -" μονοπύρηνα κύτταρα "μπορούν να βρεθούν στο αίμα των ασθενών και συχνά υπάρχει μια παροδική μείωση του επιπέδου των CD4-λεμφοκυττάρων (οξεία κλινική λοίμωξη παρατηρείται στο 50-90% των μολυσμένων ατόμων στην πρώτη 3 μήνες μετά τη μόλυνση· η έναρξη της περιόδου οξείας μόλυνσης, κατά κανόνα, προηγείται της ορομετατροπής, δηλ.

η εμφάνιση αντισωμάτων κατά του HIV).
Στάδιο 2Β - " οξεία λοίμωξη HIV με δευτερογενή νοσήματα»- στο πλαίσιο της μείωσης του επιπέδου των CD4-λεμφοκυττάρων και της προκύπτουσας ανοσοανεπάρκειας, εμφανίζονται δευτερογενείς ασθένειες διαφόρων αιτιολογιών (στηθάγχη, βακτηριακή και πνευμονική πνευμονία, καντιντίαση, λοίμωξη από έρπη κ.λπ.).
Στάδιο 3 - " λανθάνων»- ως απόκριση στην εξέλιξη της ανοσοανεπάρκειας, η ανοσοαπόκριση τροποποιείται με τη μορφή υπερβολικής αναπαραγωγής των κυττάρων CD4, ακολουθούμενη από σταδιακή μείωση του επιπέδου των λεμφοκυττάρων CD4, κατά μέσο όρο με ρυθμό 0,05-0,07 × 109 / L ανά έτος; Αντισώματα κατά του HIV βρίσκονται στο αίμα.
Στάδιο 4 - " στάδιο δευτερογενών ασθενειών»- εξάντληση των λεμφοκυττάρων του πληθυσμού CD4, η συγκέντρωση των αντισωμάτων στον ιό μειώνεται σημαντικά (ανάλογα με τη σοβαρότητα των δευτερογενών ασθενειών, διακρίνονται τα στάδια 4A, 4B, 4B).
Στάδιο 5 - " τερματικό στάδιο"- τυπικά μείωση του αριθμού των κυττάρων CD4 κάτω από 0,05 × 109 / l. η συγκέντρωση των αντισωμάτων στον ιό μειώνεται σημαντικά ή μπορεί να μην ανιχνευθούν αντισώματα.

Εργαστηριακή διάγνωση της HIV λοίμωξης

Κατά τη διάγνωση της HIV λοίμωξης, χρησιμοποιούνται 4 ομάδες μεθόδων:

1. Προσδιορισμός της παρουσίας ενός ιού, των αντιγόνων του ή των αντιγράφων του RNA σε υλικά από ασθενή ή μολυσμένο με HIV

Ορολογικά διαγνωστικά με βάση την ανίχνευση ειδικών αντισωμάτων στις επιφανειακές (gp 120 και gp 41) και εσωτερικές (p 18 και p 24) πρωτεΐνες του HIV.

3. Προσδιορισμός παθογνωμονικών (ειδικών) αλλαγών στο ανοσοποιητικό σύστημα για HIV λοίμωξη.

Εργαστηριακή διάγνωση ευκαιριακών λοιμώξεων (ασθένειες που σχετίζονται με το AIDS).

1. Ιολογικά διαγνωστικά.Το υλικό για την απομόνωση του HIV είναι τα Τ-λεμφοκύτταρα του αίματος, τα λευκοκύτταρα του μυελού των οστών, Οι λεμφαδένες, εγκεφαλικός ιστός, σάλιο, σπέρμα, εγκεφαλονωτιαίο υγρό, πλάσμα αίματος.

Το προκύπτον υλικό εμβολιάζεται με συνεχή καλλιέργεια Τ-λεμφοκυττάρων (Η9). Η ένδειξη του HIV σε κυτταροκαλλιέργεια πραγματοποιείται με CPE (σχηματισμός συμπλαστών), καθώς και με μεθόδους ανοσοφθορισμού, ηλεκτρονική μικροσκοπία, με την εκφρασμένη δραστηριότητα της αντίστροφης μεταγραφάσης.

Οι σύγχρονες ερευνητικές μέθοδοι καθιστούν δυνατή την ανίχνευση ενός μολυσμένου λεμφοκυττάρου ανά 1000 κύτταρα.

Η ανίχνευση ιικών αντιγόνων σε μολυσμένα Τ-λεμφοκύτταρα πραγματοποιείται με τη χρήση μονοκλωνικών αντισωμάτων

Τα τελευταία χρόνια, ο προσδιορισμός του αριθμού των αντιγράφων του HIV RNA στο πλάσμα του αίματος με τη μέθοδο της αλυσιδωτής αντίδρασης πολυμεράσης (TTCR) - το λεγόμενο ιικό φορτίο.

Εάν σε ασθενείς που δεν λαμβάνουν θεραπεία, το ιικό φορτίο είναι κάτω από το όριο ανίχνευσης (αυτό είναι λιγότερο από 5000 αντίγραφα HIV RNA σε 1 ml πλάσματος), αυτό υποδηλώνει απουσία εξέλιξης ή αργή εξέλιξη. Ταυτόχρονα, ο βαθμός μολυσματικότητας είναι ελάχιστος. Ένα υψηλό ιικό φορτίο (πάνω από 10.000 αντίγραφα RNA σε 1 ml πλάσματος) σε ασθενείς με αριθμό λεμφοκυττάρων CO4 μικρότερο από 300 ανά 1 μL υποδηλώνει πάντα την εξέλιξη της νόσου.

Ορολογική διάγνωση. Προς το παρόν, έχει λάβει τη μεγαλύτερη διανομή.

Υλικό για έρευνα: 5 ml. ηπαρινισμένο αίμα, το οποίο μπορεί να αποθηκευτεί στο ψυγείο αλλά όχι κατεψυγμένο για 6-8 ώρες πριν από την παράδοση στο εργαστήριο.

