Το τεστ του Coombs πώς γίνεται. Αυτοάνοσες αιμολυτικές αναιμίες

Άμεση δοκιμή Coombs... Με τη βοήθεια αυτής της δοκιμής, αποδεικνύεται η παρουσία αποκλειστικών αντισωμάτων που καθορίζονται από τα ερυθροκύτταρα του παιδιού. Ένα θετικό άμεσο τεστ υποδηλώνει ευαισθητοποίηση και είναι ένα πειστικό σημάδι αιμολυτική νόσοςτο νεογέννητο ακόμη και πριν εμφανιστούν άλλα κλινικά σημεία. Κατ 'εξαίρεση και μόνο σε πολύ σοβαρές περιπτώσεις, το άμεσο τεστ Coombs μπορεί να αποδειχθεί αρνητικό λόγω της ήδη αρχισμένης, σχεδόν πλήρους αιμόλυσης ευαισθητοποιημένων ερυθροκυττάρων.

Η δοκιμή Direct Coombs πραγματοποιείται ως εξής: 5 σταγόνες αίματος που λαμβάνονται από τη φτέρνα του παιδιού τοποθετούνται σε δοκιμαστικό σωλήνα και προστίθενται 5 ml φυσιολογικού ορού. Ανακατέψτε καλά και φυγοκεντρήστε για 10 λεπτά. Ένα διαυγές υγρό διαχωρίζεται πάνω από το ίζημα των ερυθροκυττάρων. Στη συνέχεια προστίθενται ξανά 5 ml φυσιολογικού διαλύματος, αναμιγνύονται και φυγοκεντρούνται. Μετά από τρεις φορές ανάμιξη με φυσιολογικό ορό, τα ερυθροκύτταρα πλένονται καλά. Μετά τον τελευταίο διαχωρισμό του υπερκειμένου, το ίζημα των ερυθροκυττάρων σε ποσότητα 0,1 ml αναμιγνύεται με 0,9 ml φυσιολογικού ορού. Απλώστε 2-3 σταγόνες από αυτό το μείγμα σε μια γυάλινη αντικειμενοφόρο πλάκα και προσθέστε μία σταγόνα ορού Coombs. Η παρουσία συγκόλλησης δείχνει ότι η αντίδραση είναι θετική (θετική άμεση δοκιμή Coombs). Η μελέτη πρέπει να διεξάγεται σε θερμοκρασία δωματίου άνω των 16 ° για να αποφευχθεί η δράση των ψυχρών συσσωματωμάτων.

Έμμεσο δείγμα Coombsχρησιμεύει ως απόδειξη της παρουσίας ελεύθερων αντισωμάτων στον μητρικό ορό και πραγματοποιείται με τον μητρικό ορό.

Η αιμολυτική νόσος σε νεογέννητο με ασυμβατότητα Rh συνήθως εκδηλώνεται μετά τη δεύτερη εγκυμοσύνη. Το πρώτο παιδί γεννιέται υγιές, το δεύτερο με σημάδια ήπιας αναιμίας και μόνο μετά την τρίτη εγκυμοσύνη γεννιούνται παιδιά με εμφανή σημάδια αιμολυτικής νόσου. Μόνο σε προ-ευαισθητοποιημένες γυναίκες, ακόμη και κατά την πρώτη εγκυμοσύνη, μπορεί να γεννηθεί ένα παιδί με συμπτώματα αιμολυτικής νόσου. Σε ορισμένες περιπτώσεις, η ανοσοποίηση προκαλεί έκτρωση και θνησιγένεια. Για την εμφάνιση και τη σοβαρότητα της νόσου, η κατάσταση του πλακούντα και η διάρκεια έκθεσης του εμβρύου στις μητρικές συγκολλητίνες είναι σημαντικές. Όταν οι συγκολλητίνες εμφανίζονται 10-14 εβδομάδες πριν από τον τοκετό, συνήθως παρατηρούνται υποκλινικές μορφές σε ένα παιδί. Η πρώιμη εμφάνιση συγκολλητίνων, 15-26 εβδομάδες πριν τον τοκετό, προκαλεί σοβαρές μορφές της νόσου. Σε όλες τις μορφές της νόσου, η κύρια διαδικασία είναι η αιμόλυση. Συνέπεια της αντίδρασης αντιγόνου-αντισώματος είναι η αιμόλυση, βλάβη στα ηπατικά και εγκεφαλικά τριχοειδή αγγεία. Ανάλογα με την αλλοίωση που επικρατεί, παρατηρούνται διάφορες μορφές της νόσου. Ορισμένα αναφυλακτικά φαινόμενα είναι επίσης επικίνδυνα. Οδηγούν στο σχηματισμό ουσιών που μοιάζουν με ισταμίνη που προκαλούν σοβαρές βλάβες στο ηπατικό κύτταρο και ιδιαίτερα στα γαγγλιακά κύτταρα των βασικών πυρήνων, στο κέρατο του αμμωνίου, στον επιμήκη μυελό και ακόμη και στον εγκεφαλικό φλοιό. Όταν τα ηπατικά κύτταρα έχουν υποστεί βλάβη, ο ηπατικός ίκτερος προστίθεται στον εξωηπατικό ίκτερο. Τα παιδιά πεθαίνουν με σοβαρά συμπτώματα πυρηνικού ίκτερου. Εάν επιβιώσουν, τα συμπτώματα της ήττας παραμένουν νευρικό σύστημα(διαταραχές από το εξωπυραμιδικό σύστημα με κινήσεις χοροαθέτωσης, ένα είδος χορευτικού βηματισμού, αναγκαστικές κινήσεις του κεφαλιού, μερικές φορές διαταραχή του συντονισμού των εκούσιων κινήσεων με συχνές πτώσεις, αυξημένο μυϊκό τόνο, νοητική καθυστέρηση, δηλαδή με σημεία της λεγόμενης εγκεφαλοπάθειας posticteria infantum).