Με στόχο την ορολογική διάγνωσηΤο AIDS χρησιμοποιείται κυρίως με μεθόδους ενζυμική ανοσοδοκιμασίαμε τυπικά ενζυμικά συνδεδεμένα ανοσοπροσροφητικά συστήματα (ELISA).

Αυτή είναι μια μέθοδος διαλογής. Η αρχή της λειτουργίας βασίζεται στην κλασική αρχή της άμεσης ELISA. Τα ανοσοπροσροφητικά είναι πλάκες πολυστυρενίου με ακινητοποιημένο αδρανοποιημένο ειδικό για τον ιό αντιγόνο που λαμβάνεται από τον HIV ή συνθετικά.

Στη συνέχεια ο ορός δοκιμής προστίθεται σε αραίωση. Η επώαση πραγματοποιείται σε φρεάτια αντιγόνου. Μετά τη δέσμευση του AG με το ΑΤ, ακολουθεί τρεις φορές πλύση των μη δεσμευμένων πρωτεϊνών και στη συνέχεια ένα συζυγές αντισωμάτων σε ανθρώπινες ανοσοσφαιρίνες με ενζυμική επισήμανση εισάγεται στα φρεάτια.

Ο σχηματισμός ενός συγκεκριμένου συμπλόκου AG + AT ανιχνεύεται με την προσθήκη ενός υποστρώματος για το ένζυμο (διάλυμα ορθοφαινυλενοδιαμίνης και υπεροξειδίου του υδρογόνου).

Ως αποτέλεσμα, το χρώμα του μέσου αλλάζει ανάλογα με την ποσότητα των αντισωμάτων. Τα αποτελέσματα της μελέτης λαμβάνονται υπόψη σε φασματοφωτόμετρο.

Οι οροί αίματος με ειδικά για τον ιό αντισώματα σύμφωνα με τα δεδομένα ELISA θα πρέπει να εξετάζονται περαιτέρω με ανοσοστύπωμα.

Το ανοσοποιητικό στύπωμα είναι ένα τεστ επιβεβαίωσης καθώς ανιχνεύει αντισώματα σε διάφορες πρωτεΐνες HIV.

Βασίζεται στην προκαταρκτική κλασμάτωση (διαχωρισμός) μοριακού βάρους των πρωτεϊνών HIV με ηλεκτροφόρηση σε γέλη πολυακρυλαμιδίου που ακολουθείται από μεταφορά αντιγόνων σε μεμβράνη νιτροκυτταρίνης. Στη συνέχεια, ο ορός δοκιμής εφαρμόζεται στη μεμβράνη. Σε αυτή την περίπτωση, ειδικά αντισώματα σχηματίζουν ένα σύμπλεγμα με ένα συγκεκριμένο AG (gp.120, gp.41, p.24, p.18). Το τελικό στάδιο της μελέτης είναι η ταυτοποίηση αντισωμάτων σε διάφορες πρωτεΐνες HIV.

Για αυτό, στο σύστημα προστίθενται αντισώματα κατά των ανθρώπινων πρωτεϊνών, επισημασμένα με ετικέτα ενζύμου ή ραδιοϊσοτόπου.

Έτσι, στον ορό του ασθενούς, ανιχνεύονται (ή δεν ανιχνεύονται) ειδικά για τον ιό αντισώματα προς όλα ή τα περισσότερα από τα αντιγόνα HIV.

3. Μελέτες της ανοσοποιητικής κατάστασης.Με στόχο τον εντοπισμό:

1) μείωση της αναλογίας των κυττάρων CD4 / CD8 (σε N 2 και>, με AIDS - 0,5 και<);

2) μείωση της περιεκτικότητας σε κύτταρα CD4 (<200 клеток/мл.);

3) η παρουσία ενός από τα εργαστηριακά σημεία, συμπεριλαμβανομένης της αναιμίας, της λευκοπενίας, της θρόμβωσης, της λεμφοπενίας.

4) αύξηση της συγκέντρωσης των Ig A και Ig G στον ορό του αίματος.

5) μείωση της αντίδρασης μετασχηματισμού βλαστών λεμφοκυττάρων σε μιτογόνα.

6) έλλειψη δερματικής αντίδρασης της GTZ σε διάφορα αντιγόνα.

7) αύξηση του επιπέδου των κυκλοφορούντων ανοσοσυμπλεγμάτων.

Προηγούμενο1234567891011Επόμενο

ΔΕΙΤΕ ΠΕΡΙΣΣΟΤΕΡΑ:

Αντισώματα κατά του HIV 1/2- συστατικά του πλάσματος του αίματος, πρωτεϊνική φύση, που εμποδίζουν τον πολλαπλασιασμό της λοίμωξης HIV και εξουδετερώνουν πλήρως την αρνητική τους επίδραση.

Τι είναι το τεστ αντισωμάτων HIV 1/2 (προληπτικός έλεγχος)

Το τεστ διαλογής για αντισώματα κατά του HIV 1,2 είναι ένα σύστημα δοκιμών που μπορεί να εντοπίσει άτομα που έχουν μολυνθεί από τον ιό της ανοσοανεπάρκειας. Εκτός από αυτά, υπάρχουν τα λεγόμενα επιβεβαιωτικά (βοηθητικά) τεστ, το έργο των οποίων είναι ο εντοπισμός ατόμων που δεν έχουν μολυνθεί από τον ιό, αλλά με θετική αντίδραση στον ιό κατά τη διάρκεια του προσυμπτωματικού ελέγχου.

Η ουσία της μελέτης προσυμπτωματικού ελέγχου της λοίμωξης HIV είναι ο προσδιορισμός των αντισωμάτων στον ιό της ανοσοανεπάρκειας.

Το χαρακτηριστικό του χαρακτηριστικό είναι η αυξημένη ευαισθησία - περισσότερο από 99,5%. Η ιδιαιτερότητα της εξέτασης είναι ότι ο προσυμπτωματικός έλεγχος μπορεί να δώσει ένα ψευδώς θετικό αποτέλεσμα εάν το σώμα του ασθενούς περιέχει αυτοαντισώματα.