Δοκιμή Coombs

Η δοκιμή Direct Coombs είναι μια δοκιμή αντισφαιρίνης (συγκόλληση σε πηκτή, σας επιτρέπει να ανιχνεύσετε πλήρη δισθενή αντισώματα), με την οποία προσδιορίζονται αντισώματα IgG και το συστατικό C3 του συμπληρώματος στην επιφάνεια των ερυθροκυττάρων. Τυπικά, τα αντισώματα που ανιχνεύονται με άμεση δοκιμή Coombs έχουν μια ευρεία εξειδίκευση που δεν σχετίζεται με ένα καλά εδραιωμένο αντιγόνο. Ένα θετικό άμεσο τεστ Coombs υποδηλώνει σαφώς την παρουσία αιμολυτικής αναιμίας σε έναν ασθενή, αν και δεν υποφέρουν όλοι οι ασθενείς με θετική άμεση δοκιμή αντισφαιρίνης από αυτή τη νόσο. Σε περίπου 10% των ασθενών, τα αντισώματα ή τα συστατικά του συμπληρώματος στη μεμβράνη των ερυθροκυττάρων δεν μπορούν να ανιχνευθούν με άμεσο τεστ Coombs (αρνητικό τεστ), αλλά, παρόλα αυτά, πάσχουν από αυτοάνοση αιμολυτική αναιμία. Για να αποσαφηνιστεί η ιδιαιτερότητα των αντισωμάτων σε τέτοιες περιπτώσεις, χρησιμοποιούνται δοκιμές με έκλουση τους. Ένα άμεσο τεστ Coombs, το οποίο είναι θετικό μόνο για συμπλήρωμα, σχετίζεται συνήθως με αντισώματα ψυχρού IgM. Σε αυτή την περίπτωση, αντισώματα IgM δεν υπάρχουν στα ερυθροκύτταρα στη βασική θερμοκρασία του σώματος. Ωστόσο, λόγω του γεγονότος ότι τα αντισώματα IgM σταθεροποιούν ενεργά το συμπλήρωμα και το συμπλήρωμα παραμένει στα ερυθροκύτταρα, με αυτή τη μορφή αυτοάνοσης αιμολυτικής αναιμίας (ασθένεια ψυχρής συσσωματώσεως), το τεστ Coombs θα είναι θετικό μόνο για το συμπλήρωμα.

Το τεστ του Direct Coombs είναι θετικό για αυτοάνοση αιμολυτική αναιμία που προκαλείται από θερμά αντισώματα, αυτοάνοση αναιμία φαρμάκων (κατά τη λήψη μεθυλντόπα, έως και το 20% των ασθενών έχουν θετική αντίδραση), προσροφητικό φάρμακο τύπου αιμολυτικής αναιμίας, ανοσοσυμπλέγμα τύπου αιμολυτικής αναιμίας (δοκιμή είναι θετική μόνο για την αναλογία C3) αυτοάνοση αιμολυτική αναιμία που προκαλείται από κρύα αντισώματα - ασθένεια ψυχρής συγκολλητίνης (το τεστ είναι θετικό μόνο για C3). Με παροξυσμική κρύα αιμοσφαιρινουρία, το άμεσο τεστ του Coombs είναι αρνητικό.
Στην οξεία περίοδο της νόσου, λόγω της καταστροφής των ερυθροκυττάρων, στα οποία καταγράφηκε μεγάλος αριθμός αντισωμάτων, με αιμολυτική κρίση, καθώς και με ανεπαρκή ποσότητα αντισωμάτων στη χρόνια πορεία της νόσου, αρνητική άμεση Μπορεί να παρατηρηθεί η δοκιμή Coombs.

:

• Σημαντική προϋπόθεση για τη διασφάλιση της ποιότητας εργαστηριακή έρευνατο δείγμα αίματος λαμβάνεται με άδειο στομάχι, το πρωί (πριν τις 12:00).
• 12 ώρες πριν από τη μελέτη, η κατανάλωση αλκοόλ, το κάπνισμα, η πρόσληψη τροφής πρέπει να αποκλείονται και η σωματική δραστηριότητα να περιορίζεται.
• Το πρωί της ημέρας της αιμοληψίας, μπορείτε να πιείτε νερό.
• Αποκλείστε τη λήψη φαρμάκων. εάν δεν είναι δυνατή η ακύρωση του φαρμάκου, πρέπει να ενημερώσετε το εργαστήριο σχετικά.
• Συνιστάται να λαμβάνετε το υλικό πριν πραγματοποιήσετε οποιεσδήποτε ιατρικές διαγνωστικές διαδικασίες.
• Κατά την αξιολόγηση του επιπέδου των ορμονών στις γυναίκες, είναι σημαντικό να ληφθεί υπόψη η ημέρα του εμμηνορροϊκού κύκλου, όταν είναι το πλέον βέλτιστο να προσδιοριστούν ορισμένες ορμόνες. Μπορείτε να λάβετε αυτές τις πληροφορίες από το γιατρό σας.

Δείκτης	Χαρακτηριστικό γνώρισμα
Αναλυτής και σύστημα δοκιμής	Κάρτες gel? DiaMed AG (Ελβετία)
Τιμές αναφοράς	Αρνητικό αποτέλεσμα / Θετικό αποτέλεσμα
Παρεμβαίνοντες παράγοντες. φαρμακευτική αγωγή
Ένα θετικό τεστ είναι δυνατό όταν λαμβάνετε τα ακόλουθα φάρμακα: ακεταμινοφαίνη, σαλικυλικό οξύ, αμινοπυρίνη, αντιισταμινικά, Carbromal, κεφαλοσπορίνες, χλωροπρομαζίνη, χλωροπροπαμίδη, σισπλατίνη, κλονιδίνη, διπυρόνη, αιθοσουξιμίδιο, φενφλουραμίνη, fuadin, υδραλαζίνη, υδροχλωροθειαζίδη, ιμπουπροφέν, ινσουλίνη, ισονιαζίδη, λεβοντόπα, mefenyllanic οξύ, methyllidin, φαινακετίνη, φαινυλβουταζόνη, προβενεσίδη, προκαϊναμίδη, κινιδίνη, κινίνη, ριφαμπίνη, στρεπτομυκίνη, σουλφοναμίδια, παράγωγα σουλφονυλουρίας, τετρακυκλίνη, τριαμτερένιο, τριμελίτης ανυδρίτης
Ενδείξεις για ραντεβού
Διάγνωση ανοσοποιητικής αιμολυτικής αναιμίας, αιμολυτικής νόσου νεογέννητων, ανοσοποιητική αιμολυτική αναιμία φαρμάκων, αντιδράσεις αιμολυτικής μετάγγισης
Ερμηνεία αποτελεσμάτων
Η κανονική άμεση δοκιμή του Coombs είναι αρνητική. Δοκιμή θετικών Coombs σε: αυτοάνοση αιμολυτική αναιμία. αιμολυτική νόσος του νεογέννητου · φαρμακευτική ανοσοποιητική αιμολυτική αναιμία. αιμολυτικές αντιδράσεις μετάγγισης

Δοκιμή συγκόλλησης για τον προσδιορισμό αντισωμάτων κατά της ρέζας (έμμεση αντίδραση Coombs)ισχύουνσε ασθενείς με ενδοαγγειακή αιμόλυση. Σε μερικούς από αυτούς τους ασθενείς, εντοπίζονται αντισώματα κατά του ρέζους που είναι ατελή, μονοσθενή. Αλληλεπιδρούν ειδικά με Rh-θετικά ερυθροκύτταρα, αλλά δεν προκαλούν τη συγκόλλησή τους. Η παρουσία τέτοιων ελλιπών αντισωμάτων προσδιορίζεται με έμμεση δοκιμή Coombs. Για να γίνει αυτό, ορός αντισφαιρίνης (αντισώματα έναντι ανθρώπινων ανοσοσφαιρινών) προστίθεται στο σύστημα αντισωμάτων κατά της ρέζας + Rh-θετικά ερυθροκύτταρα, το οποίο προκαλεί συγκόλληση ερυθροκυττάρων. Χρησιμοποιώντας την αντίδραση Coombs, διαγιγνώσκονται παθολογικές καταστάσεις που σχετίζονται με ενδοαγγειακή λύση ερυθροκυττάρων ανοσολογικής προέλευσης, για παράδειγμα, αιμολυτική νόσος νεογέννητων: τα ερυθροκύτταρα ενός Rh-θετικού εμβρύου συνδυάζονται με ελλιπή αντισώματα έναντι του παράγοντα Rh που κυκλοφορεί στο αίμα, τα οποία έχουν διέσχισε τον πλακούντα από μητέρα Rh-αρνητική.

Μηχανισμός... Η δυσκολία ανίχνευσης ελλιπών (μονοσθενών) αντισωμάτων οφείλεται στο γεγονός ότι αυτά τα αντισώματα, που συνδέονται με τους επίτοπους ενός συγκεκριμένου αντιγόνου, δεν σχηματίζουν δομή πλέγματος και η αντίδραση μεταξύ αντιγόνων και αντισωμάτων δεν ανιχνεύεται με συγκόλληση, καθίζηση ή άλλα δοκιμές. Για την ταυτοποίηση των σχηματισμένων συμπλοκών αντιγόνου-αντισώματος, πρέπει να χρησιμοποιηθούν επιπλέον συστήματα δοκιμής. Για την ανίχνευση ελλιπών αντισωμάτων, για παράδειγμα, στο αντιγόνο Rh των ερυθροκυττάρων στον ορό αίματος εγκύου, η αντίδραση πραγματοποιείται σε δύο στάδια: 1) ερυθρά αιμοσφαίρια που περιέχουν αντιγόνο Rh προστίθενται σε διπλάσιες αραιώσεις του ορού δοκιμής και διατηρείται στους 37 ° C για μία ώρα. 2) Ορός αντι-σφαιρίνης αντι-ανθρώπου κουνελιού (σε προηγουμένως τιτλοδοτημένη αραίωση εργασίας) προστίθεται στα ερυθροκύτταρα που πλένονται καλά μετά το πρώτο στάδιο. Μετά από επώαση για 30 λεπτά στους 37 ° C, τα αποτελέσματα εκτιμώνται με την παρουσία αιμοσυγκόλλησης (θετική αντίδραση). Είναι απαραίτητος ο έλεγχος των συστατικών της αντίδρασης: 1) ορός αντισφαιρίνης + προφανώς ευαισθητοποιημένος από συγκεκριμένα αντισώματα ερυθροκύτταρα. 2) ερυθροκύτταρα υπό αγωγή με φυσιολογικό ορό + ορό αντισφαιρίνης. 3) Rh-αρνητικά ερυθροκύτταρα που υποβλήθηκαν σε θεραπεία με τον μελετημένο ορό + ορό αντισφαιρίνης.

50. Αντίδραση της παθητικής αιμοσυγκόλλησης. Μηχανισμός. Συστατικά. Εφαρμογή.

Έμμεση (παθητική) αντίδραση αιμοσυγκόλλησης(RNGA, RPGA)με βάση τη χρήση ερυθροκυττάρων (ή λατέξ) με αντιγόνα ή αντισώματα προσροφημένα στην επιφάνειά τους, η αλληλεπίδραση των οποίων με τα αντίστοιχα αντισώματα ή αντιγόνα του ορού αίματος ασθενών προκαλεί πρόσφυση και έκρηξη ερυθροκυττάρων στον πυθμένα του δοκιμαστικού σωλήνα ή κυττάρου με τη μορφή χτενισμένου ιζήματος.

Συστατικά.Ερυθροκύτταρα κριού, αλόγου, κουνελιού, κοτόπουλου, ποντικού, ανθρώπου και άλλων, τα οποία συγκομίζονται για μελλοντική χρήση, υποβάλλονται σε επεξεργασία με φορμαλίνη ή γλουταραλδεyδη, μπορούν να χρησιμοποιηθούν για τη ρύθμιση του RNGA. Η ικανότητα προσρόφησης των ερυθροκυττάρων αυξάνεται όταν υποβάλλονται σε επεξεργασία με διαλύματα τανίνης ή χλωριούχου χρωμίου.

Αντιγόνα στο RNGA μπορεί να είναι πολυσακχαριτικά αντιγόνα μικροοργανισμών, εκχυλίσματα βακτηριακών εμβολίων, αντιγόνα ιών και ρικέτσια, καθώς και άλλες ουσίες.

Τα ερυθροκύτταρα που ευαισθητοποιούνται από υπέρταση ονομάζονται διαγνωστικά ερυθροκυττάρων. Για την παρασκευή διαγνωστικών ερυθροκυττάρων, τα ερυθροκύτταρα κριού χρησιμοποιούνται συχνότερα, τα οποία έχουν υψηλή απορροφητική δράση.

Εφαρμογή... Το RNGA χρησιμοποιείται για τη διάγνωση μολυσματικών ασθενειών, για τον προσδιορισμό της γοναδοτροπικής ορμόνης στα ούρα κατά την εγκυμοσύνη, για τον εντοπισμό υπερευαισθησίας σε φάρμακα, ορμόνες και σε ορισμένες άλλες περιπτώσεις.

Μηχανισμός... Το έμμεσο τεστ αιμοσυγκόλλησης (RNGA) έχει σημαντικά υψηλότερη ευαισθησία και ειδικότητα από το τεστ συγκόλλησης. Χρησιμοποιείται για τον εντοπισμό του παθογόνου παράγοντα από την αντιγονική του δομή ή για την ένδειξη και ταυτοποίηση βακτηριακών προϊόντων - τοξινών στο παθολογικό υλικό που μελετήθηκε. Συνεπώς, χρησιμοποιούνται τυπικά (εμπορικά) διαγνωστικά αντισώματος ερυθροκυττάρων, τα οποία λαμβάνονται με προσρόφηση ειδικών αντισωμάτων στην επιφάνεια των μαυρισμένων (επεξεργασμένων με τανίνη) ερυθροκυττάρων. Οι σειριακές αραιώσεις του υλικού δοκιμής παρασκευάζονται στα φρεάτια των πλαστικών πλακών. Στη συνέχεια, ο ίδιος όγκος εναιωρήματος 3% ερυθροκυττάρων φορτωμένων με αντίσωμα προστίθεται σε κάθε φρεάτιο. Εάν είναι απαραίτητο, η αντίδραση τοποθετείται παράλληλα σε διάφορες σειρές φρεατίων με ερυθροκύτταρα φορτωμένα με αντισώματα διαφορετικής εξειδίκευσης ομάδας.