Το ίδιο αποτέλεσμα μπορεί να ανιχνευθεί στην περίπτωση ηπατικής νόσου στον ασθενή, αντιγριπικού εμβολιασμού ή παρουσίας οποιασδήποτε οξείας ιογενούς νόσου. Με βάση αυτό, για να ληφθούν ακριβή αποτελέσματα, μαζί με τον έλεγχο, είναι συνήθως σύνηθες να γίνεται το προαναφερθέν τεστ επιβεβαίωσης.

Ενδείξεις για ανάλυση

Στην ιατρική πρακτική, υπάρχει ένα αρκετά ευρύ φάσμα ενδείξεων για προσυμπτωματικό έλεγχο.

Ο ασθενής μπορεί να επικοινωνήσει με το εργαστήριο σε περίπτωση:

  • υποψία λοίμωξης (εάν υπήρξε στενή επαφή με φορέα μόλυνσης από τον ιό HIV).
  • με απώλεια βάρους, πυρετό?
  • πνευμονία που δεν ανταποκρίνεται στη συμβατική θεραπεία.
  • ασθένειες χρόνιας φύσης που έχουν προκύψει για άγνωστους λόγους.
  • στη διαδικασία προετοιμασίας για χειρουργική επέμβαση.
  • μετάγγιση αίματος;
  • προγραμματισμός εγκυμοσύνης και οικογένειας.
  • Με φλεγμονώδεις λεμφαδένες.
  • Περιστασιακή σεξουαλική επαφή.

Άτομα που διατρέχουν ειδικό κίνδυνο: τοξικομανείς και άτομα με ακατάλληλη σεξουαλική ζωή.

Πώς γίνεται ο προσυμπτωματικός έλεγχος αντισωμάτων HIV 1/2;

Η διαδικασία συνεπάγεται συμμόρφωση με ορισμένους απαραίτητους κανόνες:

  • ο ασθενής πρέπει να δίνει αίμα αποκλειστικά με άδειο στομάχι (επιτρέπεται το πόσιμο νερό).
  • από τη στιγμή του τελευταίου γεύματος, πρέπει να περάσουν τουλάχιστον οκτώ ώρες.
  • ο γιατρός θα πρέπει να ενημερώνεται για τα φάρμακα που παίρνει ο ασθενής και να γνωρίζει τη δοσολογία (εάν δεν υπάρχει δυνατότητα έστω και βραχυπρόθεσμης απόσυρσης).
  • εάν ο ασθενής είναι σε θέση να αναβάλει τη χρήση φαρμάκων, συνιστάται να το κάνει 10-15 ημέρες πριν από την ημέρα χειραγώγησης.
  • την ημέρα πριν από την έναρξη της εξέτασης, συνιστάται ο ασθενής να αρνηθεί να πάρει τηγανητά ή λιπαρά τρόφιμα, επίσης απαγορεύεται να πίνει αλκοολούχα ποτά, να καπνίζει και να περιορίζει τη βαριά σωματική δραστηριότητα.

Πρέπει να σημειωθεί ότι οι εργαστηριακές εξετάσεις για την παρουσία λοίμωξης σε παιδιά που γεννήθηκαν από μητέρες που είναι φορείς του ιού της ανοσοανεπάρκειας έχουν τις δικές τους ιδιαιτερότητες.

Δεδομένου ότι κατά τους πρώτους μήνες της ζωής ενός παιδιού, τα μητρικά αντισώματα κατά του HIV μπορεί να υπάρχουν στο αίμα του, είναι αδύνατο να ληφθεί μια αντικειμενική εικόνα της υγείας ενός νεογνού με βάση τα αποτελέσματα της ανάλυσης και ακόμη και ένα αρνητικό αποτέλεσμα δεν σημαίνει ότι ο ιός δεν μπορούσε να διεισδύσει στον φραγμό του πλακούντα.

Για να ληφθούν ακριβή δεδομένα, ο έλεγχος θα πρέπει να γίνει εντός 36 μηνών από τη γέννηση του μωρού.

Υπηρεσίες στην κατεύθυνση "Σύγχρονη διάγνωση"

Κλινικές με κατεύθυνση «Σύγχρονη διαγνωστική»

Πριν από τη δοκιμή ή τον έλεγχο για αντισώματα HIV, υπάρχουν δύο γενικοί αλλά πολύ καλά καθορισμένοι στόχοι - η εύρεση περιστατικών και η επιτήρηση. Όταν εντοπιστούν περιπτώσεις, το πρώτο βήμα είναι να αποσαφηνιστεί η κατάσταση μόλυνσης από τον ιό HIV για κάθε άτομο, προκειμένου να συνταγογραφηθεί η κατάλληλη θεραπεία ή παρακολούθηση με τα κατάλληλα μέτρα.

Σκοπός της επιτήρησης είναι η εκτίμηση του επιπολασμού του HIV, της κατανομής των λοιμώξεων και των τάσεων τους σε μια ομάδα ή έναν ολόκληρο πληθυσμό.

Η ευαισθησία ενός τεστ για αντισώματα στον HIV είναι ένα μέτρο της ικανότητάς του να ανιχνεύει με ακρίβεια αυτά τα αντισώματα σε ένα δείγμα και η ειδικότητα ενός τεστ είναι ένα μέτρο της ικανότητάς του να επιβεβαιώνει με ακρίβεια την απουσία αντισωμάτων εάν δεν υπάρχουν στο δείγμα.

Ιδανικά, η ευαισθησία και η ειδικότητα της δοκιμής θα πρέπει να αγγίζουν το 100%. Στην πράξη, ούτε ένα βιολογικό τεστ δεν πληροί αυτήν την απαίτηση και, ωστόσο, τα χρησιμοποιούμενα τεστ για αντισώματα κατά του HIV συγκαταλέγονται στις πιο ευαίσθητες και ειδικές δοκιμές που διατίθενται επί του παρόντος.

Η εργαστηριακή διάγνωση του AIDS συνίσταται στη διεξαγωγή ιολογικών, ορολογικών, ανοσολογικών μελετών υλικού από άρρωστα άτομα με υποψία αυτής της ασθένειας.

Σε ιολογικές μελέτες, πρωτογενείς καλλιέργειες μονοπύρηνων αιμοσφαιρίων μπορούν να χρησιμοποιηθούν για την απομόνωση του ιού.

Η απομόνωση και η ταυτοποίηση του ιού είναι μεθοδολογικά πολύπλοκη και μπορεί να πραγματοποιηθεί σε εξειδικευμένα εργαστήρια. Η πιο αποτελεσματική διαγνωστική μέθοδος που χρησιμοποιείται σήμερα για μαζικές εξετάσεις ρουτίνας είναι η ανίχνευση αντισωμάτων στον ιό της ανθρώπινης ανοσοανεπάρκειας. Τα αντισώματα κατά του HIV μπορεί να εμφανιστούν μέχρι το τέλος του πρώτου μήνα της μόλυνσης. Κατατίθεται από έναν αριθμό συγγραφέων, χρειάζονται από 4-7 εβδομάδες έως 6 μήνες ή περισσότερο για την ανάπτυξη ορομετατροπής. Η παρουσία αντισωμάτων έχει διαγνωστική αξία στο AIDS ή υποδηλώνει τον κίνδυνο ανάπτυξής του.

Τα αντισώματα δεν είναι μόνο ορολογικός δείκτης του AIDS. Αποκαλυπτικά στην προκλινική φάση της νόσου, επιτρέπουν την έγκαιρη διάγνωσή της. Η παρουσία τους έχει ιδιαίτερη σημασία για την ανίχνευση φορέων.

Τα αντισώματα ανιχνεύονται για πολλά χρόνια, πρακτικά σε όλη τη ζωή. Οι ερευνητές έχουν καθιερώσει παραλληλισμό στην ανίχνευση του ιού και των αντισωμάτων σε αυτόν, δηλαδή, η παρουσία αντισωμάτων στον ιό της ανοσοανεπάρκειας δείχνει μεγάλη πιθανότητα ότι ένα άτομο είναι φορέας ιού.

Τα αντισώματα κατά του αντιγόνου HIV, που εμφανίζονται στην περίοδο επώασης, συνεχίζουν να παράγονται εντατικά με την ανάπτυξη της νόσου, καθώς ο αντιγονικός ερεθισμός διεγείρεται από ιοσωμάτια που απελευθερώνονται από μολυσμένα λεμφοκύτταρα και υποβιοριονικά συστατικά που εισέρχονται στην κυκλοφορία του αίματος κατά τη διάσπαση των μολυσμένων κυττάρων. και μολυσμένα λεμφοκύτταρα.

Ταυτόχρονα, ο προϊός που είναι ενσωματωμένος στο γονιδίωμα των μολυσμένων κυττάρων παραμένει απρόσιτος σε συγκεκριμένα αντισώματα. Αυτό εξηγεί το φαινομενικά παράδοξο γεγονός: όσο περισσότερα αντισώματα κατά του ιού της ανθρώπινης ανοσοανεπάρκειας στον ορό του αίματος, τόσο πιο εύκολο είναι να απομονωθεί ο ίδιος ο ιός από τον ασθενή.

Αυτό συμβαίνει επειδή τα αντισώματα που παράγονται ως απόκριση στη μόλυνση από τον ιό δεν εξουδετερώνουν και, ως εκ τούτου, δεν έχουν αξιοσημείωτη επίδραση στον ιό, αλλά απλώς υπάρχουν στο σώμα μαζί του. Για την ανίχνευση αντισωμάτων (ΑΤ) στον ιό του AIDS, έχει αναπτυχθεί ένας αριθμός δοκιμών που επιτρέπουν τη διεξαγωγή μελετών σε επαρκώς υψηλό επίπεδο ειδικότητας και ευαισθησίας. Αυτές είναι μέθοδοι ραδιοανοσοδοκιμασίας στερεάς φάσης, ραδιοανοσοκαθίζησης, ανοσοφθορισμού, ενζυμικής ανοσοδοκιμασίας και ανοσοστύπωσης.

Οι μέθοδοι της ενζυμικής ανοσοπροσροφητικής δοκιμασίας (ELISA) έχουν βρει την ευρύτερη εφαρμογή στην πράξη, η οποία διακρίνεται από την υψηλή ευαισθησία, την ικανότητα ποσοτικής και οπτικής καταγραφής των αποτελεσμάτων της αντίδρασης, γεγονός που καθιστά τη μέθοδο προσβάσιμη σε εργαστήριο οποιουδήποτε επιπέδου .

Το ELISA χρησιμοποιεί ξένα και εγχώρια συστήματα δοκιμών.

Κλινική πορεία της HIV λοίμωξης και του AIDS

Πρέπει να δίνεται προσοχή στα παιδιά που γεννιούνται από μολυσμένες μητέρες. Ελλείψει κλινικής, ένα παιδί θεωρείται μολυσμένο εάν η AT στον HIV επιμένει μετά από ένα χρόνο. Εάν ληφθεί θετικό αποτέλεσμα στην ELISA, είναι απαραίτητο να ελεγχθούν οι οροί που έδωσαν μία φορά θετικά αποτελέσματα τρεις φορές και να επιβεβαιωθεί το θετικό αποτέλεσμα σε ένα ανεξάρτητο σύστημα - ανοσοστύπωμα

Η ανίχνευση της ΑΤ στην αντίδραση ELISA δεν παρέχει επαρκείς πληροφορίες, αφού δεν λέγεται η κατάσταση του υποκειμένου, αλλά υποδηλώνει μόνο επώαση, ασθένεια ή παρουσία ασυμπτωματικής λοίμωξης.

Το ανοσοποιητικό στύπωμα δίνει πολλές πληροφορίες Δεδομένου ότι η παρουσία ΑΤ σε πολλά αντιγόνα HIV είναι χαρακτηριστική της σοβαρής νόσου, ενώ η αντίδραση με 1-2 αντιγόνα είναι πιο χαρακτηριστική για μια ήπια μολυσματική διαδικασία

Ενημερωτικός είναι ο υπολογισμός του αριθμού των Τ (βοηθών) και της αναλογίας Τ4 προς Τε (κατασταλτές) των λεμφοκυττάρων, που προσδιορίζεται με τη χρήση μονοκωνικών αντισωμάτων.