Μετά από 2 ώρες επώασης στους 37 ° C, λάβετε υπόψη τα αποτελέσματα, αξιολογώντας εμφάνισηίζημα ερυθροκυττάρων (χωρίς ανακίνηση): με αρνητική αντίδραση, εμφανίζεται ένα ίζημα με τη μορφή συμπαγούς δίσκου ή δακτυλίου στο κάτω μέρος του φρεατίου, με θετική αντίδραση, χαρακτηριστικό δαντελένιο ίζημα ερυθροκυττάρων, λεπτή μεμβράνη με ανώμαλα άκρα Το

Κανονικά, τα αντισώματα στα ερυθρά αιμοσφαίρια απουσιάζουν στο αίμα.

Η δοκιμή Direct Coombs είναι μια δοκιμή αντισφαιρίνης (συγκόλληση σε πηκτή, η οποία επιτρέπει την ανίχνευση πλήρων δισθενών αντισωμάτων), με τη βοήθεια της οποίας προσδιορίζονται αντισώματα IgG και το συστατικό C3 του συμπληρώματος στην επιφάνεια των ερυθροκυττάρων. Τυπικά, τα αντισώματα που ανιχνεύονται με άμεση δοκιμή Coombs έχουν μια ευρεία εξειδίκευση που δεν σχετίζεται με ένα καλά εδραιωμένο αντιγόνο. Ένα θετικό άμεσο τεστ Coombs υποδηλώνει σαφώς την παρουσία αιμολυτικής αναιμίας σε έναν ασθενή, αν και δεν υποφέρουν όλοι οι ασθενείς με θετικό άμεσο τεστ αντισφαιρίνης από αυτήν την ασθένεια. Σε περίπου 10% των ασθενών, αντισώματα ή συστατικά συμπληρώματος στη μεμβράνη των ερυθροκυττάρων δεν μπορούν να ανιχνευθούν με άμεσο τεστ Coombs (αρνητικό τεστ), αλλά παρόλα αυτά πάσχουν από αυτοάνοση αιμολυτική αναιμία. Για να διευκρινιστεί η ιδιαιτερότητα των αντισωμάτων σε τέτοιες περιπτώσεις, χρησιμοποιούνται δοκιμές με έκλουση τους. Μια άμεση δοκιμή Coombs, η οποία είναι θετική μόνο για συμπλήρωμα, σχετίζεται συνήθως με αντισώματα ψυχρού IgM. Σε αυτή την περίπτωση, αντισώματα IgM δεν υπάρχουν στα ερυθροκύτταρα στη βασική θερμοκρασία του σώματος. Ωστόσο, λόγω του γεγονότος ότι τα αντισώματα IgM σταθεροποιούν ενεργά το συμπλήρωμα και το συμπλήρωμα παραμένει στα ερυθροκύτταρα, με αυτή τη μορφή αυτοάνοσης αιμολυτικής αναιμίας (ασθένεια ψυχρής συσσωματώσεως), το τεστ Coombs θα είναι θετικό μόνο για το συμπλήρωμα.

Το τεστ του Direct Coombs είναι θετικό για αυτοάνοση αιμολυτική αναιμία που προκαλείται από θερμά αντισώματα, αυτοάνοση αναιμία φαρμάκων (κατά τη λήψη μεθυλντόπα, έως 20% των ασθενών έχουν θετική αντίδραση), προσροφητικό φάρμακο τύπου αιμολυτικής αναιμίας, ανοσοσυμπλέγμα τύπου αιμολυτικής αναιμίας (δοκιμή είναι θετικό μόνο για C3) αυτοάνοση αιμολυτική αναιμία που προκαλείται από ψυχρά αντισώματα - ψυχρή ασθένεια συγκολλητίνης (το τεστ είναι θετικό μόνο για C3). Με παροξυσμική κρύα αιμοσφαιρινουρία, το άμεσο τεστ του Coombs είναι αρνητικό.

Έμμεση δοκιμή Coombs - μια έμμεση δοκιμή αντισφαιρίνης (ανιχνεύει ελλιπή αντισώματα) ανιχνεύει άτυπα αντισώματα στο αίμα, συμπεριλαμβανομένων των αλλοαντισωμάτων, σε ξένα αντιγόνα ερυθροκυττάρων. Πήρε το όνομά του (έμμεσο) λόγω του ότι προχωρά σε 2 στάδια. Αρχικά, ο ορός αίματος του ασθενούς, ο οποίος περιέχει ατελή αντισώματα, αλληλεπιδρά με το προστιθέμενο σωμάτιο Ag-diagnosticum χωρίς ορατές εκδηλώσεις. Στο δεύτερο στάδιο, ο προστιθέμενος ορός αντισφαιρίνης αλληλεπιδρά με ατελή αντισώματα προσροφημένα σε αντιγόνα, με την εμφάνιση ενός ορατού ιζήματος. Η ομόλογη (αλλογενής) μετάγγιση ερυθροκυττάρων ή η εγκυμοσύνη είναι η μεγαλύτερη κοινούς λόγουςο σχηματισμός αυτών των αντι-ερυθροκυττάρων αντισωμάτων. Ο συνδυασμός θετικού έμμεσου τεστ Coombs με αρνητικό άμεσο τεστ δεν κάνει τίποτα για τη διάγνωση της αυτοάνοσης αιμολυτικής αναιμίας. Ένα θετικό έμμεσο τεστ Coombs προκαλεί ορισμένες δυσκολίες στην επιλογή αίματος για μετάγγιση και διασταυρούμενο έλεγχο για συμβατότητα με διατηρημένο αίμα, αλλά δεν έχει άλλη διαγνωστική αξία.

Η δοκιμή αντισφαιρίνης, που σχεδιάστηκε για την ανίχνευση ελλιπών αντισωμάτων κατά των ερυθροκυττάρων, προτάθηκε από τους Coombs, Morant, Reis το 1945 και αργότερα έλαβε το όνομα του τεστ Coombs. Η ουσία αυτή η μέθοδοςέγκειται στο γεγονός ότι ο ορός αντισφαιρίνης που περιέχει αντισώματα σε ανθρώπινες ανοσοσφαιρίνες, μετά από αντίδραση με ερυθροκύτταρα ευαισθητοποιημένα με ελλιπή αντισώματα, οδηγεί στη συγκόλλησή τους.

Ανάλογα με το αν τα αντισώματα είναι στερεωμένα στην επιφάνεια των ερυθροκυττάρων ή βρίσκονται σε ελεύθερη κατάσταση στο πλάσμα του αίματος, χρησιμοποιείται μια άμεση ή έμμεση δοκιμή Coombs.