Ένα σημαντικό κριτήριο της νόσου μπορεί να είναι η απότομη αύξηση της ποσότητας των ανοσοσφαιρινών, ιδιαίτερα των Α και V. Στη γενική κλινική ανάλυση αίματος, η λεμφοπενία, η λευκοπενία, η ερυθροπενία, η θρομβοπενία, η ηωσινοφιλία μπορεί να υποδηλώνουν τη νόσο.

Τα τεστ HIV που χρησιμοποιούνται για σκοπούς επιτήρησης δεν χρειάζεται να είναι τόσο ακριβή όσο απαιτείται κλινικά.

Ωστόσο, με πολύ χαμηλό επιπολασμό HIV στον πληθυσμό, όλα τα θετικά δείγματα πρέπει να επανεξεταστούν σε πρόσθετες εξετάσεις.

Η συλλογή αίματος για εξέταση για αντισώματα HIV ή για προληπτικό έλεγχο μπορεί να συνοδεύεται από την καταχώριση των ονομάτων των υποκειμένων (συλλογή επωνυμίας) ή μπορεί να πραγματοποιηθεί χωρίς καταχώριση ονομάτων ή ατομικών στοιχείων ταυτοποίησης (ανώνυμη συλλογή) (πίνακας.

Για τον ανώνυμο έλεγχο χωρίς να λαμβάνονται υπόψη πληροφορίες αναγνώρισης, τα ακόλουθα σημεία είναι χαρακτηριστικά: χρησιμοποιούνται δείγματα αίματος που συλλέγονται για άλλους σκοπούς. Η ανωνυμία είναι εγγυημένη λόγω του γεγονότος ότι τα δεδομένα ταυτοποίησης δεν συλλέγονται ή δεν λαμβάνονται υπόψη· δεν απαιτείται η λήψη της συγκατάθεσης του ερωτώμενου· δεν απαιτείται επαφή με συμβουλευτικές και κοινωνικές υπηρεσίες. Τέλος, και κυρίως, ελαχιστοποιούνται τα λάθη στις στατιστικές εκτιμήσεις, ανάλογα με το επίπεδο συμμετοχής του πληθυσμού.

Αν και πιο ακριβή δεδομένα μπορούν να ληφθούν από ανώνυμα τεστ HIV, αυτή η μέθοδος έχει τα ακόλουθα μειονεκτήματα: δεν μπορεί να εξαλείψει πιθανή μεροληψία επιλογής. δεδομένα σχετικά με τη συμπεριφορά υψηλού κινδύνου και άλλες σημαντικές μεταβλητές δεν είναι διαθέσιμα και δεν μπορούν να συλλεχθούν αναδρομικά· είναι αδύνατο να έρθετε σε επαφή με άτομα που έχουν προσβληθεί από τον ιό HIV για να τους ενημερώσετε για την κατάστασή τους. η εξέταση μπορεί να πραγματοποιηθεί μόνο σε ομάδες ατόμων από τα οποία ελήφθη αίμα για άλλους σκοπούς.

Σε περιοχές όπου ο επιπολασμός του HIV θεωρείται πολύ χαμηλός, η επιτήρηση του συστήματος υγείας θα πρέπει να επικεντρώνεται κυρίως σε άτομα ή πληθυσμούς με τον υψηλότερο κίνδυνο συμπεριφοράς HIV. σεξουαλικοί σύντροφοι

Η εξέταση αίματος για HIV σε αυτήν την ομάδα κινδύνου λαμβάνεται πιο εύκολα από κέντρα σεξουαλικά μεταδιδόμενων νοσημάτων ή παρόμοιες εγκαταστάσεις.

Εάν η ενδοφλέβια χρήση ναρκωτικών είναι επίσης συχνή, θα πρέπει να λαμβάνονται δείγματα αίματος από χρήστες ναρκωτικών σε εξειδικευμένα ιδρύματα.

Η συλλογή αίματος μία φορά κάθε 3 ή 6 μήνες στις περισσότερες ομάδες κινδύνου από γεωγραφικές περιοχές όπου υπάρχουν οι περισσότερες τέτοιες ομάδες θα είναι συνήθως επαρκής. Εξαίρεση μπορεί να αποτελούν οι ομάδες κινδύνου όπως οι τοξικομανείς που ασκούν ενδοφλέβια χορήγηση φαρμάκων, για τις οποίες μπορεί να απαιτούνται συχνότερες εξετάσεις.

Ο ΠΟΥ αναπτύσσει επί του παρόντος ένα σύστημα ταξινόμησης ασθενειών (σταδιοποίηση) για κλινικές δοκιμές που μπορεί επίσης να χρησιμοποιηθεί σε δοκιμές θεραπειών, οι οποίες μπορεί επίσης να έχουν προγνωστική αξία.

Ωστόσο, ένα τέτοιο σύστημα δεν προορίζεται να αντικαταστήσει τους υπάρχοντες ορισμούς του AIDS που χρησιμοποιούνται στην επιτήρηση της υγείας.

Επί του παρόντος, τα συστήματα προγραμματισμένης (ρουτίνας) παρακολούθησης του HIV αναπτύσσονται παντού.

Αυτά τα συστήματα πρέπει να προσαρμοστούν στην υπάρχουσα επιδημιολογική κατάσταση. Συνεπώς, οι μέθοδοι δειγματοληψίας σε πληθυσμούς με πολύ χαμηλό επιπολασμό του ιού πρέπει απαραίτητα να διαφέρουν από εκείνες που χρησιμοποιούνται όπου ο επιπολασμός είναι μέτριος ή υψηλός.

Αυτή η επιτήρηση περιλαμβάνει έρευνες ρουτίνας σε καλά καθορισμένους και προσβάσιμους πληθυσμούς.

Θα πρέπει πρώτα απ 'όλα να περιλαμβάνει εκείνες τις ομάδες που διατρέχουν τον μεγαλύτερο κίνδυνο μόλυνσης και σε καθεμία από αυτές τις ομάδες είναι απαραίτητο να επιλεγεί ένας σταθερός προκαθορισμένος αριθμός ατόμων για εξέταση.

Τα τελευταία χρόνια, ο ανώνυμος έλεγχος σε μη αναγνωρισμένους πληθυσμούς έχει γίνει ολοένα και πιο διαδεδομένος ως ένας ακριβής και οικονομικά αποδοτικός τρόπος επιδημιολογικής επιτήρησης του HIV στο σύστημα υγειονομικής περίθαλψης.

Εργαστηριακές διαγνωστικές μέθοδοι HIV

Το άκρως εξειδικευμένο εργαστήριο πραγματοποιεί:

α) προσδιορισμός αντισωμάτων, αντιγόνων και ανοσοσυμπλεγμάτων που κυκλοφορούν στο αίμα· καλλιέργεια του ιού, ταυτοποίηση του γονιδιωματικού υλικού και των ενζύμων του.

β) εκτίμηση των λειτουργιών του κυτταρικού δεσμού του ανοσοποιητικού συστήματος.

Ο κύριος ρόλος ανήκει στις μεθόδους ορολογικής διάγνωσης που στοχεύουν στον προσδιορισμό αντισωμάτων, καθώς και αντιγόνων του παθογόνου στο αίμα και σε άλλα βιολογικά υγρά του σώματος.

Ο έλεγχος για αντισώματα κατά του HIV πραγματοποιείται με σκοπό:

α) ασφάλεια των μεταγγίσεων και μεταμοσχεύσεων αίματος·

β) επιτήρηση, έλεγχος για την παρακολούθηση του επιπολασμού της λοίμωξης HIV και τη μελέτη της δυναμικής του επιπολασμού της σε συγκεκριμένο πληθυσμό·

γ) διαγνωστικά της HIV λοίμωξης, δηλ.

ε. εθελοντικός έλεγχος ορού αίματος πρακτικά υγιών ατόμων ή ασθενών με διάφορα κλινικά σημεία και συμπτώματα παρόμοια με HIV λοίμωξη ή AIDS.

Το σύστημα εργαστηριακής διάγνωσης της HIV λοίμωξης βασίζεται σε μια αρχή τριών σταδίων.

Το πρώτο στάδιο - προσυμπτωματικός έλεγχος, έχει σχεδιαστεί για τη διενέργεια πρωτογενών εξετάσεων αίματος για την παρουσία αντισωμάτων στις πρωτεΐνες HIV. Το δεύτερο στάδιο είναι το σημείο αναφοράς - επιτρέπει τη χρήση ειδικών μεθοδολογικών τεχνικών για την αποσαφήνιση (επιβεβαίωση) του πρωταρχικού θετικού αποτελέσματος που ελήφθη στο στάδιο της εξέτασης. Το τρίτο αιθάνιο - ειδικός, προορίζεται για την τελική επαλήθευση της παρουσίας και της ειδικότητας των δεικτών μόλυνσης από τον ιό HIV που εντοπίστηκαν στα προηγούμενα στάδια της εργαστηριακής διάγνωσης.

Η ανάγκη για πολλά στάδια εργαστηριακής διάγνωσης οφείλεται κυρίως σε οικονομικούς λόγους.

Στην πράξη, χρησιμοποιούνται διάφορες δοκιμές που καθιστούν δυνατό τον εντοπισμό των μολυσμένων με HIV με επαρκή βαθμό αξιοπιστίας:

ELISA (ELISA) -τεστ (ενζυμική ανοσοπροσροφητική δοκιμασία) ανίχνευση του πρώτου επιπέδου, χαρακτηρίζεται από υψηλή ευαισθησία, αν και λιγότερο ειδική από τα ακόλουθα.

Immune blot (Western-blot), ένα πολύ συγκεκριμένο και πιο χρησιμοποιούμενο τεστ για τη διαφοροποίηση μεταξύ HIV-1 και HIV-2.

Δοκιμή αντιγοναιμίας P25, αποτελεσματική στα αρχικά στάδια της μόλυνσης.

Αλυσιδωτή αντίδραση πολυμεράσης (PCR).

Σε περιπτώσεις μαζικής διαλογής δειγμάτων αίματος, συνιστάται η δοκιμή μειγμάτων ορών από μια ομάδα ατόμων, με τέτοιο τρόπο ώστε η τελική αραίωση κάθε δείγματος να μην υπερβαίνει το 1:100.

Εάν το μείγμα ορού είναι θετικό, ελέγχεται κάθε ορός στο θετικό μείγμα. Αυτή η μέθοδος δεν οδηγεί σε απώλεια ευαισθησίας τόσο στην ELISA όσο και στην ανοσοστύπωση, αλλά μειώνει το κόστος εργασίας και το κόστος της αρχικής εξέτασης κατά 60-80%.

Ανοσολογικές μέθοδοι

ο αριθμός των βοηθών Τ,

2. η αναλογία Τ4 και Τ8,

3. κατάσταση υπερευαισθησίας,

4. αντισταθμιστική λειτουργία του συστήματος Τ κυττάρων.

Εκδηλώνεται με υπερπαραγωγή ανοσοσφαιρινών, είναι χαμηλής συγγένειας και το υλικό του οργανισμού καταναλώνεται ακόμη περισσότερο.

Μειονεκτήματα: εμφανίζονται αργά, κάποιοι ανοσολογικοί δείκτες μπορεί να είναι σε άλλες λοιμώξεις.

Κλινικές μέθοδοι - m. είναι παρόμοιες με άλλες ασθένειες, οι πιο τυπικές εκδηλώσεις καταγράφονται σε τελευταία στάδια, επομένως, η κλινική διάγνωση δεν είναι πολύ αποτελεσματική

Η κύρια μέθοδος - ορολογική - εφαρμόζεται σε 2 στάδια:

1 - εξέταση διαλογής - δειγματοληψία για ολικά αντισώματα σε όλες τις πρωτεΐνες της ανοσολογικής ανάλυσης.