Μια άμεση δοκιμή Coombs πραγματοποιείται σε περιπτώσεις όπου υπάρχει λόγος να πιστεύουμε ότι τα ερυθρά αιμοσφαίρια υπό μελέτη είναι ήδη in vivoέχουν ευαισθητοποιηθεί με κατάλληλα αντισώματα, δηλ. η πρώτη φάση της αντίδρασης - στερέωση αντισωμάτων στην επιφάνεια των ερυθροκυττάρων - εμφανίστηκε στο σώμα και η επακόλουθη προσθήκη ορού αντισφαιρίνης προκαλεί συγκόλληση ευαισθητοποιημένων κυττάρων.

Χρησιμοποιώντας μια έμμεση δοκιμή Coombs, ανιχνεύονται ατελή αντισώματα που υπάρχουν στον ορό δοκιμής. Σε αυτή την περίπτωση, η αντίδραση προχωρά σε δύο στάδια. Το πρώτο στάδιο είναι η επώαση των ερυθροκυττάρων δοκιμής με τον ορό δοκιμής, κατά την οποία τα αντισώματα που περιέχονται στο δείγμα ορού δοκιμής στερεώνονται στην επιφάνεια των ερυθροκυττάρων. Το δεύτερο στάδιο είναι η προσθήκη ορού αντισφαιρίνης.

Μέχρι τώρα, η δοκιμή Coombs χρησιμοποιείται ευρέως στην εργαστηριακή πρακτική για τη διάγνωση ανοσοπαθολογικών καταστάσεων, ιδίως για αυτοάνοσες αιμολυτικές αναιμίες, που χαρακτηρίζονται από καταστροφή των ερυθροκυττάρων λόγω της σύνδεσης της κυτταρικής μεμβράνης με αντισώματα και (ή) συστατικά του συμπληρώματος Σύστημα. Με τη βοήθειά του, αποκαλύπτεται η παρουσία Ig G (συνήθως Ig G1 και Ig G3) στη μεμβράνη των ερυθροκυττάρων, η οποία μπορεί να ενεργοποιήσει το συμπλήρωμα και μερικές φορές το συμπλήρωμα (C3d). Ωστόσο, στην οξεία περίοδο της νόσου λόγω της καταστροφής των ερυθροκυττάρων, στα οποία στερεώθηκε ένας μεγάλος αριθμός αντισωμάτων, με αιμολυτική κρίση, καθώς και με ανεπαρκή ποσότητα αντισωμάτων στη χρόνια πορεία της νόσου, αρνητικό μπορεί να παρατηρηθεί άμεση δοκιμή Coombs.

Θα πρέπει να τονιστεί ότι το έμμεσο τεστ Coombs παραμένει η καλύτερη μέθοδος για την ατομική επιλογή μέσων μετάγγισης, καθώς επιτρέπει τον ακριβέστερο προσδιορισμό της ατομικής συμβατότητας του δότη και του λήπτη όσον αφορά τα αντιγόνα ερυθροκυττάρων.

Συνιστάται επιπρόσθετη εκτέλεση άμεσης δοκιμής αντισφαιρίνης για την παρουσία αυτοαντισωμάτων κατά την εξέταση όλων των αποδεκτών οργάνων και ιστών στην προ-μεταμοσχευτική περίοδο και λήπτες αιμοποιητικών βλαστικών κυττάρων επίσης μετά τη μεταμόσχευση.

Εκτός από την ανοσοαιματολογία και τη μεταγγειολογία, οι δοκιμές αντισφαιρίνης χρησιμοποιούνται ευρέως στη διάγνωση μιας σειράς παθολογικών καταστάσεων: σε αιματολογικές παθήσεις, συμπεριλαμβανομένων των λεμφοπολλαπλασιαστικών ασθενειών, συστηματικές ασθένειεςσυνδετικός ιστός, νόσος του Sjogren, χρόνια ενεργός ηπατίτιδα κ.λπ.

Οι δοκιμές του Coombs χρησιμοποιούνται ενεργά στην ιατρική γενετική και την ιατροδικαστική για τον προσδιορισμό επιφανειακών αντιγόνων ερυθροκυττάρων.

Το τεστ του Coombs αναφέρεται σε μια αρκετά επίπονη ερευνητική μέθοδο που απαιτεί ιδιαίτερη προσοχή στην εφαρμογή της. Κατά τη χρήση του, υπάρχουν ορισμένες δυσκολίες που σχετίζονται, ιδίως, με την ερμηνεία ασθενώς θετικών αντιδράσεων. Είναι γνωστό ότι ψευδώς ασθενώς θετικές ή αρνητικές αντιδράσεις κατά τη διεξαγωγή των δοκιμών Coombs μπορεί να είναι το αποτέλεσμα της ανεπαρκώς αποτελεσματικής πλύσης των ερυθροκυττάρων, την εξουδετέρωση του αντιδραστηρίου αντισφαιρίνης με ίχνη ορού, καθώς και την επαφή με μια μη λιπαρή επιφάνεια στην οποία μπορεί να αντισφαιρίνη να διορθωθεί, χάνοντας έτσι τη δραστηριότητά του. Ένα άλλο μειονέκτημα της δοκιμής Coombs είναι η αστάθεια του αντιδραστηρίου αντισφαιρίνης, η παραγωγή και αποθήκευση του οποίου έχει ορισμένα χαρακτηριστικά, γεγονός που καθιστά επίσης δύσκολο τον ποσοτικό προσδιορισμό της αντίδρασης αιμοσυγκόλλησης με ορό αντισφαιρίνης.

Επιπλέον, μελέτες που πραγματοποιήθηκαν από τους A. Holburn, D. Voak et al. έχουν δείξει ότι η αιτία των ψευδώς αρνητικών αποτελεσμάτων μπορεί να είναι η υπερβολική ανακίνηση κατά τη διάρκεια της εναιώρησης ενός εναιωρήματος ερυθροκυττάρων. Λάθος αποτελέσματα κατά τη διενέργεια δοκιμών αντισφαιρίνης μπορεί επίσης να προκληθούν από την παρουσία μείγματος αντισυμπληρωματικών αντισωμάτων στο αντιδραστήριο αντισφαιρίνης, ιδίως στα συστατικά συμπληρώματος C3d, C3c, C4c και C4d, τα οποία προσροφώνται στην επιφάνεια των ερυθροκυττάρων δοκιμής κατά την επώαση και δημιουργούν την εμφάνιση θετικού αποτελέσματος.

Αυτά τα μειονεκτήματα μπορούν εύκολα να εξαλειφθούν με προσεκτικό πλύσιμο των δοκιμαστικών δειγμάτων και έλεγχο των συνθηκών αντίδρασης.

Την τελευταία δεκαετία, ισοτονικό διάλυμα χαμηλής ιοντικής ισχύος (LISS) χρησιμοποιήθηκε για να μειώσει το χρόνο της έμμεσης δοκιμής Coombs και να αυξήσει την ευαισθησία του.