Αυτό το στάδιο δίνει 95% αληθινά αποτελέσματα και 5% ψευδώς θετικά.

2 - μέθοδος επιβεβαίωσης - όλα τα δείγματα εξετάζονται χρησιμοποιώντας τη μέθοδο επιβεβαίωσης. Αυτή η τεχνική σάς επιτρέπει να ανιχνεύσετε αντισώματα σε μια ιική πρωτεΐνη.

Θετικό αποτέλεσμα όταν ανιχνεύονται αντισώματα σε τουλάχιστον 3 ιικές πρωτεΐνες, εάν σε 1 ή 2 το αποτέλεσμα είναι αμφίβολο και απαιτεί πρόσθετη εξέταση.

Στην πρωτογενή οροδιάγνωση της HIV λοίμωξης, τα ολικά αντισώματα προσδιορίζονται χρησιμοποιώντας τεστ προσυμπτωματικού ελέγχου - ELISA και αντιδράσεις συγκόλλησης.

Στο δεύτερο στάδιο (διαιτησίας), χρησιμοποιείται μια πιο περίπλοκη δοκιμή - μια ανοσοστύπωση, η οποία επιτρέπει όχι μόνο να επιβεβαιώσει ή να απορρίψει το αρχικό συμπέρασμα, αλλά και να το κάνει στο επίπεδο του προσδιορισμού αντισωμάτων σε μεμονωμένες πρωτεΐνες ιού.

Ερμηνεία των αποτελεσμάτων των τεστ αντισωμάτων HIV

Ένας αρκετά μεγάλος αριθμός διαφορετικών παραγόντων επηρεάζει το αποτέλεσμα της ανάλυσης για αντισώματα κατά του HIV, και μεταξύ αυτών ο χρόνος της ανάλυσης μετά από μια πιθανή μόλυνση είναι σημαντικός.

Στις περισσότερες περιπτώσεις, τα αντισώματα HIV μπορούν να ανιχνευθούν 6-12 εβδομάδες μετά τη μόλυνση.

Αυτή η περίοδος από την είσοδο του ιού στον οργανισμό μέχρι την εμφάνιση ανιχνεύσιμης ποσότητας αντισωμάτων ονομάζεται περίοδος θετικής ορομετατροπής ή περίοδος «παραθύρου». Υπάρχουν σπάνιες περιπτώσεις εμφάνισης αντισωμάτων 6 μήνες μετά τη μόλυνση και οι αναφορές για την ανίχνευση αντισωμάτων μόνο μετά από 1 χρόνο δεν έχουν στοιχεία. Επί του παρόντος, η διαγνωστική υπηρεσία χρησιμοποιεί νέες γενιές μεθόδων ELISA που επιτρέπουν την ανίχνευση αντισωμάτων κατά του HIV 3-4 εβδομάδες μετά τη μόλυνση και ορισμένοι συνδυασμοί αυτών των μεθόδων, οι λεγόμενες στρατηγικές δοκιμών, μειώνουν την περίοδο παραθύρου σε 2-3 εβδομάδες. δηλαδή...

καθιστούν δυνατή την ανίχνευση αντισωμάτων κατά του HIV μόλις αρχίσουν να παράγονται στον οργανισμό.

Ένα αρνητικό αποτέλεσμα σημαίνει ότι δεν βρέθηκαν αντισώματα κατά του HIV στο αίμα του ατόμου.

Αυτή η κατάσταση ονομάζεται οροαρνητικότητα και συνήθως σημαίνει ότι το άτομο δεν έχει μολυνθεί.

Ένα αρνητικό αποτέλεσμα δεν παρέχει καμία εγγύηση για το μέλλον. Δηλώνει μόνο την κατάσταση την ώρα της εξέτασης. Υπάρχει μια μικρή πιθανότητα η έρευνα να πραγματοποιήθηκε κατά την περίοδο παραθύρου. Επομένως, εάν ένα άτομο κινδύνευε προηγουμένως να μολυνθεί από τον ιό HIV και έλαβε αρνητικό αποτέλεσμα εξέτασης, είναι απαραίτητο να επανεξεταστεί τουλάχιστον 6 μήνες μετά το συμβάν κινδύνου.

Ένα θετικό αποτέλεσμα σημαίνει ότι έχουν βρεθεί αντισώματα HIV στο αίμα του ατόμου.

Αυτή η κατάσταση ονομάζεται οροθετικότητα - το άτομο έχει μολυνθεί από τον ιό HIV. Είναι σημαντικό να κατανοήσουμε ότι ένα θετικό αποτέλεσμα υποδηλώνει μόνο μόλυνση από τον ιό HIV, όχι AIDS.

Ωστόσο, είναι εξαιρετικά σημαντικό, αφού λάβετε ένα θετικό αποτέλεσμα, να συμβουλευτείτε έναν γιατρό για συμβουλές και, εάν είναι απαραίτητο, ιατρική βοήθεια, που θα επιτρέψει τη διατήρηση της ποιότητας ζωής σε καλό επίπεδο για μεγάλο χρονικό διάστημα.

Απροσδιόριστο αποτέλεσμα. Σε σπάνιες περιπτώσεις, το αποτέλεσμα του τεστ αντισωμάτων HIV είναι ασαφές.

Το εργαστήριο δεν μπορεί να απαντήσει αν το άτομο είναι οροθετικό ή οροαρνητικό. Σε τέτοιες περιπτώσεις, είναι απαραίτητο να συμβουλευτείτε γιατρό και να κάνετε ξανά εξέταση.

Η διάγνωση της λοίμωξης από τον ιό HIV μπορεί να γίνει στο εργαστήριο ανιχνεύοντας συγκεκριμένα αντισώματα στον ιό. Σε πολλές άλλες ιογενείς ασθένειες, η παρουσία αντισωμάτων υποδηλώνει προηγούμενη μόλυνση. Ωστόσο, δεδομένου ότι η χρόνια λοίμωξη αναπτύσσεται με λοίμωξη HIV, τα οροθετικά άτομα δεν μολύνονται μόνο ενεργά, αλλά και μεταδοτικά.