Το αδιαμφισβήτητο πλεονέκτημα των δοκιμών αντισφαιρίνης, σύμφωνα με πολλούς συγγραφείς, είναι η υψηλή ευαισθησία τους, η οποία υπερβαίνει σημαντικά την ανάλυση των εναλλακτικών μεθόδων έρευνας που χρησιμοποιούνται για τον εντοπισμό μη συσσωματωμένων αντισωμάτων.

Συγκρίναμε την ανάλυση των μεθόδων εξέτασης ορού αίματος για την παρουσία ελλιπών αντισωμάτων χρησιμοποιώντας ορό πολυγλουκίνης, ζελατίνης και αντισφαιρίνης. Κατά τη διάρκεια της μελέτης, οι τίτλοι των ελλιπών αντι-D-αντισωμάτων παρακολουθήθηκαν σε 140 δείγματα ορού αίματος από ισοάνοσους δότες χρησιμοποιώντας ζελατίνη, πολυγλουκίνη και έμμεσες δοκιμές αντισφαιρίνης. Η διατύπωση αυτών των μεθόδων πραγματοποιήθηκε σύμφωνα με τις γενικά αποδεκτές μεθόδους.

Διαπιστώθηκε ότι όσον αφορά την ανάλυση τους, οι μέθοδοι για την ανίχνευση ευαισθητοποίησης των ερυθροκυττάρων με αντισώματα D-D είναι διατεταγμένα ως εξής: το πιο ευαίσθητο είναι το έμμεσο τεστ Coombs, στη συνέχεια το τεστ ζελατίνης και το λιγότερο ενημερωτικό είναι το τεστ πολυγλυκίνης. Τα αποτελέσματα που αποκτήθηκαν σε αυτή τη σειρά πειραμάτων είναι πλήρως συμβατά με τα δεδομένα της βιβλιογραφίας, τα οποία μας επιτρέπουν να συμπεράνουμε ότι η ευαισθησία των δοκιμών του Coombs είναι αρκετά υψηλή, γεγονός που καθιστά δυνατή την ταυτοποίηση με υψηλό βαθμό αξιοπιστίας της παρουσίας αντι-ερυθροκυττάρων αντισώματα στο σώμα που δεν προκαλούν συσσωμάτωση των ερυθρών αιμοσφαιρίων.

Παρ 'όλα αυτά, κατά την εφαρμογή των δοκιμών Coombs στην πράξη, υπάρχουν περιπτώσεις που δεν εντοπίζονται ελλιπή αντισώματα, αν και η κλινική εικόνα της νόσου ή η προηγούμενη ανοσοποίηση υποδεικνύει την πιθανή παρουσία τους. Σε τέτοιες περιπτώσεις, μπορεί να υποτεθεί ότι η ποσότητα των αντισωμάτων είναι ανεπαρκής για να καθιζάνουν από αντισώματα ορού αντισφαιρίνης.

Αυτό το συμπέρασμα επιβεβαιώθηκε από το δικό μας πείραμα, στο οποίο, χρησιμοποιώντας τη μέθοδο της αναλυτικής μικροηλεκτροφόρησης των κυττάρων, διαπιστώθηκε η παρουσία αντι-D-αντισωμάτων σε ερυθροκύτταρα δοκιμής, τα οποία δεν ανιχνεύθηκαν στην έμμεση δοκιμή Coombs. Σε αυτή τη σειρά πειραμάτων, προστέθηκε ορός αντισφαιρίνης στα ερυθροκύτταρα που επωάστηκαν προηγουμένως με ορούς που ελήφθησαν από το αίμα ανοσοποιημένων δοτών κατά την περίοδο της αντιτελογένεσης σε χρήση, δηλ. κατά την περίοδο που δεν ανιχνεύθηκαν αντισώματα σε αυτά με γνωστές μεθόδους, συμπεριλαμβανομένης της δοκιμής Coombs.

Στις μελέτες που πραγματοποιήθηκαν, τα στοιχεία για την παρουσία ελλιπών αντισωμάτων στην επιφάνεια των ερυθροκυττάρων ήταν στατιστικά σημαντική αλλαγήτο μέγεθος της ηλεκτροφορητικής κινητικότητας των ευαισθητοποιημένων ερυθρών αιμοσφαιρίων μετά την προσθήκη ορού αντισφαιρίνης. Θα πρέπει να σημειωθεί ότι στη συνέχεια, προσδιορίστηκαν αντισώματα αντι-D στον ορό αίματος όλων των ανοσοποιημένων δοτών στην έμμεση δοκιμή Coombs.

Gillerand et al. έδειξε επίσης ότι οι δοκιμές αντισφαιρίνης χαρακτηρίζονται από ένα ορισμένο όριο ευαισθησίας: ένα θετικό αποτέλεσμα σημειώνεται μόνο όταν τουλάχιστον 500 μόρια IgG G στερεώνονται στην επιφάνεια ενός ερυθροκυττάρου.

Επιπλέον, η βιβλιογραφία παρέχει στοιχεία ότι ένα πιθανό αρνητικό αποτέλεσμα της δοκιμής Coombs μπορεί να σχετίζεται με χαμηλή συγγένεια αντισωμάτων που ευαισθητοποιούν τα ερυθροκύτταρα, με αποτέλεσμα να εκλούονται εύκολα από την επιφάνεια των ερυθρών αιμοσφαιρίων κατά τη διαδικασία πλύσης Το

Λαμβάνοντας υπόψη τα παραπάνω, μπορούμε να συμπεράνουμε ότι σε ορισμένες περιπτώσεις ένα αρνητικό αποτέλεσμα της δοκιμής Coombs δεν είναι ακόμη απόδειξη της απουσίας αντισωμάτων που έχουν στερεωθεί στην επιφάνεια των ερυθροκυττάρων.

Είναι γνωστό ότι οι αντιδράσεις του Coombs είναι εξαιρετικά συγκεκριμένες και μπορούν να ανιχνεύσουν τους περισσότερους τύπους ελλιπών αντισωμάτων. Ωστόσο, όπως δείχνουν ορισμένα πειραματικά δεδομένα, οι δοκιμές αντισφαιρίνης μπορεί να είναι θετικές σε μη ανοσολογικές συνθήκες. Ε. Muirhead et al. Τη δεύτερη ημέρα μετά τη χορήγηση φαινυλυδραζίνης, παρατηρήθηκε ότι τα σκυλιά είχαν θετικό τεστ Coombs. Μια τέτοια ταχεία εμφάνιση θετικής αντίδρασης αποδεικνύει την ανοσολογική της φύση και, μάλλον, σχετίζεται με μη ειδική απορρόφηση της πρωτεΐνης στην επιφάνεια των ερυθροκυττάρων.