Ένα ορολογικό τεστ για τον προσδιορισμό της παρουσίας αντισωμάτων κατά του HIV έγινε ευρέως διαθέσιμο το 1985. Η πιο συχνά χρησιμοποιούμενη μέθοδος είναι μια ενζυμική ανοσοπροσροφητική δοκιμασία (ELISA), αλλά άλλοι τύποι δοκιμών αντισωμάτων όπως η συγκόλληση σωματιδίων και η ELISA "Dot". Οι δοκιμές μπορούν να πραγματοποιηθούν γρήγορα και εύκολα και δεν απαιτούν πολύπλοκο υλικό.

Αν και οι προαναφερθείσες δοκιμές είναι πολύ ευαίσθητες, μπορούν να παράγουν ψευδή αποτελέσματα και ένα θετικό αποτέλεσμα πρέπει να επιβεβαιωθεί περαιτέρω με μια πρόσθετη δοκιμή όπως στύπωμα Western ή έμμεσο ανοσοφθορισμό.

Είναι επίσης δυνατός ο άμεσος προσδιορισμός των αντιγόνων HIV (ιός ή ιική πρωτεΐνη) στο σπέρμα. η βιομηχανία παράγει τα απαραίτητα κιτ αντιδραστηρίων. Αυτές οι δοκιμές αναπτύχθηκαν αρχικά ως μια προσπάθεια λήψης ενός εργαστηριακού δείκτη μόλυνσης κατά τη διάρκεια του «παραθύρου» μεταξύ μόλυνσης και σχηματισμού αντισωμάτων, το οποίο συνήθως διαρκεί από 4 έως 16 εβδομάδες. Ο έλεγχος αντιγόνου χρησιμοποιείται πλέον ευρύτερα για την παρακολούθηση των αποτελεσμάτων της αντιϊκής θεραπείας σε ασθενείς με AIDS.

Τα προγράμματα προσυμπτωματικού ελέγχου για τη μόλυνση από τον ιό HIV (δηλαδή, ο έλεγχος ολόκληρου του πληθυσμού ή συγκεκριμένων ομάδων του πληθυσμού για να προσδιοριστεί εάν έχουν μολυνθεί ή έχουν κάποια ασθένεια) μπορούν να βοηθήσουν:

  • πρόληψη της μετάδοσης του ιού μέσω αίματος και προϊόντων αίματος, σπέρματος, ιστών ή οργάνων για μεταμόσχευση·
  • να λάβει επιδημιολογικές πληροφορίες σχετικά με τον επιπολασμό και τη συχνότητα του HIV.

Κάθε φορά που συζητείται ένα πρόγραμμα προσυμπτωματικού ελέγχου, όλα τα ζητήματα που επισημαίνονται στη δήλωση του ΠΟΥ (Παράρτημα 4) θα πρέπει να διατυπώνονται με ακρίβεια και να επιλύονται. Τα κακώς σχεδιασμένα και ανεπαρκώς εφαρμοσμένα προγράμματα μπορούν να βλάψουν τη δημόσια υγεία και να οδηγήσουν σε σπατάλη πόρων. Οι ανάγκες δημόσιας υγείας και τα ανθρώπινα δικαιώματα καλύπτονται καλύτερα με την προσεκτική εξέταση μιας σειράς τεχνολογικών και υλικοτεχνικών, κοινωνικών, νομικών και ηθικών θεμάτων πριν ληφθεί η απόφαση να προχωρήσουμε σε πρόγραμμα προσυμπτωματικού ελέγχου.

Ο υποχρεωτικός έλεγχος για τον HIV έχει πολύ περιορισμένο ρόλο στα προγράμματα πρόληψης και ελέγχου του AIDS.

Ο τακτικός έλεγχος δότη βοηθά στην πρόληψη της μετάδοσης του HIV μέσω αίματος, σπέρματος ή άλλων κυττάρων, ιστών και οργάνων. Μέρος αυτής της εξέτασης είναι η ενημερωμένη συγκατάθεση και η διαβούλευση, όπου πρέπει να τηρείται το απόρρητο.

Ο προσυμπτωματικός έλεγχος για οροθετικά άτομα μπορεί να χρησιμοποιηθεί για τον προσδιορισμό του επιδημιολογικού τύπου του HIV, ο οποίος είναι απαραίτητος για την αξιολόγηση περιοχών και πληθυσμών που χρειάζονται ειδικά εκπαιδευτικά προγράμματα ή άλλες προληπτικές υπηρεσίες. Αυτές οι έρευνες θα πρέπει να διεξάγονται με μεθόδους που δεν απειλούν τα ανθρώπινα δικαιώματα. Θα πρέπει να γίνονται κατά τη διάρκεια της διαβούλευσης, είτε με τη συγκατάθεση ενός ενημερωμένου ατόμου, με σεβασμό της εμπιστευτικότητας, είτε με ανώνυμο, δωρεάν τρόπο (χωρίς καταχώριση άλλων προσωπικών στοιχείων).

Ο εθελοντικός έλεγχος του AIDS μπορεί να αποτελέσει μέρος της υγειονομικής περίθαλψης για ύποπτες ασθένειες που σχετίζονται με τον HIV και μπορεί να συνδυαστεί με πληροφορίες, εκπαίδευση, συμβουλευτική και άλλες υποστηρικτικές υπηρεσίες για την προώθηση βιώσιμης αλλαγής συμπεριφοράς. Στο εθελοντικό τεστ HIV, είναι πολύ σημαντικό να ληφθεί η συγκατάθεση από ένα ενημερωμένο άτομο και η δυνατότητα παροχής συμβουλών, διατηρώντας παράλληλα την εμπιστευτικότητα. Οι εθελοντικές υπηρεσίες τεστ HIV θα πρέπει να είναι ευρέως διαθέσιμες ως μέρος των προγραμμάτων πρόληψης και ελέγχου του AIDS και η πρόσβαση σε τέτοιες υπηρεσίες θα πρέπει να διευκολυνθεί.



προβολές

Αποθήκευση στο Odnoklassniki Αποθήκευση VKontakte