M. Williams et al. διαπιστώθηκε ότι το κλαβουλανικό οξύ μπορεί επίσης να προκαλέσει θετική αντίδραση, η οποία, σύμφωνα με τους συγγραφείς, σχετίζεται με μη ειδική προσρόφηση πρωτεϊνών πλάσματος στην επιφάνεια των ερυθροκυττάρων. Παρόμοια επίδραση παρατηρήθηκε και με αντιβιοτικά κεφαλοσπορίνης.

Οι συγγραφείς των παραπάνω μελετών τονίζουν τη μη ανοσολογική φύση των θετικών αποτελεσμάτων που προέκυψαν από τις δοκιμές του Coombs και επιμένουν ότι αυτές οι ουσίες μπορούν να προκαλέσουν τροποποίηση των μεμβρανών των ερυθρών αιμοσφαιρίων, με αποτέλεσμα τα ερυθροκύτταρα να προσροφούν πρωτεΐνες (ιδίως , λευκωματίνη), τα οποία υπάρχουν κανονικά στο πλάσμα του αίματος και δεν διαθέτουν ιδιότητες αντισωμάτων. Επιπλέον, είναι πιθανό ότι το ξενοβιοτικό, που απορροφάται στην κυτταρική επιφάνεια, χρησιμεύει ως σύνδεσμος μεταξύ της κυτταρικής μεμβράνης και των πρωτεϊνών του πλάσματος.

Για τη σωστή ερμηνεία των αποτελεσμάτων του καθορισμού δοκιμών αντισφαιρίνης, θα πρέπει επίσης να λαμβάνεται υπόψη η ποσοτική αναλογία μεταξύ νεαρών και ώριμων ερυθροκυττάρων στο περιφερικό αίμα. Διαπιστώθηκε ότι τα δικτυοερυθροκύτταρα που αποβάλλονται από το σώμα κατά την περίοδο της ενισχυμένης αναγέννησης ερυθρών μπορούν να συσσωματωθούν με ορό αντισφαιρίνης.

Θετική άμεση δοκιμή αντισφαιρίνης Εξάλειψη Σημειώνεται επίσης με διάφορα παθολογικές καταστάσεις, συνοδευόμενες από διαταραχές του ανοσοποιητικού συστήματος, φλεγμονώδεις διεργασίες που οδηγούν σε μη ειδική προσρόφηση αντισωμάτων διαφορετικής ειδικότητας στις μεμβράνες των ερυθροκυττάρων. Αυτό υποδηλώνει ότι τα μόρια Ig G δεν αλληλεπιδρούν με συγκεκριμένα αντιγόνα ερυθροκυττάρων, αλλά είναι σταθερά μόνο στην επιφάνεια των υπό μελέτη κυττάρων.

Πρέπει να ληφθεί υπόψη ότι κατά τη δημιουργία ενός τεστ Coombs σε περιπτώσεις ασθενειών που χαρακτηρίζονται από ανάπτυξη δυσπρωτεϊναιμίας ή εμφάνιση παραπρωτεϊνών, ένα θετικό αποτέλεσμα οφείλεται στην παρουσία στην επιφάνεια ερυθροκυττάρων πρωτεϊνών που δεν έχουν τις ιδιότητες αντισωμάτων, το οποίο υποδεικνύει επίσης την ανεπαρκή εξειδίκευση των δειγμάτων αντισφαιρίνης σχετικά με τη φύση της πρωτεΐνης που ανιχνεύθηκε με τη βοήθειά τους.

Έτσι, όπως έχουν δείξει πολυάριθμες μελέτες, τα θετικά αποτελέσματα των άμεσων και έμμεσων δοκιμών αντισφαιρίνης δεν είναι απόλυτη απόδειξη της παρουσίας αντισωμάτων, αφού θετικές αντιδράσεις μπορούν να παρατηρηθούν σε διάφορες παθολογικές καταστάσεις που δεν σχετίζονται με ισοευαισθητοποίηση ή αυτοευαισθητοποίηση του σώματος. Επομένως, μόνο μια σύγκριση των αποτελεσμάτων αρκετών ανοσοσερολογικών μεθόδων με κλινική εικόναη ασθένεια σας επιτρέπει να κρίνετε πλήρως την αναπτυσσόμενη παθολογική διαδικασία.

Ένα θετικό έμμεσο τεστ αντισφαιρίνης με αρνητικό άμεσο τεστ συνήθως υποδεικνύει την παρουσία ελεύθερων αλλοαντισωμάτων στον ορό που μελετήθηκε, που σχετίζεται με προηγούμενες μεταγγίσεις αίματος ή εγκυμοσύνες.

Το τεστ του Coombs είναι συχνά θετικό με έξαρση της παροξυσμικής νυκτερινής αιμοσφαιρινουρίας. ένα θετικό τεστ Coombs με anti-C3 και anti-C3dg είναι δείκτης της ψυχρής ασθένειας συγκολλητίνης.

Σε περιπτώσεις όπου ο κίνδυνος ανάπτυξης αιμολυτικής νόσου των νεογνών είναι μεγάλος, τα αποτελέσματα των άμεσων και έμμεσων εξετάσεων αντισφαιρίνης έχουν μεγάλη σημασία για τη διάγνωση (συχνότερα κατά τη διάρκεια της εγκυμοσύνης) και, εάν είναι απαραίτητο, τη δυναμική παρακολούθηση της εμφάνισης και της αλλαγής του αντισώματος τίτλος Τις περισσότερες φορές, η αιμολυτική ασθένεια των νεογνών σχετίζεται με ασυμβατότητα μεταξύ της μητέρας και του εμβρύου για το αντιγόνο D, λιγότερο συχνά για τα αντιγόνα του συστήματος AB0 και ακόμη λιγότερο συχνά για άλλα αντιγόνα (C, C, K, κ.λπ.). Τα αντίθετα που προκύπτουν Ια, ως κατά κανόνα, ελλιπή αντισώματα της κατηγορίας Ig G, ανιχνεύονται σαφώς στην έμμεση δοκιμή αντισφαιρίνης. Σε αυτήν την ασθένεια, ο σωστός τίτλος και η εξειδίκευση των αναγνωρισμένων αντισωμάτων είναι μεγάλης σημασίας, καθώς υπάρχει κάποια συσχέτιση μεταξύ του επιπέδου των αντι-ερυθροκυττάρων αντισωμάτων στο αίμα μιας εγκύου γυναίκας και της πιθανής πρόγνωσης της σοβαρότητας της αιμολυτικής νόσου.

Το έμμεσο τεστ Coombs απαιτείται επίσης στην κλινική πράξη για να διασφαλιστεί η ασφαλής θεραπεία μετάγγισης. Η εφαρμογή του αποτελεί υποχρεωτικό συστατικό ανοσοαιματολογικών μελετών δοτών και διαφόρων κατηγοριών λήπτων, καθώς και εξετάσεων ρουτίνας όλων των ασθενών ιατρικών ιδρυμάτων που μπορεί να απαιτούν μετάγγιση αίματος και των συστατικών του.

Μια έμμεση δοκιμή αντισφαιρίνης χρησιμοποιείται στις ακόλουθες περιπτώσεις:

Για ακριβέστερο προσδιορισμό της Rh-σχέσης (αντιγόνο D) με ασαφή αποτελέσματα του προσδιορισμού του παράγοντα Rh με άλλες μεθόδους (πολυγλουκίνη, ζελατίνη, κ.λπ.).

Για την ανίχνευση ασθενών αντιγόνων ερυθροκυττάρων (συστήματα Kell, Duffy, Kidd, Lewis κ.λπ.) και αντισωμάτων σε αυτά τα αντιγόνα.

Για την ανίχνευση και ταυτοποίηση αλλοάνοσων αντι-ερυθροκυττάρων αντισωμάτων, συμπεριλαμβανομένων αντισωμάτων που προκαλούν αιμολυτικές αντιδράσεις μετά τη μετάγγιση.

Για τον προσδιορισμό της παρουσίας ανοσοσωμάτων του συστήματος AB0 σε αιμολυτικές επιπλοκές μετάγγισης.

Ως δοκιμή για τη συμβατότητα στην ατομική επιλογή του μεταγγιζόμενου αίματος και των συστατικών του.

Έτσι, το τεστ Coombs είναι ένα σημαντικό διαγνωστικό τεστ που χρησιμοποιείται σε διάφορους τομείς της ιατρικής (αιματολογία, μαιευτική, ρευματολογία, μεταγγειολογία, κλινική εργαστηριακή διάγνωση κ.λπ.). Η γνώση των ιδιαιτεροτήτων της δοκιμής Coombs θα βοηθήσει στην αύξηση της αξιοπιστίας των αποτελεσμάτων και θα συμβάλει στη σωστή ερμηνεία των εργαστηριακών δεδομένων.

Λογοτεχνία

1. Αντισώματα. Methods / ed. D. Catty. - Μ .: Mir, 1991.

2. Bayramalibeyli I.E., Ragimov A.A., Gadzhiev A.B.... // Θεραπεία μετάγγισης αναιμιών: σχολικό βιβλίο. εγχειρίδιο για γιατρούς. - Μ .: Πρακτική. ιατρική, 2005. - σελ. 105-106.

3. Volkova O.Ya., Fregatova L.M., Levchenko L.B.// Μεταφυσιολογία. - 2006. - Νο 2. - S. 39-62.

4. Donskov S.I.// Ομάδες αίματος του συστήματος Rhesus: θεωρία και πράξη. - Μ.: VINITI RAN, 2005. - S. 180-186, 195.

5.Ανοσοσερολογία (κανονιστικά έγγραφα) / σύνθ. A.G. Bashlay, S.I. Ντόνσκοφ. - Μ .: VINITI RAN, 1998.

6.Διερεύνηση του συστήματος αίματος στην κλινική πράξη / ed. G.I. Kozinets, V.A. Μακάροφ. - Μ.: Τριάδα-Χ, 1997.

7. Levin V.I.... Στον μηχανισμό της ερυθροδιέρεσης και της ερυθροποίησης στην περίοδο της οξείας μετααιμορραγικής αναιμίας: συγγραφέας. dis ... Καραμέλα. μέλι. επιστήμες. - Μινσκ, 1968.

8. Rahimov A.A., Bayramalibeyli I.E.... // Βασικές αρχές διάγνωσης, πρόληψης και θεραπείας της αναιμίας. - Μ.: GOU VUNMTs MZ RF, 2002. - S. 204-209.

9. Chumakova E.D.... // Πραγματικά προβλήματα αιματολογίας και μεταγγειολογίας: εργασίες του VI Συνεδρίου Αιματολόγων και Μεταγγεολόγων της Δημοκρατίας της Λευκορωσίας, Μινσκ, 24-25 Μαΐου 2007 / εκδ. ΟΛΑ ΣΥΜΠΕΡΙΛΑΜΒΑΝΟΝΤΑΙ. Svirnovsky, M.P. Ποταπνέφ. - Μινσκ: Δημοκρατικό Επιστημονικό και Πρακτικό Κέντρο Αιματολογίας και Μεταγγειολογίας, 2007. - Σ. 50.

10. Coombs R., Mourant A., Race R... // Lancet. - 1945. - Τόμος 2. - Σ. 15.

11. Freedman j... // J. Clin. Πατόλ. - 1979. - Τόμος 32. - Σ. 1014-1018.

12. Holburn A.M... Ελεγχος ποιότητας. Methods in Hematology / ed.Ι. Κάβιλ. - Εδιμβούργο: Churchill Livingstone, 1982. - Τόμος. 4. - Σ. 34-50.

13. Χαν Σ.// CMAJ. - 2006. - Τόμος 175, Αρ. 8. - Σ. 919.

14. Κομάτσου Φ.// Nippon Rinsho. - 2005. - Τόμος 63 (συμπληρωματικό 7). - Σ. 719-721.

15. Κομάτσου Φ.// Nippon Rinsho. - 2005. - Τόμος 63 (συμπληρωματικό 7). - Σ. 716-718.

16. Molthan L., Reidenberg Μ.Μ., Eihman M.F.// New Engl. J. Med. —1976. - Τόμος 277. - Σ. 123-125.

17. Muirhead E.E., GrovesΜ., Brian S... // J. Lab. Clin. Med. —1954. - Τόμος 44. - Σ. 902-903.

18. Rosse W.F.// Hosp. Prac. - 1995. - Ν 105.

19. Voak D., Downie D., ΜουρΣΙ. et al. // Biotests Bull. - 1986. - Τόμος 1. - Σ. 41-52.

20. Voak D., Haigh T., Downie D. et al. Πλυντήρια κυψελών για δοκιμές αντισφαιρίνης. Επανάληψη δοκιμών - μια νέα μέθοδος που καταδεικνύει την αναποτελεσματικότητα ενός μηχανήματος που χρησιμοποιείται ευρέως - το Sorvall CW1 -AF2: αναφορά στον τεχνικό κλάδο DHSS, Φεβρουάριος 1991.

21. Williams M.E., Thomas D., Harman C.P... et al. // Αντιμικροβιακοί παράγοντες και χημειοθεραπεία. —1985. - Σ. 125-127.

22. Zarandona J.M., Yazer Μ.Η... // CMAJ. - 2006. - Τόμος 174, Αρ. 3. - Σ. 305-307.

Ιατρικά νέα. - 2008. - Νο 3. - S. 33-36.

Προσοχή! Το άρθρο απευθύνεται σε ιατρικούς ειδικούς. Η επανεκτύπωση αυτού του άρθρου ή τμημάτων του στο Διαδίκτυο χωρίς υπερσύνδεση στην αρχική πηγή θεωρείται παραβίαση πνευματικών δικαιωμάτων.